北京一步法质粒DNA提取试剂盒2.0厂家

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百奥莱博专业生产供应北京一步法质粒DNA提取试剂盒2.0厂家，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京一步法质粒DNA提取试剂盒2.0厂家
编号：BTN70903
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：50次
英文名：One-step plasmid DNA extraction kit 2.0
基于碱变性原理的质粒小量制备(Miniprep)是分子克隆研究中最常用的方法之一，其操作包括三种溶液处理，一般需要30分钟左右的时间才能得到可以上柱的质粒DNA初提液。本产品采用百奥莱博自主开发的一步式细菌裂解技术，只需要一种溶液处理即可以完成细菌裂解，并且裂解物可以直接上柱纯化质粒DNA。

试剂盒特点：
1.一步式裂解细菌，比传统的碱变性方法更快捷。
2.产量跟经典碱变性法相当或更高，产率一般为3-5μg质粒DNA/mL 饱和菌液(对高拷贝质粒而言)。
3. DNA 纯度高，OD260/280一般在1.8左右，基因组DNA和RNA污染少。
4.可以直接用于电泳、酶切、PCR、细菌转化、分子克隆、测序等实验。
5. 重复性和稳定性好。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
离心吸附柱	50只
通用预洗液	50ml
通用洗柱液	100ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(溶液A需要4℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1. 用塑料离心管收集不超过3mL 过夜培养饱和菌液，室温12000～15000g离心半分钟，弃上清。注意:不能超过3mL菌液，否则质粒回收率将急剧降低。
2. 加入0.6-1mL溶液A(用前需摇匀)，充分吹打或振荡裂解细菌直到裂解变澄清，一般需要半分钟左右。注:此方法不同于碱裂解法，故可以充分吹打。
3. 将裂解液全部转移到离心吸附柱中，室温静置2分钟使质粒DNA与膜结合。室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。如果一次不能将上清全部转移到离心吸附柱中，可以分两次进行。
4.在离心吸附柱中加入0.7mL的通用预洗液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。注意: 如果通用预洗液放置在低温产生了沉淀，用前需要加热到60℃左右使之融化，混匀后再用。
5. 再在离心吸附柱中加入0.3mL的通用预洗液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。此步预洗最好别省略，否则DNA 纯度不高。
6.在离心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
7. 再在离心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。此为第二次洗涤。
8. 再在离心吸附柱中加入0.4mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。此为第三次洗涤，如果不洗涤三次，最后得到的质粒DNA的OD260和280的比值达不到1.8。
9.室温 12000～15000g离心半分钟，甩干残留液体。注意：此步不能省略，否则残留乙醇会影响后续的电泳上样(DNA 沉不到加样孔里去)和酶反应。
10. 将离心柱置于一个新的1.5mL自备塑料离心管中，加入30-100μl DNA 洗脱液2.0，室温放置2分钟。如果将DNA 洗脱液2.0预热到65-80℃，则效果更好。
11.室温 12000～15000g离心半分钟，离心管底溶液即质粒DNA，可以直接用于后续实验或放冰箱长期保存。
 注意：如果需要去除DNA样品中的内毒素，请使用百奥莱博的液相内毒素清除剂。

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·T7核酸外切酶
编号：BTN130632
英文名称：T7 Exonulease
规格：1000U
本产品作用于双链DNA，沿 5´→3´方向催化去除 5´单核苷酸，它既能从5´末端起始消化，也能从双链DNA的切刻或缺口处起始消化。它既能降解 5´磷酸化 DNA 也能降解 5´去磷酸化DNA。据报道，它能沿 5´→3´方向降解RNA/DNA杂交双链上的RNA或DNA，但不能降解双链或单链RNA。该酶纯化自含TYB12内含肽融合子的E.coli菌株。

产品特点：
1．5´→3´核酸外切酶活性。
2．切下DNA的5´单核苷酸。

产品组成：

成分	规格
T7核酸外切酶(10U/μL)	1000U
10×反应Buffer	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指在50μL反应体系中，25℃条件下，30分钟内能从双链DNA底物上催化产生1nmol的酸溶性脱氧核糖核苷酸所需要的酶量。

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