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北京环状DNA全基因组扩增试剂盒厂家

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  • ¥190 - 2110
  • 百奥莱博
  • BTN100947-GOS
  • 北京
  • 2025年07月15日
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      393

    • 英文名

      Circular DNA Whole Genome Amplification Kit

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      2~8℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京环状DNA全基因组扩增试剂盒厂家的品牌:百奥莱博,是优质的核酸扩增(PCR)产品,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多环状DNA全基因组扩增试剂盒等核酸扩增(PCR)产品请联*(代"系")我司咨询订购。

    北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京环状DNA全基因组扩增试剂盒厂家,产品信息:

    类别:核酸扩增(PCR)

    英文名:Circular DNA Whole Genome Amplification Kit

    产品名 产品编号 包装规格
    环状DNA全基因组扩增试剂盒 BTN100947 30次

    品牌:百奥莱博

    规格:30次

    英文名:Circular DNA Whole Genome Amplification Kit

    产地:国产|进口

    本产品基于WGA的、专门用于环状DNA(如质粒)扩增的全基因组扩增试剂盒,优化后的反应体系对环状DNA全基因扩增有良好的效果,可以方便、简单、快速、经济的得到环状DNA样品的扩增产物。

     

    产品特点:

    1. 线状DNA清除剂可以清除残留的线状DNA,保留环状DNA,包括超螺旋DNA、带裂口(nick)的环状DNA和带缺口(gap)的环状DNA。

    2. WGA采用基于phi29 DNA聚合酶的MDA法,能得到平均长度在10Kb以上的扩增产物,还具有高产量和高保真性的特点。

    3.可以将环状DNA扩增上万倍,是保留珍贵痕量DNA样品的唯一办法。

    4.可使用各种环状DNA样品,包括质粒DNA,环状病毒DNA,线粒体DNA等。

    5. 操作简便快捷,恒温(30℃)反应,无须PCR仪即可实现扩增。

    6.产物可用于多种后续试验,包括酶切、克隆、文库构建、测序、基因芯片分析等。

     

    试剂盒组成:

     

    成分 规格
    线状DNA清除剂溶液A 100μl
    线状DNA清除剂溶液B 30μl
    WGA DNA变性液 75μl
    WGA溶液A 150μl
    WGA溶液B 300μl
    Phi29 DNA聚合酶(10U/μL) 15μl
    超纯水 1mL
    说明书 1份

     

    储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。

     

    使用方法:

     

    一、去除环状样品中的线状DNA(线状DNA量不超过5μg)

    1.在干净塑料离心管中,按下表加入各成分(30μL体系):

     

    成分 样品 正对照 负对照
    自备DNA样品(1-10μg) (样品) (用环状DNA) (用线状DNA)
    线状DNA清除剂溶液A 3μL 3μL 3μL
    线状DNA清除剂溶液B 1μL 1μL 1μL
      补水到30μl 补水到30μl 补水到30μl

    2. 加200μL石蜡油后,37℃保温16小时。注意:保温时间过短可能会形成短的DNA片段,影响后续反应,所以最好保温16小时。必须加石蜡油,否则长时间保温期间水分会蒸发到管盖上。如果使用热盖打开的PCR仪则可以不加石蜡油。

    3. 65℃加热灭活线状DNA清除反应的酶。

    4.电泳检测酶切效果。本产品不清除带裂口(nick)和带缺口(gap)的环状DNA(如质粒),所以这些片段将不会消失。如果所含线状DNA超过5μg,则需要用非酶线性DNA清除剂清除或者稀释后用本法处理。

    5. WGA扩增需要100pg-100ng的环状DNA,一般环状DNA的浓度都高于此范围,则需用超纯水将DNA稀释到40pg-40ng/μL,稀释过程中线状DNA清除反应中的成分也相应稀释,故一般不会影响后续WGA反应。如果样品中DNA浓度过低,则需要用微量核酸沉淀剂(需另买)沉淀后再溶解到适当体积的超纯水中,沉淀过程中线状DNA清除反应中的成分也被去除。

     

    二、碱变性(对环状DNA,碱变性法一般优于热变性法,推荐用户使用)

    6.在PCR塑料管中加入不超过2.5μL环状DNA样品。如果体积不足2.5μL,则用超纯水补齐。最好同时做一个不加样品的阴性对照。

    7. 加入等体积(2.5μL)WGA DNA变性液,轻柔吹打混匀。

    8.室温放置2分钟变性。

    9. 加入5μl WGA溶液A,轻柔吹打混匀后立即进入第15步。注意:热变性的DNA样品不能久存,否则DNA会缓慢复性,所以必须马上进入后续处理。

     

    三、热变性法

    10.在PCR塑料管中加入1-5μL纯化好的环状DNA,用量在100pg-100ng之间。最好同时做一个不加DNA模板的阴性对照。

    11. 加入5μL WGA溶液A,轻柔吹打混匀。

    12. 如果不足10μL,补水到10μL。

    13.在PCR仪器上 95℃加热变性3~5分钟,其间最好打开PCR仪的热盖。也可以使用95℃水浴加热3分钟。

    14. 热变性结束后短暂离心(将蒸发到管壁的水甩下),然后将样品管在冰上放置至少5分钟,立即进入第15步。注意:热变性的DNA样品不能久存,否则DNA会缓慢复性,所以必须马上进入后续处理。

     

    四、WGA反应

    15.在10μL碱变性或热变性的DNA样品中,加入10μL的WGA溶液B,轻柔吹打混合均匀。

    16. 加入0.5μL Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL),轻柔吹打混合均匀。

    17. 30℃保温3-12小时。最好使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如果采用30℃水浴,最好在样品管中加入50μL石蜡油以防水分蒸发,因为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁,从而改变反应体系中各成分的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高,WGA三小时即可检测到DNA扩增。

    18. 65℃保温10分钟使phi29 DNA聚合酶灭活。注:由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性,所以最好将其灭活以免干扰后续反应。

    19. 立即取2-5μL WGA反应液进行电泳检测扩增效果。

    20.扩增的DNA可以用于后续试验或放冰箱长期保存。

    北京环状DNA全基因组扩增试剂盒厂家专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司

    关键词:BTN100947,Circular DNA Whole Genome Amplification Kit,环状DNA全基因组扩增试剂盒

    环状DNA全基因组扩增试剂盒怎样保存?

    一般试剂可保存在玻璃瓶内; 对玻璃有强烈腐蚀作用的试剂,如**酸、*氧化*应保存在聚乙*(代"烯")塑料瓶内; 易被空气氧化、分化、潮解的试剂应密封保存;易感光分解的试剂应用有色玻璃瓶贮存并藏于暗处; 易受热分解及低沸点溶剂,应存于冷处; 剧毒试剂应存于保险箱; 有放射性的试剂应存于铅罐中。如果化学试剂保管不当,就会失效变质,影响实验的效果,并造成物质的浪费,甚至有时还会发生事故。因此,科学地保管好试剂对于保证实验顺利进行,获得 可靠的实验数据具有非常重要的意义。

    北京环状DNA全基因组扩增试剂盒厂家极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:

    编号 类别 名称
    BTN60910 DNA纯化 非冻型血液DNA保存液
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