北京蓝色DNA上样液，6×报价

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北京百奥莱博供应的北京蓝色DNA上样液，6×报价用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多蓝色DNA上样液，6×等核酸电泳和回收产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：北京蓝色DNA上样液，6×报价
编号：BTN3690B
品牌：百奥莱博
规格：10mL
产地：国产|进口
DNAload可以作DNA上样液用,含甘油和红色染料(BTN3690A)或蓝色染料(BTN3690B),便于直接上样和观察电泳进程。含红色染料的3690A还可以直接加到PCR反应体系中，不会干扰PCR反应，PCR结束后可以直接电泳，其红色染料泳动速度与50bp DNA片段相当，对绝大多数PCR片段的观察不会造成干扰，尤其适用于长度在2 Kb以下的DNA片段的电泳。含蓝色染料的BTN3690B其染料为*酚兰和二甲*蓝，适合于基因组合DNA和其他大片段DNA的电泳。本产品与TAE、TBE和百奥莱博的超快电泳缓冲液SuperBuffer-2 兼容。

试剂盒组成：

 

成分	10mL(A)	10mL(B)
RNAep	10ml(红色)	10ml(蓝色)
说明书	1份	1份

储存条件：常温运输，4℃(短期)或-20℃(长期)保存有效期一年。

使用方法：

DNA电泳(对BTN3690A和BTN3690B)
DNAload 为6×浓缩液，按5:1的比例将DNA样品与本产品混合(如10μl DNA样品+2μl 本产品)，直接上琼脂糖凝胶电泳(以TAE或TBE 为电泳缓冲液)，根据胶的大小选择合适的电压进行电泳，电泳完毕后可直接将凝胶放在紫外灯下观察结果。

加入PCR中使用(仅对BTN3690A)
DNAload 为6×浓缩液，如果加入到PCR 体系中，需要使其终浓度为1×，具体用量需要根据PCR 体积决定，PCR结束后直接上样电泳。注意：不能将3690B 加到PCR 体系中，因为其染料抑制Taq DNA聚合酶活性。

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BTN81101 柱式昆虫DNAOUT Column Insect DNAOUT
BTN100932 溶壁酶(破壁酶)干粉 Lywallzyme Powder
BL0911 FITC标记Avidin 抗体
LB培养基   500ml
ARB11727 人游离脂肪酸(FFA)免费代测 Human free fatty acids,ffa ELISA KIT
108321-42-2 G-418 遗传霉素
6-*嘌呤 Rink Amide AM resin 87-42-3
ARB13664 兔可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)Elisa定量检测 Rabbit soluble factor-related apoptosis,sfas/apo-1 ELISA KIT
ARB10153 人S100*结合蛋白A12/*粒蛋白C(S100A12)Elisa分析 
3-羟基-1,2,3-*并三嗪-4(3H)-酮 D-Galactose 28230-32-2
CYB163017 羊抗人C3-RBITC
尿蛋白定性检测试剂盒(磺基水杨酸法)   100T
ARB14080 犬前列腺素E2(PGE2)检测服务 
BTN130429 Phusion DNA聚合酶 Phusion DNA Polymerase
BL1073 次高分子量蛋白标准
65-23-6 Vitamin B6    维生素B6
PY02-150  酪蛋白琼脂  250克  
ARB13033 小鼠角化细胞分泌因子ELISA检测服务 Mouse keRatinocyte autocrine factor,kaf ELISA KIT
明胶 SB3-8 9000-70-8
ARB11052 人表面膜免疫球蛋白D(mIgD)含量测试 Human membrane igd,migd ELISA KIT
北京蓝色DNA上样液，6×报价关键词：DNA Loading Buffer(Blue),BTN3690B,蓝色DNA上样液，6×


·SP6体外转录试剂盒
编号：BTN91107
英文名称：SP6 in vitro Transcription Kit
规格：50次
本试剂盒是基于SP6 RNA聚合酶的RNA体外转录试剂盒，它利用含有SP6启动子的模版DNA，以NTP为底物，从SP6启动子下游开始合成与模版DNA中一条链互补的RNA，简单快速获得大量的RNA分子。

产品特点：
1. 即开即用，用户只需提供含SP6启动子的DNA模板即可以进行体外转录实验，不需要单独准备每一个成份。
2. 单溶液预配液，减少加样次数，避免了操作误差，增加了可重复性。
3. 模版DNA可以是线性化的质粒DNA，也可以是PCR扩增产物。
4.可以合成的RNA的最佳长度在20nt到2000nt之间。
5.产品配方经过精心优化，每μg DNA模版可以合成2-6μg RNA。
 得到的RNA可以用于RNA 结构研究、核酶生物化学、体外翻译、RNA-蛋白质相互作用、反义技术、SELEX技术和RNA干扰(RNAi)等实验。

