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931
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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阴凉干燥
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百奥莱博专业生产供应10%SDS溶液(DNA级)多少钱,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:10%SDS溶液(DNA级)多少钱
编号:BTN101201
规格:250mL
产地:国产|进口
更多有关10%SDS溶液(DNA级)多少钱的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·柱式细菌RNA提取试剂盒
编号:BTN80103
英文名称:Bacterial RNA Column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是细菌RNA提取试剂盒(BTN51102)的柱式升级产品,用于快速从各种常见的革氏阴性细菌中提取总RNA。如需提取革氏阳性细菌的RNA,可以选择柱式真菌RNA提取试剂盒。跟细菌RNA提取试剂盒相比 它具有下列特点:
1. 操作更加简单快速,省去了最费时的离心步骤。
2. 所得 RNA 纯度更高,OD260/OD280一般在 2.0左右.
3.一般不含基因 DNA污染。
4.适用于各种革氏阴性细菌。
5. 性价比高于进口同类产品。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 30ml |
| 溶液B | 20ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
下面的操作步骤是针对在 1.5mL塑料离心管中进行的微量提取的。
1. 新鲜配制裂解液。将溶液A和溶液B 按 1:1的比例混合。注意:溶液A和溶液B 混合后必须立即使用,不要放置,否则会产生沉淀。一次处理1.5mL左右的细菌需要0.6mL新鲜配制的裂解液(即0.3mL溶液A和0.3mL溶液B的混合液)。
2.在 1.5mL塑料离心管中离心收集0.2-1.5mL 新鲜细菌。注意:由于细菌RNA 半衰期十分短,所以,必须使用最新鲜的、处于对数生长期的细菌。
3. 吸尽液体培养基,加入0.6mL 新配制的裂解液,用枪充分吹打细菌沉淀,确保细菌全部裂解,没有块状物。
4. 将裂解物转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中,然后加入0.2倍体积的自备*仿(1mL 裂解物需 0.2mL *仿),振荡器上充分振荡混均 30秒。
5. 12000~15000g室温离心 3~5分钟。
6. 将上清液(约0.6-0.8mL)转移到离心吸附柱中。注意:离心后下层有 机相和中间层含有 DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下 100μL上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行,否则容易吸出交界面的不可见的丝状 DNA。
7. 12000~15000g室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
8. 加 0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。但如果样品 OD260/280 比值不高,可以再用0.3mL通用洗柱液重复此步一次。
9.室温 12000~15000g离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响 RNA的使用。
10. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中,加入50-100μL RNA 洗脱液。
11.室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
12. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做 Northern杂交,强烈建议用户使 用甲醛变性胶进行 RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
13. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之 间)检测其在 OD260的光吸收。通过光吸收可以得出 RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出 RNA的产量(浓度 X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
14. RNA 纯度测定:无污染的总 RNA的OD260/OD280一般在 1.8-2.1 之 间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分 别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响 RT-PCR等反应。
疑难解答:
Q:上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗?
A:不是。用 TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳 RNA时容易产生此现象,百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基 互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用 TBE作电泳液的话)形成的复合物,加 RNase处理后,这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象,建议 最好使用甲醛变性胶电泳和RNA 专用上样液(如我们的RNAload)。
Q:如何确认和去处除污染的基因组 DNA?
A:如果怀疑有 DNA污染,可以用 RNase处理 RNA样品,然后再电泳。如 果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组 DNA污染。进一步确认可以使用 PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用百奥莱博的非酶的DNA 去除剂 DNA Scavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一 般都有残留 RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的使用手册进行操作。
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1.试剂包装:1g、5g、10g、25g、100g、500g等不同包装,欢迎来电咨询:10%SDS溶液(DNA级),生化试剂
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