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北京现货植物总蛋白质微量提取试剂盒(SDS-PAGE专用)厂

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  • ¥150 - 1930
  • 百奥莱博
  • BTN81218-KHS
  • 北京
  • 2025年07月13日
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      477

    • 英文名

      Plant Total Protein Miniprep Kit (SDS-PAGE)

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      2~8℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货植物总蛋白质微量提取试剂盒(SDS-PAGE专用)厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:北京现货植物总蛋白质微量提取试剂盒(SDS-PAGE专用)厂家
    编号:BTN81218
    规格:30次
    品牌:百奥莱博
    产地:国产|进口
    英文名:Plant Total Protein Miniprep Kit (SDS-PAGE)
    本产品用于快速提取微量植物蛋白,用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析。

    产品特点:
    1.可以处理各种植物材料,包括新鲜或冻干的材料。
    2. 操作简单。
    3. 能有效去除植物样品中常见的污染。

    试剂盒组成:

     
    成分 规格
    溶液A 30ml
    溶液B 240ml
    溶液C 1.5ml
    说明书 1份


    储存条件:常温运输及保存,有效期一年。

    使用方法:
    1.称取植物样品。如果是冰冻干燥的样品,称取50mg。如果是新鲜组织样品,称取100mg。在液氮条件下,用研钵充分研磨成为粉末。
    2.将研磨得到的粉末转移到1.5mL的塑料离心管中。
    3.加入1mL溶液A,在震荡仪上充分震荡5分钟。
    4.室温12000g离心5分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。
    5.将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中,在沸水中处理3分钟。
    6.冷却至室温后,转移到一个10-15mL塑料离心管中,加入8倍体积的-20℃预冷的溶液B。
    7.颠倒混匀后,置于-20℃冰箱中至少60分钟以充分沉淀其中的蛋白质。
    8.12000g离心15分钟,去上清液,保留蛋白沉淀。
    9.室温晾干之后,加入50μL溶液C并在震荡仪上充分震荡以让蛋白沉淀充分溶解
    10.将蛋白溶液在沸水中处理3分钟。
    11.室温12000g离心5分钟,上清可以直接用于蛋白浓度测定和SDS-PAGE。


    关于北京现货植物总蛋白质微量提取试剂盒(SDS-PAGE专用)厂家的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
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    北京现货植物总蛋白质微量提取试剂盒(SDS-PAGE专用)厂家关键词:BTN81218,植物总蛋白质微量提取试剂盒(SDS-PAGE专用),Plant Total Protein Miniprep Kit (SDS-PAGE)


    ·Tris盐*(代"酸")溶液(1M,pH8.0)(不含RNase)
    编号:BTN70607
    英文名称:RNase-Free Tris-HCl Solution
    规格:250mL

    ·动物RNA提取试剂盒(柱式Trizol)
    编号:BTN71201
    英文名称:Animal RNA column extraction kit(Trizol)
    规格:50次
    本试剂盒是动物总RNA快速提取试剂动物RNA提取试剂盒(BTN3070)的柱式升级产品,可用于从各种动物组织(包括白细胞)快速提取总RNA。

    试剂盒特点:
    1. 操作更加简单快速,整个过程只需要不到十分钟(对一个样品而言)。
    2. RNA 纯度更高,OD260/OD280一般在2.0左右。
    3.一般不含用RT-PCR可以检测到的基因组DNA污染。
    4.适用于培养细胞、大部分动物组织和部分植物组织。
    5. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA 合成等实验。
    6. 性价比高于进口的柱式RNA提取产品。

    试剂盒组成:
    成分 50T
    溶液A 50ml
    溶液B 25ml
    离心吸附柱 50套
    通用洗柱液 50ml
    RNA 洗脱液 10ml
    说明书 1份


    储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。

    使用方法:
    下面的操作步骤是针对在1.5mL塑料离心管中进行的微量提取的,如果处理样品量大,请按比例增加各成份的用量并使用大的离心管和离心机。

    1. 根据组织细胞类型的不同分为下面及种情况使用:
    a)对贴壁细胞:吸尽培养液,在每10 平方厘米细胞中加入1mL溶液A,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。
    b)对悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,在每1-5×106 悬浮细胞中加入1mL溶液A,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell,1mL溶液A的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
    c)对新鲜组织:先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中,每50-100mg 组织加1mL溶液A,用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),建议组织的使用量不要超过50mg/ mL溶液A,否则十分容易产生DNA污染。
    d)对RNAhold 保存组织:先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块,其余操作同新鲜组织的处理。
    2. 将裂解物转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中,然后加入0.2倍体积的自备*仿(1mL溶液A需0.2mL *仿),振荡器上充分振荡混均30秒。
    3. 12000rpm室温离心3~5分钟。
    4. 将上清液(约0.6-0.8mL的无色透明水相,有时水相比重大时,水相在下层,有机相即蓝相在上层,吸取时应吸取透明水相)转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。注意:离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下100μl上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行,否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。
    5. 加入等体积的溶液B,充分颠倒混匀。
    6. 将一半的溶液转移到离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
    7. 将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
    8. 加0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。
    9. 加0.3mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。此步可以省略。
    10.室温12000 rmp离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
    11. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中,加入50-100μL RNA 洗脱液。
    12.室温12000 rmp离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
    13. RNA的电泳检测:本试剂盒提取的RNA 最好用甲醛变性胶电泳,如果在非变性的普通琼脂糖胶(in TAE或TBE buffer)上电泳,一定要使用RNA 专用上样液RNAload(操作详见RNAload 使用手册),千万不要使用常用的DNA上样液,因为DNA上样液没有经过去RNase处理,也不能将RNA变性,得到的带型将十分杂乱。
    14. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
    15. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
    16. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。

    疑难解答:
    Q:上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗?
    A:不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象,我们初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物,加RNase处理后,这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象,建议最好使用甲醛变性胶电泳和RNA 专用上样液(如RNAload)。
    Q:如何确认和去处除污染的基因组DNA?
    A:如果怀疑有DNA污染,可以用RNase处理RNA样品,然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用百奥莱博的非酶的DNA去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的使用说明书进行操作。


    北京现货植物总蛋白质微量提取试剂盒(SDS-PAGE专用)厂家关键词:BTN81218,植物总蛋白质微量提取试剂盒(SDS-PAGE专用),Plant Total Protein Miniprep Kit (SDS-PAGE)

    ARB11869 人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)血清中含量检测 Human glycosylation-dependent cell adhesion molecule-1,glycam-1 ELISA KIT
    DMDC玻片硅化剂(2%)   100ml
    BTN131108 ONPG干粉 ONPG Powder
    L-组*酸 Octyl thioglucoside 71-00-1
    BL0818 HRP标记兔抗马IgG抗体
    57-44-3 Barbital 巴比*(代"妥")
    PY01-091  肌苷  10克  
    ARB10889 人抗菌肽(Att)ELISA检测服务 Human attacin,att ELISA KIT
    ARB13911 猪纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)酶免分析 Porcine plasminogen activator inhibitor,pai ELISA KIT
    4,4"-联吡*(代"啶") HONB 553-26-4
    ARB14040 植物激素脱落酸(ABA)ELISA代测服务 Plant hormone abscisic acid,aba ELISA KIT
    BTN100912 长效期SDS-PAGE电泳液(干粉) Stable SDS-PAGE Running Buffer
    乙二*(代"胺")四乙酸四*盐 3,3"-Dimethoxybenzidine 10378-23-1
    噻唑橙 3-Hydroxyphenylacetic acid 107091-89-4
    D-麦芽糖 Nonivamide 69-79-4

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