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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
595
- 英文名:
Plasmid DNA column extraction kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
柱式质粒DNA提取试剂盒批发由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多柱式质粒DNA提取试剂盒等DNA纯化产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:柱式质粒DNA提取试剂盒批发
品牌:百奥莱博
英文名:Plasmid DNA column extraction kit
编号:BTN60205
规格:50次
本试剂盒是用于质粒DNA小量制备与纯化的试剂盒。菌体先经碱裂解法处理,再通过离心吸附柱,专一结合DNA,最后洗去杂质,高效快速提取质粒DNA,全*(代"套")操作可以在30分钟之内完成。使用本试剂盒可从1-5mL过夜培养的菌液纯化得到高达20μg的高纯度质粒DNA(OD260/OD280 = 1.8-2.0),可以直接用于酶切、转化、测序及PCR等。
试剂盒特点:
1.快速、步骤少,整个操作在半个小时之内完成。
2. 不需要预平衡离心吸附柱。
3. 洗柱液即开即用,不需要额外加乙醇。
4. 纯度高,采用本试剂盒提取的质粒OD 比值在1.8-2.0 之间。
5.产量高,每毫升过夜培养的细菌可以提取到2-5μg/mL。
6. 用途广,适用于低拷贝和高拷贝质粒。
7. 价格低,比多数国内同类产品的价格更便宜。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 13ml |
| 溶液B | 13ml |
| 溶液C | 18ml |
| RNase A溶液(10mg/mL) | 0.15ml |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml |
| 离心吸附柱,6层 | 50只 |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,RNase A 需要-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 先将全部RNase A溶液全部加入到溶液A中,摇匀后再取用,未用完的溶液A最好在4℃保存。
2.从筛选平板上挑取单菌落至含抗生素的培养基中,37℃震荡培养12-16小时(摇床转速200-300)。注意:建议使用LB培养基,营养更丰富的培养基会使菌体浓度过高,超过纯化系统处理能力而降低DNA 质量。另外,延长培养时间有利于提高质粒DNA浓度,但是菌液培养过长时间会因细胞死亡、裂解而造成质粒DNA浓度降低。
3. 用1.5mL离心管收集1-4mL 过夜培养饱和菌液,室温12000rpm离心1分钟,弃上清,再短暂离心,吸弃残留液体。
4. 加入250μL溶液A,用枪头充分吹打使菌体重悬(此步在冰上操作效果更佳)。
注意:细胞未充分悬浮会影响后续操作,可以使用漩涡振荡器帮助混匀或使用Tip 吸头吹打沉淀至完全混匀。
5. 加入250μL溶液B(如果溶液B有沉淀,用前须37℃加热溶解后冷却到室温方可使用),温和反复颠倒混匀4-6次,看到溶液变粘即可,然后冰上放置不超过4-5分钟。注意:此步处理不能超过5分钟,否则DNA的碱损伤比较严重。同时千万不要剧烈振荡,否则基因组DNA 断裂产生的片段非常容易污染质粒DNA。溶液B用后需要将盖拧紧存放,否则空气中的二氧化碳会进入溶液,形成碳酸,中和溶液B中的NaOH,降低其效率)。
6. 加入350μL 冰上预冷的溶液C,反复颠倒混匀4-6次,可见白色沉淀物产生,然后冰上放置至少5分钟。
7. 最高转速(12000rpm以上)4℃离心5分钟,小心将上清液转移到离心吸附柱中。由于此时的溶液比重较大,有时候出现沉淀漂浮是正常现象,取上清时避开漂浮的沉淀即可。如果此步的离心在室温进行,更容易出现沉淀物漂浮的现象。
8. 静置2分钟以让质粒DNA与吸附柱充分结合,此步十分重要。
9.室温12000rpm离心1分钟,弃收集管中的废液。
10. 加入500μL的通用洗柱液,室温12000rpm离心1分钟,弃收集管中废液。
注意:通用洗柱液中含乙醇,用后需要将盖拧紧存放,否则乙醇会挥发。
11. 重复上步1次。
12.室温12000rpm离心1分钟,甩干残留液体。此步不能省略,否则残留乙醇会影响DNA的后续使用(如DNA上样时不能沉淀到加样孔中)。
13. 将离心吸附柱置于一个新的1.5mL塑料离心管(自备)中,加入30-100μL65-80℃预热的DNA 洗脱液2.0,室温放置2分钟。常温的DNA 洗脱液2.0也可以用于洗脱,但产量稍微有所降低。
14.室温12000rpm离心1分钟,离心管底溶液即质粒DNA。
15. 由于百奥莱博的吸附柱结合DNA 能力较强,如果再加适量DNA 洗脱液2.0 到离心吸附柱中,往往还能洗脱下很多质粒DNA(相当于第一次洗脱的20-30%),但注意不要使用上步得到的DNA洗脱液2.0来洗脱。
更多有关柱式质粒DNA提取试剂盒批发的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
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柱式质粒DNA提取试剂盒批发关键词:Plasmid DNA column extraction kit,BTN60205,柱式质粒DNA提取试剂盒
·考马斯亮蓝R-250
编号:BTN131122
英文名称:Coomassie Blue R-250
规格:10g
考马斯亮蓝R-250是考马斯亮蓝系列染料中的一种。R表示其干粉颜色是蓝色偏红,250表示其纯度。其*盐的分子式是C45H44N3O7S2Na,分子量为826。在酸性条件下,染料的硫*(代"酸")基团能跟蛋白的碱性*基酸结合,故常用于主要用于SDS-PAGE染色。考马斯亮蓝R-250 比G-250少两个甲基基团,不能直接替换使用。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
·细菌总蛋白质微量提取试剂盒
编号:BTN90902
英文名称:Bacterial Total Protein Miniprep Kit
规格:30次
本试剂盒适用于细菌天然总蛋白的快速微量提取,可用于各种后续实验研究。
产品特点:
1.可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液或冰冻菌体沉淀。
2.在 1.5mL塑料离心管中操作,适用于大规模的快速筛选。
3.采用温和的中性裂解成分,蛋白保持天然活性。
4.产率是5-10mg蛋白质/mL细菌。
5.无须昂贵设备,无需溶菌酶、超声波破碎等复杂的操作步骤,离心分离即可得到,简单便捷。
6.得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、免疫印迹分析、蛋白活性测定和BCA法和及Lowry法蛋白定量(不适用于Bradford法)。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 15ml |
| 溶液B | 1.5ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期一年。
1.取 1mL 过夜培养的细菌,12000rpm离心1分钟,弃上清,尽量吸干剩余液体。如为冰冻保存的菌体沉淀可直接进行第2 步。
2.每 10mg 湿重菌体沉淀加入0.5mL溶液A和50μL溶液B,吹打混匀。
3.冰上放置30分钟至1小时至菌液变清。
4.4℃ 12000 g离心1分钟。
5.将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要进行SDS-PAGE电泳,可取部分样品到离心管中,加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×),在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。
柱式质粒DNA提取试剂盒批发关键词:Plasmid DNA column extraction kit,BTN60205,柱式质粒DNA提取试剂盒
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