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363
- 英文名:
ATP Dependent Dnase
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京ATP依赖的DNase现货价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京ATP依赖的DNase现货价格
品牌:百奥莱博
英文名:ATP Dependent Dnase
编号:BTN120510
在含有ATP的Buffer反应体系中,本产品能够特异性地水解线性双链DNA产生脱氧核糖核酸,但对环状双链DNA不起作用。本产品可用于除去质粒或粘粒等环状DNA样品中残留的少量线性基因组DNA片段的污染,减少对后续实验的影响。在基因工程实验中,制备的质粒和粘粒,即使是通过*化铯/*乙锭梯度离心方法或其它严格的方法制备,也常含有碱裂解操作过程中带来的少量细菌基因组DNA片段的污染,尤其在制备低拷贝克隆载体的质粒或粘粒等时,这种现象更为明显,使用本产品即可以有效的去除这些污染。
产品特点:
1.使用本制品可以有效除去样品中的基因组DNA,然后通过70℃、5 min的加热处理即可使酶完全失活,从而减少基因组污染物对质粒或粘粒等的常规分析、亚克隆和序列测定等后续实验结果的影响。
2.此产品可用于低拷贝的质粒或粘粒的提取及除去质粒等环状DNA中线性基因组DNA污染物。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:以线性化的pMD18 DNA为底物,在1mM ATP存在、pH9.4缓冲液中,37℃反应30分钟,催化生成1nmol脱氧核苷酸所需要的酶量,定义为1活性单位。在10μL反应体系中,加入本产品0.2 U,10×ATP依赖的DNA酶Buffer 1μL,0.2μg的线性化的pMD18 DNA,在37℃条件下反应30分钟,能够使线性化的pMD18 DNA产生95%以上的降解作用。
使用方法:
使用本产品除去 pUC18质粒中含有的大肠杆菌基因组DNA片段污染物(占60%),可以提高阳性克隆的比率。
1.在微量离心管中配制下列反应液:
| 成分 | 样品 | 对照 |
| 10×反应Buffer | 1μL | 1μL |
| pUC18质粒DNA混合物 | 1μg | 1μg |
| ATP依赖的DNA酶 | 2U | - |
| dH2O | Up to 10μL | Up to 10μL |
2.37℃反应2小时。长时间反应效率有下降的倾向,建议反应时间1~2小时。
3.70℃加热5分钟,使ATP依赖的DNA酶失活。
4.在微量离心管中制备下列酶切反应液:
| 成分 | 用量 |
| 10×H Buffer(客户自备) | 1μL |
| 第3步反应液 | 5μL |
| EcoR I(客户自备) | 30U |
| dH2O | Up to 10μL |
5.37℃反应1小时之后,进行60℃ 15 min反应,使EcoR I失活。
6.在微量离心管中制备下列连接反应液:
| 成分 | 用量 |
| 10×T4 DNA Ligase Buffer(客户自备) | 1μL |
| 第5步酶切反应液 | 2μL |
| T4 DNA Ligase(客户自备) | 350 U |
| dH2O | Up to 10μL |
7.16℃反应1小时。
取上述连接反应液2~10μL,转化到JM109感受态细胞中,涂平板培养,进行蓝白菌落筛选并计数。实验结果表明,使用ATP依赖的DNA酶处理的pUC18质粒DNA混合物(含60%大肠杆菌基因组DNA片段)的自连结果中,白色菌落减少80%以上,有效抑制了大肠杆菌基因组DNA的污染。
更多有关北京ATP依赖的DNase现货价格的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·PAGE胶DNA回收试剂盒
编号:BTN70908
英文名称:PAGE DNArc
规格:30次
本试剂盒是专门用于从PAGE凝胶中回收DNA片段和OLIGO的产品。
产品特点:
1.适合于回收100bp以下的DNA片段,包括长度在20nt左右的OLIGO。
2. 操作简单,只有浸泡和离心两步。
3. 回收率在70%以上(具体跟DNA的长度和浸泡的时间密切相关)。
4. 纯度高,本试剂盒回收的DNA和OLIGO可直接用于酶切、连接、PCR登等多种分子生物学实验。
5. 本产品既能回收双链DNA片段,也能回收单链DNA(包括OLIGO)。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 15ml |
| 溶液B | 30ml |
| 溶液C | 30ml |
| DNA洗脱液 | 1.5ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存(长期)或室温保存(短期),有效期为一年。
使用方法:
1.进行PAGE电泳,电泳后染色观察DNA 并确定需要回收的DNA 条带的位置。
2.小心切取含DNA片段的PAGE凝胶。尽可能多地把多余的胶切除,否则多余的胶会影降低DNA的回收效率。胶的重量控制在0.3克以下为宜。
3. 将凝胶块转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中并用移液枪头充分将凝胶块捣碎。
4. 加入0.3mL溶液A,将离心管平放摇晃1-10小时。如果DNA片段长度在100bp左右,摇晃1-3小时就足够;如果长度在300bp以上,最好摇晃过夜。
5. 12000~15000g离心3~5分钟,小心将上清液(含DNA片段)转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。在凝胶沉淀中加入0.2mL溶液A,充分吹打。
6. 12000~15000g室温离心3~5分钟,小心将上清液(含DNA片段)转移到第五步所得的,已经含有0.3ml上清液的塑料离心管中。此时,管中的上清液共0.5ml。
7.在管中加入加入2倍体积(1ml)的溶液B,充分颠倒混匀。
8. 12000~15000g室温离心10-15分钟,DNA将在管底形成细小的沉淀。小心移弃上清。
9. 加入1mL溶液C,振荡一分钟。12000~15000g室温离心3~5分钟后小心移弃上清。
10. 开盖室温静置,直到管中液体挥发。
11. 加入20-50μL DNA洗脱液3.0溶解管底的DNA沉淀,得到的溶液可以立即使用或低温保存。
北京ATP依赖的DNase现货价格关键词:BTN120510,ATP Dependent Dnase,ATP依赖的DNase
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北京ATP依赖的DNase现货价格关键词:BTN120510,ATP Dependent Dnase,ATP依赖的DNase
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