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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
586
- 英文名:
M13 phage single strand genomic DNA rapid extraction kit
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖M13单链DNA提取试剂盒厂家在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:M13单链DNA提取试剂盒厂家
英文名:M13 phage single strand genomic DNA rapid extraction kit
产地:国产|进口
编号:ALH161
品牌:百奥莱博
规格:50次|100次|200次
本试剂盒将适量M13丝状噬菌体或者相关噬粒(M13来源)感染的液体培养物离心,上清中的单链噬菌体DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,将盐、细胞代谢物,蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净噬菌体单链DNA从硅基质膜上洗脱。M13和其它的丝状噬菌体载体,在文库构建和为序列测序提供单链DNA和引人突变方面十分有用。
试剂盒组份(100次):
结合液MB——————————50 ml
漂洗液WB——————————25 ml
洗脱缓冲液EB————————20 ml
吸附柱AC——————————100个
收集管(2ml) ————————100个
产品特点:
1.不需要使用有毒的*酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.节省时间,简捷,单个样品操作一般可在10分钟内完成。
3.产量高,典型的产量800µl M13丝状噬菌体上清可以提取3µg噬菌体单链DNA。
4.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9。可以直接用来测序,一般典型可辨认读长达650bp。
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 开始实验前将需要的水浴先预热到50℃备用。
3. 结合液MB 含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
储存条件:室温,有效期12个月。
本品别名:M13噬菌体单链DNA提取试剂盒|M13噬菌体DNA提取试剂盒|M13单链DNA提取试剂盒|M13基因组提取试剂盒
我公司的M13单链DNA提取试剂盒厂家,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·细菌RNA提取试剂盒
编号:ALH027
英文名称:Bacterial total RNA Extraction Kit
规格:20次|50次
本试剂盒适用于快速提取细菌总RNA。采用独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的*酚,*仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。
4.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
试剂盒组份:
| 组份 | 20次 | 50次 |
| TE (PH8.0) | 6ml | 6ml |
| 溶菌酶 | 20mg | 20mg |
| 裂解液RLT | 20ml | 50ml |
| 去蛋白液RW1 | 15ml | 40ml |
| 漂洗液RW | 5 ml | 10ml |
| RNase-free H2O | 10ml | 10ml |
| 吸附柱和收集管 | 20套 | 50套 |
注意事项:
1.第一次使用前请先在漂洗液RW瓶加入指定量乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
2. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 需要自备乙醇。
4. 裂解液RLT和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 预防RNase 污染,应注意以下几方面:
1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase 污染。
2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3) RNA在裂解液RLT中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时,塑料器皿可在0.5M NaOH 中浸泡10分钟,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。
4) 配制溶液应使用无RNase 的水。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC 至终浓度0.1%( v/v),37℃放置过夜,高压灭菌。)
6. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留,本公司的RNA 提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜,在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留(一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见)影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁,请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前,直接在吸附柱上进行DNase I处理。请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
7. RNA纯度及浓度检测:
完整性: RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE 电泳缓冲液;150v,15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA,电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb,分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍,否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA,OD260/OD280 读数(10mMTris, pH7.5)在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品,假定在10mM Tris,pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9
