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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
393
- 英文名:
Circular DNA Whole Genome Amplification Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京环状DNA全基因组扩增试剂盒厂家的品牌:百奥莱博,是优质的核酸扩增(PCR)产品,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多环状DNA全基因组扩增试剂盒等核酸扩增(PCR)产品请联*(代"系")我司咨询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京环状DNA全基因组扩增试剂盒厂家,产品信息:
类别:核酸扩增(PCR)
英文名:Circular DNA Whole Genome Amplification Kit
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| 环状DNA全基因组扩增试剂盒 | BTN100947 | 30次 |
品牌:百奥莱博
规格:30次
英文名:Circular DNA Whole Genome Amplification Kit
产地:国产|进口
本产品基于WGA的、专门用于环状DNA(如质粒)扩增的全基因组扩增试剂盒,优化后的反应体系对环状DNA全基因扩增有良好的效果,可以方便、简单、快速、经济的得到环状DNA样品的扩增产物。
产品特点:
1. 线状DNA清除剂可以清除残留的线状DNA,保留环状DNA,包括超螺旋DNA、带裂口(nick)的环状DNA和带缺口(gap)的环状DNA。
2. WGA采用基于phi29 DNA聚合酶的MDA法,能得到平均长度在10Kb以上的扩增产物,还具有高产量和高保真性的特点。
3.可以将环状DNA扩增上万倍,是保留珍贵痕量DNA样品的唯一办法。
4.可使用各种环状DNA样品,包括质粒DNA,环状病毒DNA,线粒体DNA等。
5. 操作简便快捷,恒温(30℃)反应,无须PCR仪即可实现扩增。
6.产物可用于多种后续试验,包括酶切、克隆、文库构建、测序、基因芯片分析等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 线状DNA清除剂溶液A | 100μl |
| 线状DNA清除剂溶液B | 30μl |
| WGA DNA变性液 | 75μl |
| WGA溶液A | 150μl |
| WGA溶液B | 300μl |
| Phi29 DNA聚合酶(10U/μL) | 15μl |
| 超纯水 | 1mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、去除环状样品中的线状DNA(线状DNA量不超过5μg)
1.在干净塑料离心管中,按下表加入各成分(30μL体系):
| 成分 | 样品 | 正对照 | 负对照 |
| 自备DNA样品(1-10μg) | (样品) | (用环状DNA) | (用线状DNA) |
| 线状DNA清除剂溶液A | 3μL | 3μL | 3μL |
| 线状DNA清除剂溶液B | 1μL | 1μL | 1μL |
| 补水到30μl | 补水到30μl | 补水到30μl |
2. 加200μL石蜡油后,37℃保温16小时。注意:保温时间过短可能会形成短的DNA片段,影响后续反应,所以最好保温16小时。必须加石蜡油,否则长时间保温期间水分会蒸发到管盖上。如果使用热盖打开的PCR仪则可以不加石蜡油。
3. 65℃加热灭活线状DNA清除反应的酶。
4.电泳检测酶切效果。本产品不清除带裂口(nick)和带缺口(gap)的环状DNA(如质粒),所以这些片段将不会消失。如果所含线状DNA超过5μg,则需要用非酶线性DNA清除剂清除或者稀释后用本法处理。
5. WGA扩增需要100pg-100ng的环状DNA,一般环状DNA的浓度都高于此范围,则需用超纯水将DNA稀释到40pg-40ng/μL,稀释过程中线状DNA清除反应中的成分也相应稀释,故一般不会影响后续WGA反应。如果样品中DNA浓度过低,则需要用微量核酸沉淀剂(需另买)沉淀后再溶解到适当体积的超纯水中,沉淀过程中线状DNA清除反应中的成分也被去除。
二、碱变性(对环状DNA,碱变性法一般优于热变性法,推荐用户使用)
6.在PCR塑料管中加入不超过2.5μL环状DNA样品。如果体积不足2.5μL,则用超纯水补齐。最好同时做一个不加样品的阴性对照。
7. 加入等体积(2.5μL)WGA DNA变性液,轻柔吹打混匀。
8.室温放置2分钟变性。
9. 加入5μl WGA溶液A,轻柔吹打混匀后立即进入第15步。注意:热变性的DNA样品不能久存,否则DNA会缓慢复性,所以必须马上进入后续处理。
三、热变性法
10.在PCR塑料管中加入1-5μL纯化好的环状DNA,用量在100pg-100ng之间。最好同时做一个不加DNA模板的阴性对照。
11. 加入5μL WGA溶液A,轻柔吹打混匀。
12. 如果不足10μL,补水到10μL。
13.在PCR仪器上 95℃加热变性3~5分钟,其间最好打开PCR仪的热盖。也可以使用95℃水浴加热3分钟。
14. 热变性结束后短暂离心(将蒸发到管壁的水甩下),然后将样品管在冰上放置至少5分钟,立即进入第15步。注意:热变性的DNA样品不能久存,否则DNA会缓慢复性,所以必须马上进入后续处理。
四、WGA反应
15.在10μL碱变性或热变性的DNA样品中,加入10μL的WGA溶液B,轻柔吹打混合均匀。
16. 加入0.5μL Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL),轻柔吹打混合均匀。
17. 30℃保温3-12小时。最好使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如果采用30℃水浴,最好在样品管中加入50μL石蜡油以防水分蒸发,因为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁,从而改变反应体系中各成分的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高,WGA三小时即可检测到DNA扩增。
18. 65℃保温10分钟使phi29 DNA聚合酶灭活。注:由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性,所以最好将其灭活以免干扰后续反应。
19. 立即取2-5μL WGA反应液进行电泳检测扩增效果。
20.扩增的DNA可以用于后续试验或放冰箱长期保存。
北京环状DNA全基因组扩增试剂盒厂家专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:BTN100947,Circular DNA Whole Genome Amplification Kit,环状DNA全基因组扩增试剂盒
环状DNA全基因组扩增试剂盒怎样保存?
