- ¥160 - 290
- LMAI Bio
- 上海
- LM60205-50
- 2025年07月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输及保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
Column Plasmid DNAOUT
- 库存：
大量
- 供应商：
联迈生物
- 规格：
50次
本试剂盒是用于质粒DNA小量制备与纯化的试剂盒。菌体先经碱裂解法处理， 再通过离心吸附柱，专一结合DNA，最后洗去杂质，高效快速提取质粒DNA，套 操作可以在30分钟之内完成。
使用本试剂盒可从1-5 mL过夜培养的菌液纯化得到高达20 μg的高纯度质粒 DNA(OD260/OD280 = 1.8-2.0)，可以直接用于酶切、转化、测序及PCR等。
1. 快速、步骤少，整个操作在半个小时之内完成。
2. 不需要预平衡离心吸附柱。
3. 洗柱液即开即用，不需要额外加乙醇。
4. 纯度高，采用本试剂盒提取的质粒OD比值在1.8-2.0之间。
5. 产量高，每毫升过夜培养的细菌可以提取到2-5 μg/mL。
6. 用途广，适用于低拷贝和高拷贝质粒。
7. 价格低，比多数国内同类产品的价格更便宜。
柱式质粒 DNAOUT使用及效果
在1.5 mL离心管收集1-4 mL过夜培养饱和菌液，离心1分钟，用和0.25 mL溶 液A重悬沉淀，再与0.25 mL溶液B混匀，再加入0.35 mL溶液C，混匀，室温静止 2分钟，离心10分钟，将上清转移到DNA纯化柱中，静置2分钟，离心1分钟，弃收 集管中的废液，加入0.5 mL的通用洗柱液，离心1分钟，弃废液，重复上一步1次。 离心1分钟，甩干残留液体，将DNA纯化柱置于新的1.5 mL离心管（自备）中，加 入适量（30—100 μL）DNA洗脱液离心即得质粒DNA。
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文献和实验1、质粒的概念 质粒（Plasmid）是一种存在于细菌、酵母等微生物细胞中的小型环状双链 DNA 分子，能够独立于宿主染色体进行自我复制，并通常携带对宿主生存非必需但具有特定功能的基因（如抗生素抗性基因）。质粒是分子生物学和基因工程中最重要的工具之一。 质粒根据其用途可以分为多种不同的类型，如用于保存序列信息的克隆质粒（如：pUC 系列质粒），用于表达蛋白的质粒（如哺乳动物细胞表达所用的 pcDNA3.1 系列质粒），用于基因编辑的质粒（如哺乳动物细胞基因编辑所用的 espCas9-2A
) 克隆困难怎么办？ 对于大片段载体构建实验而言，难点在于片段扩增效率低、重组 / 连接困难、质粒稳定性差、容易发生断裂等。需针对这些痛点，从技术路线选择、实验细节优化两方面制定策略，具体方案如下： ①建议首先选择「分段克隆 + 拼接」 策略，降低连接难度； ②大片段克隆的关键在于长片段的扩增，所以需要从源头保证实验成功率，即保证模板完整度，在扩增前确保模板未发生降解；其次优化 PCR 体系，比如选择长片段专用 PCR 酶，通过梯度测试选择最佳模板上样量及退火温度等； ③避免高拷贝载体（如 pUC
summityoung 那位学长有ISRE质粒，谢谢。我有多种质粒可以交换 zfv2007 Do you have any lentivirus plasmid? zhujoker 我有，就是具有IRES启动子的质粒吗？ 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号：shixiongcoming
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