之间,但这并不表示RNA 不纯。
浓度:取一定量的RNA 提取物,用RNase-free 水稀释n 倍,用RNase-free 水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260, OD280 测定,按照以下公式进行RNA浓度的计算:终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40
储存条件:室温,有效期12个月
M13单链DNA提取试剂盒厂家关键词:M13单链DNA提取试剂盒,M13噬菌体单链DNA提取试剂盒,M13基因组提取试剂盒,M13噬菌体DNA提取试剂盒
504-17-6 β-硫代巴比*(代"妥")酸
2′-脱氧胞苷-5′-三磷酸二*盐 2-Hydroxyquinoline 102783-51-7
F020222 山羊抗人IgGxIgMxIgA抗体 Goat Anti-Human IgGxIgMxIgA
瓜尔豆胶 Sarcosine 9000-30-0
J0313 兔抗人IgM(H+L)抗血清
Tween20/TBS溶液(20×TBST,pH7.4) 500ml
ARB11783 人溶血补体(Hc)Elisa方法检测 Human hemolytic complement,hc ELISA KIT
L-组*酸 Octyl thioglucoside 71-00-1
BL0818 HRP标记兔抗马IgG抗体
胞浆/胞核分离试剂盒 50T|100T
PY01-092 木糖醇 100克
ARB10889 人抗菌肽(Att)酶标法分析 Human attacin,att ELISA KIT
ARB13911 猪纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)酶免分析 Porcine plasminogen activator inhibitor,pai ELISA KIT
PY02-290 麦氏培养基(醋酸*培养基) 250克
DAB法显色试剂盒"
987-65-5 三磷酸腺苷二* ATPNa2
SJ0849 人血清(混合血型)
鸟嘌呤 PASAM 73-40-5
9032-75-1 Pectinase 果胶酶(40u/mg)
dTTP(100mM)(超纯)
F040319 豚鼠IgG抗原 Guinea Pig IgG
ARB10392 人可溶性半乳糖苷结合凝集素3(LgAls3)含量测试 Human lectin-galactose binding-soluble 3,lgals3 ELISA KIT
M13单链DNA提取试剂盒厂家关键词:M13单链DNA提取试剂盒,M13噬菌体单链DNA提取试剂盒,M13基因组提取试剂盒,M13噬菌体DNA提取试剂盒
6-巯基嘌呤一水合物 L-Methionionl 6112-76-1
F020109 山羊抗乙肝e抗原抗体 Polyclonal Goat Anti-HBeAg
F010107 小鼠抗A型流感M2e抗体 Monoclonal MouseAnti-influenzavirus(M2e)
A0101 胎牛血清(无菌采制) 100ml/200ml/500ml
硅*型吸附剂 Amoxicillin trihydrate 1343-88-0
PAGE非变性蛋白上样缓冲液(5×) 5ml
BTN70606 一站式miRNA尿素-PAGE电泳套装 One-Stop miRNA Urea-PAGE Pack
(不需DNA酶消化)"
ARB13735 兔脂蛋白*(代"磷")脂酶A2(Lp-PLA2)定量分析 Rabbit lipoprotein-associated phospholipase a2 ,lp-pla2
植物磷酸化蛋白提取试剂盒 Plant Phosphorylated protein extraction kit 50T|100T
T4 DNA ligase 100U
ARB13304 小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)酶标法分析 Mouse phospho protein kinase c,p-pkc ELISA KIT
ARB11982 大鼠FMS样酪*酸激酶3(Flt3)酶免分析 Rat fms-like tyrosine kinase 3,flt3 ELISA KIT
PY02-172 欧氏液 100克
变旋酶 Streptozotocin 9031-76-9
2,2-二羟基联*(代"*") Carboxymethyl Chitosan 1806-29-7
F030429 胶体金标记兔抗人Ig抗体 Rabbit Anti-Human Ig*GOLD
BFD035 磺胺十五合一快速检测试剂盒
ARB10350 人分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)酶联免疫定量检测
甘油三酯 HEC 538-24-9
BS固定液 500ml
ARB13140 小鼠总三碘甲腺原*酸(TT3)酶免分析 Mouse tt3 ELISA KIT
我公司正在打折促销DNA纯化全系列产品,恭候您的咨询选购M13单链DNA提取试剂盒厂家。
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文献和实验我根据分子克隆上的经典方法提取M13噬菌体单链DNA,第一次就成功。但是随后几次,试剂和方法都一样,在可以看见噬菌体白色沉淀的基础上(量足够多),却怎么也提不出来,最后乙醇沉淀时,一片空白。请求各位大侠指点迷津。谢谢 ! 既然首先可以成功,说明方法肯定没问题。建议: 1、检查你的试剂有无污染; 2、操作有无问题(虽然可能性小,但有时很难想到的); 3、也可以换用其他方法,做个对照。 推荐一个快速的用NaI法噬菌体DNA提取的方法,是NEB公司噬菌体展示
斑的方法是用Xgal蓝色噬菌斑试验。有些噬菌体载体的中间片段带有编码β半乳糖苷酸的基因。当这种噬菌体感染lac宿主细胞并在含有Xgal(5溴4氯3吲哚βD半乳糖苷)的培养基上生长时,半乳糖苷酸与Xgal反应的产物为不溶性的靛蓝染料。因此,含有中间片段的重新恢复的噬菌体形成蓝色噬菌斑;而同外源DNA连接的重组噬菌体形成的噬菌斑是无色透明的。 (二)单链噬菌体载体 最常用的单链噬菌体载体是M13和它的改建噬菌体。M13是丝状噬菌体,有长约6500个核苷酸的闭环DNA基因组。M13附着在大肠杆菌的F
产物-β-半乳糖苷酶的氨基端片段,用pUC质粒转化LacZ基因有突变的大肠杆菌株(M15)时,因为由质粒表达的α-肽补充了大肠杆菌却失的α-肽,所以恢复了分解半乳糖的能力。在加入IPTG和X-gal的培养基上,长出蓝色克隆。如果在多克隆位点内插入外源DNA,由于它破坏了α-肽的表达,因而在加入IPTG和X-gal的培养基,不能长出蓝色克隆,这就是所谓的蓝白筛选。二、单链丝状噬菌体和噬粒(一)大肠杆菌丝状噬菌体包括M13噬菌体f噬菌体等,其基因组 均是单链闭环DNA分子,其中M13mp系列克隆载体是对野生型M13
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