Bradford法蛋白定量试剂盒价格

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Bradford法蛋白定量试剂盒价格由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多Bradford法蛋白定量试剂盒等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：Bradford法蛋白定量试剂盒价格
产地：国产|进口
编号：BTN80814
品牌：百奥莱博
规格：100mL
Bradford法测定蛋白质浓度是最为常用的蛋白检测方法之一，在酸性条件下，考马斯亮蓝染料能与蛋白质结合形成复合物，其最大吸光值也由465nm转移到595nm，通过颜色的强弱测定蛋白质浓度的高低。本产品是基于Bradford法蛋白检测原理开发的产品。

产品特点：
1．快速，10-20个样品只需要10分钟即可完成测定。
2．稳定，加样混匀后2分钟既可测定，1小时内吸光度变化不超过10%。
3．线性范围在 50～1000μg/mL。
4．最小测量体积为1-20μL，最低测量蛋白量为0.5μg。
5．即开即用，不需要单独购买每个成分再配制。
6．有常规和微量两种检测模式。
7．不受绝大部分样品中的化学物质的影响。巯基乙醇的浓度可高达1M，二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。
8．但受略高浓度的表面活性剂影响，各种蛋白质与染料的结合效率可能有差异。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	100ml
BSA标准(2mg/mL)	1ml
滤纸	20张
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，BSA 标准-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、常规检测流程：
此方法在蛋白浓度30-1000μg/mL范围内呈现R2 = 0.996的直线线性回归，可精确定量蛋白浓度在此范围内的蛋白样品。
1．制备 1×工作液。溶液A与无菌水按1：4 比例充分混合即为1×工作液(例：4mL溶液A+ 16mL 无菌水 = 20mL 1×工作液)。
2．滤纸过滤。过滤后的工作液室温条件下可稳定使用1-2 星期。
3．检测：蛋白样品与1×工作液按1：50 比例混合(例：100μl蛋白样品 + 5mL 1×工作液，适用于3mL的比色杯；40μl蛋白样品 + 2mL 1×工作液，适用于1mL的比色杯；20μl蛋白样品 + 1mL 1×工作液，适用于平底透明96孔板)。
4．加样后，充分混匀。
5．室温放置5分钟。
6．检测吸光度。波长设定 = 595nm。
注意事项：
1．不同型号、规格的滤纸，具有不同的孔径，导致可通过的分子各不相同。请使用本公司指定提供的滤纸，否则会导致不同的测定结果。
2．检测样品之前，应首先制备蛋白标准曲线。一般可使用BSA。
a)常规检测：建议使用下述浓度的BSA。
 0μg/mL、31.25μg/mL、62.5μg/mL、125μg/mL、250μg/mL、500μg/mL、750μg/mL、1000μg/mL
b)微量检测：建议使用下述浓度的BSA。
 0μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL、7.5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL。
3．检测细胞提取物或纯化蛋白样品，应使用相应的缓冲液制备蛋白标准曲线。
4．用 96孔板测定时，应确保没有气泡，否则会绝对增加吸光度的读数。
5．此检测试剂不受绝大部分样品中的化学物质的影响。巯基乙醇的浓度可高达1M，二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的表面活性剂影响。若SDS高于0.1%，TritonX-100高于0.1%，Tween20，60，80高于0.06%，可取少量样品加水稀释到适当浓度，再行测定。

二、微量检测流程：
此方法在蛋白浓度1～20μg/mL范围内呈现R2=0.992的直线线性回归，可精确定量蛋白浓度在此范围内的蛋白样品。
1．蛋白样品与溶液A按4:1比例混合，例：

蛋白样品	溶液A	适用性
400μL	100μL	平底透明96孔板
2mL	0.5mL	1mL的比色杯
4mL	1mL	3mL的比色杯

2．加样后，充分混匀。
3．室温放置5分钟。
4．检测吸光度。波长设定= 595nm。
注意事项：
1．Bradford蛋白浓度测定的显色反应受许多去污剂的影响。应避免使用SDS，Triton X-100，Tween等溶解蛋白样品。对于难溶解的蛋白样品，可用1MNaOH 溶解和稀释。
2．Bradford蛋白浓度测定的显色反应依赖于蛋白中精*酸残基的数目，因此不同蛋白间测定的差异可能较大。
3．标准品曲线配制时，如果吸量不准确或者加样枪不精确会造成标准曲线相关系数减小，可根据需要使用倍比梯度稀释的方法来配制，或者使用精确度高的加样枪。
4．由于Bradford法在蛋白浓度增高到一定时候，颜色反应并不成比例增加，因此得到的标准曲线只是在一定范围内可以近似看成直线，每次应按照实际测得的标准曲线计算出相对精确的蛋白浓度。
5．不像其它一些蛋白浓度测定方法(包括Lowry法)，Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中巯基乙醇的浓度可高达1M，二流苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的去垢剂影响。需确保SDS低于0.125%，Triton X-100低于0.125%，Tween 20低于0.06%，可以考虑用超纯水稀释，透析/除盐，ACETONE/TCA沉淀蛋白后重溶于超纯水等方法来消除干扰物质的影响。

