北京农杆菌GV3101化学感受态细胞厂家价格

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北京农杆菌GV3101化学感受态细胞厂家价格的品牌：百奥莱博，是优质的克隆与表达产品，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多农杆菌GV3101化学感受态细胞等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。

名称：北京农杆菌GV3101化学感受态细胞厂家价格
规格：10×100μL
编号：BTN140384
品牌：百奥莱博
英文名：E.coli GV3101 Chemical Competent Cell
 本产品为GV3101农杆菌化学感受态细胞，其具有利福平和庆大霉素抗性，适用于拟南芥、烟草、玉米、土豆等植物的转基因操作，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率高达104cfu/μg。

基因型：C58(rifR)Ti pMP90(pTiC58DT-DNA)(gentR/strepR)Nopaline。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期一年。

自备试剂：质粒DNA、液氮等

使用方法：

转化前准备
1. 冰水浴和37℃水浴。
2.液氮或干冰/乙醇混合物。
3. 将抗性平板在 28℃培养箱中平衡至少15分钟。
转化方法
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态细胞于冰水浴中融化。
2. 无菌条件下，向刚刚融化的感受态细胞悬液中加入需要转化的质粒，每100μL感受态细胞加1μg质粒DNA，轻柔混匀。冰水浴中静置10分钟。
3. 将离心管置于液氮中速冻 5分钟(注：也可以用干冰和无水乙醇混合物替代液氮)。
4. 迅速将离心管置于37℃水浴静置中5分钟，不要晃动水面。然后快速转至冰水浴中静置5分钟。
5. 加入800μl 无抗生素的2×YT或LB液体培养基，28-30℃振荡培养2~3小时。使菌体复苏，表达抗性。
6. 5000rpm离心1分钟收菌，保留100μl左右上清，轻轻吹打重悬菌体，均匀涂布到含有相应抗生素的LB 固体培养基平板上，待平板中的液体完全吸收后，倒置平板，28-30℃培养48-72小时。
 注：当平板只含有50μg/mL kan时，28℃培养48小时即可；平板中同时加入50μg/mL kan，20μg/mL rif时，需 28℃培养 60h；如果使用的平板含有50μg/mL rif 则需要 28℃培养 72-90小时。

注意事项：
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10 ；质粒不纯或存在乙醇等有机物污染，转化效率急剧下降；质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。
2. 混入质粒时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4. 利福平浓度不应高于25μg/μL，过高的利福平浓度不利于农杆菌生长，会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有 50μg/mL kan，若所用平板含有 20μg/mL rif 则转化效率降低到1/2。
5.培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌；根据所用菌株抗性加入链霉素或庆大霉素可防止 Ti质粒丢失，但链霉素不利于农杆菌的转基因操作，所以一般培养农杆菌时不考虑链霉素或庆大霉素，Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。
6.相关抗生素配方：

 

抗生素	配方	原液	工作液
羧苄青霉素(carb)	双蒸水溶解	50mg/mL	50μg/mL
硫*(代"酸")卡那霉素(kan)	双蒸水溶解	50mg/mL	50μg/mL
链霉素(strep)	双蒸水溶解	10mg/mL	50μg/mL
利福平(rif)	DMSO溶解	10mg/mL	20μg/mL
庆大霉素(gent)	双蒸水溶解	20mg/mL	40μg/mL

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·辣根过氧化物酶(偶联级)
编号：BTN131125
英文名称：Horseradish Peroxidase，Conjugation Grade
规格：100mg
HRP是一种分子量达44000的糖蛋白，由无色的酶蛋白和深棕色的铁卟啉结合而成，中性糖和*基糖约占18％，主要有甘露糖、木糖、阿拉伯糖和己糖胺等。每一个HRP分子中含一个*化血红素IX作辅基，该辅基在403nm 波长处有最大吸收峰，而去辅基的酶蛋白在275nm波长处有最大吸收。HRP在403nm的OD值与275nm的OD值之比，也就是所谓的RZ(Reinheits Zahl)值。RZ值仅说明血红素基团在HRP中的含量，并非表示HRP制剂的真正纯度，而且RZ值高的HRP制剂，并不意味着酶活性也高。但可以以纯酶溶液在10mm光径403nm波长下的吸光度来计算酶浓度[1％(W/V)酶溶液吸光度为22.5，浓度为227umol/L]。HRP对热及有机溶剂的作用比较稳定，用甲*与石蜡切片处理或用纯乙醇或l0％甲醛水溶液固定做冷冻切片，均不能使其活性改变。*化物或硫化物在10⁻⁵～10⁻⁶mol/L浓度时具有可逆性地抑制HRP的作用；*化物、叠氮化合物或羟胺仅在高于10⁻³mol/L浓度时抑制HRP；HRP还可被羟甲基过氧化*不可逆地抑制。强酸也是HRP的强烈的抑制剂。


产品特点：
1．易于提取，价格相对低廉。
2．性质稳定，耐热及有机溶剂的作用，与抗原或抗体偶联后，活性很少受损失。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。


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·DNA marker(φX174 DNA/HaeIII)
编号：BTN90602H
英文名称：DNA ladder(φX174 DNA/HaeIII)
规格：50次
 本系列产品为传统的酶切分子量标准，由单一的质粒DNA或噬菌体DNA经单个限制性内切酶完成消化后，加热灭活而成。每次上样总DNA含量已知，每条带的含量可根据其摩尔数的比值计算出来。本系列产品成分中已经含有上样缓冲液，所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确，明亮清晰，背景较低，稳定性很好。
 每次加样量为5μL，可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。


储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

使用方法：直接上样电泳，每次加样量为5uL。

使用效果：


疑难解答：
a)如对带型要求较高，建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液，电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液，电压为80V)，同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖，同时要经常更换电泳缓冲液。


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·T4核酸内切酶V
编号：BTN130641
英文名称：T4 Endonuclease V
规格：2000U
本产品既有DNA糖基化酶活性，又有AP裂解酶活性。16KD的蛋白质可识别因紫外线照射引起的cis-syn型环丁烷嘧啶二聚体。该酶在嘧啶二聚体的5´端切割糖苷键，同时其内切酶活性切割AP位点上的磷酸二酯键。

产品用途：
1．DNA 损伤研究；
2．单细胞凝胶电泳(彗星实验)。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指20μl反应体系中，37℃条件下，30分钟内使超过95%的0.5μg经紫外线照射诱变的超螺旋pUC19 DNA变成切刻型质粒的酶量。

注意事项：温育时间应不超过30分钟，以取得最佳使用效果。

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