试剂盒组成：

成分	规格
转录预配液(2×)	0.5mL
阳性对照DNA(1.3 kb片段)	20μL(10 ng/μL)
SP6 RNA聚合酶混合液	50μl
RNase-free水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
一、制备DNA模板
PCR片段和质粒DNA都可以用作体外转录的模板，但是必须注意以下几点。一是必须使用线性化的DNA。如果是质粒DNA，则必须先用适当的限制性内切酶切成线状。二是需要转录的DNA序列的上游必须有SP6启动子。如果模板是PCR产物，则可以在设计引物时将SP6启动子序列(5´ATT TAG GTG ACA CTA TAG AGN G 3´)加上，转录其实是从3端G AGN G中的第一个G开始。如果是将DNA片段克隆到载体上，则需要选择有SP6启动子的载体，并且克隆位点必须位于SP6启动子下游。三是需要转录的DNA序列的下游端最好不要是3´突出。如果是3´突出(如选择了Pst I来线性化质粒)，则最好用T4 DNA聚合酶修平。四是必须保证DNA模板中没有RNase。由于提取质粒DNA的过程中一般要使用大量的RNase A，因此质粒DNA一般都有严重的RNase A污染，所以在用作模板前，最好采取胶回收得方法回收质粒DNA。并且加入少量总RNA一起保温，然后电泳检测RNA是否被降解，以此判断纯化的DNA模板是否有残留RNase A。
二、体外转录反应
1.在一个RNase-free的塑料离心管中，在室温下(不是在4℃下)按次序加入下列成分：

成分	加入量	备注
DNA模板	xμL	总量在50 ng-1μg(如果模板是PCR片段，建议用50 ng左右；如果模板是质粒DNA，建议用1μg左右；如果用本产品提供的阳性对照，建议用4μL)
SP6转录预配液(2×)	10μl	本成分还含其他促进剂，所以是混合物
RNase-free水	补水到20μL

注：此为20μL反应体系的用量，对其他反应体系，各成分的用量可以按比例增减。如果需要标记RNA探针，则需要订购NTP分开的试剂盒。如果需要得到加帽RNA，则需要加入自备的加帽修饰核苷酸(本公司有各种加帽修饰核苷酸)。
2. 37℃保温1-2小时。注意：延长保温时间并不能提高产量。
3. 70℃加热10分钟灭活SP6 RNA聚合酶。
4. 取1-3μL电泳检测转录效果。一般1μg DNA可以合成 5-10μg的RNA。
5. 得到的RNA可以放-80℃保存。

若需进一步去除DNA模板，可参考下列操作步骤，但所用试剂需另行购买，本试剂盒不提供。
1.在体外转录体系中加入3-5U自备的RNase-free DNase(BTN90903；3-5U/μL)。
2. 37℃保温15-30分钟。
3. 补水到100μL。
4. 用等体积(100μL)的Tris饱和酚-*仿抽提一次去除残留的DNase和RNA聚合酶。
5.在上清中加200μL自备的微量核酸沉淀剂(BTN50903；用前需要摇晃混匀)，振荡后15000rpm离心3～5分钟，弃上清。
6. 加入1mL 75%乙醇，震荡10秒后15000rpm离心3～5分钟，弃上清。
7. 短暂离心数秒，用枪头吸弃上清。
8. 晾干半分钟，所得沉淀即去除DNA模板后的RNA。可溶于RNase-free水中后立即使用或放-80℃长期保存。

疑难解答：
1. 没有RNA产物。最常见原因是模板有RNase污染，可用纯化的RNA跟模板DNA一起保温，再检测RNA是否降解。还可以增加RNase Inhibitor用量，本试剂盒缓冲液和酶混合液中有RNase inhibitor，如果模板RNase污染严重，可能需要用户补加RNase inhibitor。
2. RNA产量低。最常见的原因是DNA模板。在转录序列的第一个和第二个碱基最好都是G，在前14个碱基内避免有U存在。
3. RNA长度比预期的短。可能是模板序列中有SP6 RNA聚合酶的终止序列。可以改用SP6体外转录试剂盒(启动子也必须改成SP6启动子)。
4. RNA长度比预计的长。SP6 RNA聚合酶跟Taq DNA聚合酶一样，有不依赖于模板的加尾功能，最多有一半的RNA可以带一个或两个碱基的尾巴。如果RNA长度比预计的长很多，使用的模板又是质粒DNA，则可能是质粒DNA线性化不彻底。
5. 5´单磷酸还是三磷酸。如果使用GTP，则得到的RNA是三磷酸，体外转录时如果保温时间太长(如12小时)，则有50%的三磷酸会变成单磷酸。如果在转录体系中加入GMP，则SP6 RNA聚合酶将优先使用GMP，所得RNA产物中5´端是单磷酸的比例将大大增加。
6. 如何得到带帽RNA？需加入带帽NTP类似物即可，本公司提供5种供选择。


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·DNA marker(200-1500bp)
编号：BTN70503C
英文名称：DNA ladder(200-1500bp)
规格：50次
 本系列产品用作凝胶电泳中双链线状DNA的分子量大小参照。它们是由一系列大小不同的单一DNA片段混合组成。成分中已经含有上样缓冲液，所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确，明亮清晰，背景较低，稳定性很好。每次加样量为5μL，可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

使用方法：直接上样电泳，每次加样量为5μL。

使用效果：

注：800bp条带为20ng/uL,其余每条带为10ng/uL

疑难解答：
a)如对带型要求较高，建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液，电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液，电压为80V)，同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖，同时要经常更换电泳缓冲液。
c)本产品条带均匀，亮度相当，但在EB胶中长时间电泳有可能会出现250bp以下的条带变淡。可以通过先电泳再染色，加大EB浓度等方法解决。

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