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·鲱鱼精DNA溶液
编号：BTN130908
英文名称：Herring Sperm DNA Solution
规格：1mL
本产品是浓度为10mg/mL的、经过热变性处理的单链鲱鱼精DNA溶液可以用于Southern、Northern预杂交，还可以用于酵母化学转化和电转化。本产品即开即用，非常方便。

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

·β-琼脂糖酶Ⅰ
编号：BTN120623
英文名称：β-AgaraseⅠ
规格：100U
 β-琼脂糖酶切割琼脂糖亚单位或未置换的新琼脂乙糖(3,6-酐-α-L-吡喃型半乳糖基-1-3-D-半乳糖)生成新琼脂-寡糖(1)。β-琼脂糖酶 I 消化琼脂糖，形成不能再成胶的碳水化合物分子，同时释放所俘获的DNA。通常残留的碳水化合物分子或β-琼脂糖酶 I 不会影响随后的限制性内切酶消化、连接反应及转化反应等 DNA操作。反应原理如下：

 本产品来源重组E.coli菌株，此菌株的质粒上携带有β-琼脂糖酶I的基因编码。
 本产品无核酸内、外切酶或核酸酶污染，可用于从琼脂糖凝胶中提取DNA。

活性单位定义：1单位指42℃、1小时条件下，消化200μl低熔点琼脂糖或NuSieve琼脂糖生成可溶性新琼脂-寡糖所需的酶量。

热失活：95℃,2分钟或65℃,15分钟温育可使50单位的β-琼脂糖酶I失活。β-琼脂糖酶I可以在45-50℃保持几个小时的活性。反应体系中存在琼脂糖可以稳定β-琼
脂糖酶I。

储存条件：低温运输，-20℃ 保存，有效期一年。

备注：
➤ 琼脂糖：由于在反应温度42℃条件下，溶液必需要呈液态，所以仅低熔点琼脂糖适合于用β-琼脂糖酶I消化。
➤ pH值的敏感性：β-琼脂糖酶I在pH6.5时有最适酶活力，在pH5.0-8.5范围内可以保持>75%的酶活力。
➤ 对盐的敏感性：NaCl或Na2 EDTA浓度在50到500mM之间不影响β-琼脂糖酶I活性。


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·膦酰二肽溶液(10mg/mL)
编号：BTN130545
英文名称：Phosphoramidon Solution
规格：10mL
本品为10mg/mL的膦酰二肽水溶液，工作浓度为4-330μg/mL。膦酰二肽(N-(α-鼠李吡喃糖基膦酰胺)-L-亮*酸-L-色*酸)，分子量是579.6，可溶于水，是一种来自微生物的蛋白酶抑制剂。可以特异性抑制*嗜热蛋白酶、胶原酶和微生物来源的金属内切蛋白酶。


储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期三个月。


·一步法单菌落质粒DNA提取试剂盒
编号：BTN70804
英文名称：One-step single colony plasmid DNA extraction Kit
规格：50次
本试剂盒是在一步式质粒DNA提取试剂盒(BTN70301)基础上开发的、能够从单个菌落快速提取质粒DNA的产品。它之所以能够从单个菌落中提取到可以用常规电泳方法检测得到的质粒DNA是由于一步式细菌裂解技术能够使细菌释放出其几乎所有的质粒DNA。

试剂盒特点：
1. 不需过夜培养细菌就可以提取质粒DNA，能为研究人员节约一天的宝贵时间。
2.快速，整个过程只需要不到十分钟(对一个样品而言)。
3.一步式裂解细菌，不使用强碱溶液，对DNA 损伤小。
4. 得到的质粒DNA 足够1-2次电泳或酶切实验，足够多次PCR、测序和细菌转化实验。
5.适用于高拷贝、中拷贝和低拷贝的质粒。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	5ml
离心吸附柱	50只
离心吸附柱收集管	50只
通用预洗液	50ml
通用洗柱液	100ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(溶液A需要4℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1. 用吸头挑取一个直径在2 mm以上的菌落到100μl一步法单菌落质粒DNA提取试剂盒溶液A中(溶液A用前摇匀)，充分吹打或振荡裂解直到裂解液变澄清。
2. 直接将裂解液全部转移到离心吸附柱中，室温静置2分钟使质粒DNA与膜结合。室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
3.在离心吸附柱中加入0.7mL的通用预洗液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。注意: 如果通用预洗液放置在低温产生了沉淀，用前需要加热到60℃左右使之融化，混匀后再用。
4. 再在离心吸附柱中加入0.3mL的通用预洗液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。此步预洗最好别省略，否则DNA 纯度不高。
5.在离心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
6. 再在离心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。此为第二次洗涤。
7. 再在离心吸附柱中加入0.4mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。此为第三次洗涤，如果不洗涤三次，最后得到的质粒DNA的OD260和280的比值达不到1.8。
8.室温12000～15000g离心半分钟，甩干残留液体。注意：此步不能省略，否则残留乙醇会影响后续的电泳上样(DNA 沉不到加样孔里去)和酶反应。
9. 将离心柱置于一个新的1.5mL自备塑料离心管中，加入30-100μl DNA洗脱液2.0，室温放置2分钟。如果将DNA 洗脱液2.0预热到65-80℃，则效果更好。
10.室温12000～15000g离心半分钟，离心管底部溶液即为质粒DNA，可以直接用于后续实验或放冰箱长期保存。


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