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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
743
- 英文名:
Degenerate Oligonucleotide Primer PCR Kit
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应DOP-PCR试剂盒现货,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:DOP-PCR试剂盒现货
编号:BTN111109
规格:50次
品牌:百奥莱博
DOP-PCR即简并寡聚核苷酸引物PCR,是扩增全基因组的方法之一,它利用中间含有6个随机碱基的22nt引物,通过两轮PCR(第一轮低温复性,第二轮高温复性)而将模板DNA扩增。DOP-PCR扩完整基因组的效率不如利用phi 29 DNA聚合酶的MDA,但在扩增高度降解的痕量DNA 方面具有巨大优势,在法医鉴定领域具有重要应用。本产品就是在DOP-PCR基础上进行优化而开发。
产品特点:
1. 专门用于高度降解的DNA,方便,含有除模板DNA和引物以外的所有成份,简化了准备工作。
2. 优化的引物浓度,使自连序列和非模板相关序列的合成。
3. 使用高保真酶,降低突变率。
4. 长度在300-1700bp 之间,平均500bp左右。
5. 模板基因DNA 用量一般为10-100pg。
6. 所得PCR产物可用于STR 多重扩增、比较基因组杂交、单染色体文库构建、基因组图谱研究等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| DOP-PCR Magic Mix | 750μl |
| DOP-PCR引物(20pmol/μL) | 250μL |
| 超纯水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输、-20℃保存,保存期限为12个月。不要反复冻融。
使用方法:
1.在一干净的PCR 管中,加入下列成分:
| 成分 | 阴性对照 | 样品 |
| DOP-PCR MagicMix | 25μL | 25μL |
| 基因组DNA模板(自备)或单个细胞 | 不加 | 10-100pg(或一个单个细胞) |
| DOP-PCR引物(20 pmol/μL) | 5μl | 5μl |
| 补水到 | 50μl | 50μl |
2. 放入PCR仪中按下列参数进行DOP-PCR。
| 预变性 | 95℃ | 5min |
| 第一轮PCR(12个循环) | 94℃ | 1min |
| 30℃ | 1.5min | |
| 72℃(30℃升到72℃的时间设定为3分钟) | 3min | |
| 第二轮PCR(35个循环) | 94℃ | 1min |
| 62℃ | 1min | |
| 72℃(每次循环后此步的保温时间延长14秒) | 2min | |
| 延伸 | 72℃ | 7min |
| 4℃ | Forever |
3.结束后取5-10μl直接上样电泳(不需要额外再加DNA上样液),红色染料电泳速度相当于50bp DNA片段。DOP-PCR产物的长度一般在300-1700bp之间。
4. 所得DOP-PCR产物可以用于后续PCR检测或其他分析。
关于DOP-PCR试剂盒现货的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
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DOP-PCR试剂盒现货关键词:BTN111109,DOP-PCR试剂盒,Degenerate Oligonucleotide Primer PCR Kit
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DOP-PCR试剂盒现货关键词:BTN111109,DOP-PCR试剂盒,Degenerate Oligonucleotide Primer PCR Kit
·碱性胶电泳液
编号:BTN100816
英文名称:10×Alkaline Gel Buffer
规格:250mL
本品为10×的琼脂糖碱性电泳液,专门用于琼脂糖碱性变性电泳,后者主要用于分析抗核酸酶S1的DNA-RNA杂交分子DNA的大小、分析cDNA链大小、检测反转录酶合成第一条和第二条cDNA链的大小、检测分子克隆中酶的缺口活性、标定DNA缺口平移核素标记实验中试剂的用量等。
储存条件:常温运输及保存、有效期一年。
·5M甜菜碱溶液,PCR级
编号:BTN70902
英文名称:Betaine Solution, PCR Grade
规格:1.5mL
本产品为浓度为5M的甜菜碱的水溶液,可以直接加入到PCR反应或测序反应中提高扩增或测序的效率,其详细的用途包括:
1. 降低富含GC的模板形成二级结构的可能,有助于富含GC的模板的PCR扩增和测序。
2. 降低变性温度对碱基的依赖性。
3. 提高LA-PCR的扩增效率。
4. 提高Taq DNA聚合酶的稳定性。
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:将本产品加入PCR反应体系中,使其终浓度在1.0-1.7M之间即可。其他按常规操作进行即可。
·DNA粘转平试剂盒
编号:BTN60107
英文名称:DNA Polishing Kit
规格:20次
本产品利用Pfu DNA polymerase所具有3´到5´的聚合酶活性和5´到3´外切酶活性,将3´或5´突出的DNA片段转化成平末端,用于克隆工作。
产品特点:
1. 简单,精心优化过的2×Polishing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要单独准备。
2.适用于任何平末端的DNA载体。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| Pfu DNA Polymerase(3U/μL) | 20μl |
| 2×Polishing Buffer | 0.5ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。
使用方法:
1. DNA片段的准备:
无论是来源Taq,Tth,T7,Klenow和Vent等DNA聚合酶合成的DNA片段,还是用限制性内切酶制备的DNA片段,粘转平之前均需要将DNA沉淀以便去除反应液中的无关成份。沉淀DNA的方法包括经典的盐/纯沉淀法,离心柱DNA 吸附法和百奥莱博的一管式非醇超快DNA沉淀法。
2. 设置粘转平(Polishing)反应:
| 在一个干净的离心管中,分别加入 | |
| 3´或5´突出的DNA片段 | 10-500ng |
| 2×Polishing Buffer | 25μL |
| Pfu DNA polymerase | 1μL |
| 补水到 | 50μL |
| 72℃保温2小时。 | |
注意:如果不使用热盖式PCR 仪器加热,则需要在反应管中再加入适量液体石蜡以防反应过程中水份蒸发。
3.反应后处理
粘转平反应后,样品可以放-20℃长期保存,也可以直接用于T4 DNA连接酶催化的连接反应。对10μL的连接反应体系,一般需要加入1-2μL粘转平反应液。由于Pfu DNA polymerase在连接反应的温度条件下几乎没有活性,所以不必去除。但文献报道,去除后连接效率更高。
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