一般试剂可保存在玻璃瓶内; 对玻璃有强烈腐蚀作用的试剂,如**酸、*氧化*应保存在聚乙*(代"烯")塑料瓶内; 易被空气氧化、分化、潮解的试剂应密封保存;易感光分解的试剂应用有色玻璃瓶贮存并藏于暗处; 易受热分解及低沸点溶剂,应存于冷处; 剧毒试剂应存于保险箱; 有放射性的试剂应存于铅罐中。如果化学试剂保管不当,就会失效变质,影响实验的效果,并造成物质的浪费,甚至有时还会发生事故。因此,科学地保管好试剂对于保证实验顺利进行,获得 可靠的实验数据具有非常重要的意义。
北京环状DNA全基因组扩增试剂盒厂家极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
| 编号 | 类别 | 名称 |
| BTN60910 | DNA纯化 | 非冻型血液DNA保存液 |
| BTN111202 | RNA纯化 | 非冻型血液RNA保存液 |
| BTN130976 | RNA纯化 | Oligo(dT)再生溶液 |
| BTN130913 | 核酸扩增(PCR) | dTTP溶液,2.5mM |
| BTN130934 | DNA纯化 | 柱式石蜡包埋组织DNA提取试剂盒 |
| BTN131090 | 蛋白质研究 | 中性亲和素蛋白 |
| BTN80802B | DNA纯化 | 非冻型拭子DNA保存液(含专用拭子) |
| BTN130672 | 工具酶 | 核糖核酸酶RNase If |
| BTN70704A | 蛋白质研究 | 预染蛋白Marker(14.4~97.4kD) |
| BTN131007 | 蛋白质研究 | 中等RIPA裂解液 |
| BTN130958A | 核酸电泳和回收 | 红色DNA上样液(6×,非甘油) |
| BTN70608 | 核酸电泳和回收 | miRNA尿素-PAGE上样液 |
| BTN130848B | 一次性新鲜培养基 | 即用型LB平板培养基(含Amp) |
| BTN121112 | 克隆与表达 | 大肠杆菌Stbl3化学感受态细胞 |
| BTN130821 | 细胞及免疫学 | 阿尔玛蓝细胞增殖与细胞毒检测试剂 |
| BTN130888 | 蛋白质研究 | 石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒 |
| BTN131126 | 克隆与表达 | 一站式平末端克隆试剂盒 |
| BTN130525 | 蛋白质研究 | 蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂混合液Ⅱ |
| BTN71001 | RNA纯化 | 柱式病毒RNA提取试剂盒 |
| BTN131074 | 蛋白质研究 | SDS-PAGE样品预处理试剂盒 |
| BTN100919 | DNA纯化 | 消解酶干粉(溶细胞酶)(≥200U/mg) |
| BTN130532 | 蛋白质研究 | EGTA溶液(0.5mg/mL,蛋白级) |
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文献和实验前段时间,小编的朋友圈被「我们的 18 岁」刷了屏,大家争相回忆自己曾经的似水年华。原来十年前,已经是 2009,而不再是 1999 了。,但是实验室的一些老物件却勾起了小编对于过去回忆……试剂篇这是一瓶好早以前的硫酸锌,从这个国家标准来看,应该是 1978 年后生产的。还有北京朝阳区化工四厂出品的硫酸锰。北京化工四厂 1956 年建厂, 1964 年由市区迁入房山区,是一个有 60 多年的老厂。这瓶柠檬酸三钠从批号看是 1985 年产的,比小编大了能有 10 岁。不看不知道,原来实验室很早
洗脱液,接着按照3.2b进行)2a.加入2ulRNaseA(0.5mg/ml).加热至65°C摇晃4-5小时或者过夜以逆转交联。DNA采用PCR纯化试剂盒中厂家说明进行纯化。样品冻存于-20°C.样品之所以加入RnaseA是因为高浓度RNA会在使用PCR纯化试剂盒时干扰DNA的纯化。而纯化柱子的饱和度是既定的。2b.加入5ul蛋白酶K(20mg/ml).加热至65°C摇晃4-5小时或者过夜以逆转交联。采用酚/氯仿抽提的DNA使用乙醇沉淀于10ul的糖原(5mg/ml).中。100ul水重悬浮。样品
案例一:DAB染色后切片着色一片黄/背景深 背景:奥运会期间我们课题组研究生都在实验室做实验,许多从北京购买的试剂买不到,对我们的许多实验产生了很大的影响。 我以前一直用中杉金桥的Sp三步法染色试剂盒,效果不错,在奥运会期间我准备做同批实验分不同批次酶免疫组化实验,第一批组化实验结果很好,抗体浓度感觉比较合适(Santa Cruz公司1:200),等做第二批时发现封闭血清不够了,为了保证实验顺利进行,我又从福州迈新顶了一个SP试剂盒,同时抗体稀释液也不够了,我又重新从博士
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