北京现货高纯质粒小提试剂盒优惠价

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京现货高纯质粒小提试剂盒优惠价在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：北京现货高纯质粒小提试剂盒优惠价
编号：WE0162
规格：50次|200次
产地：国产|进口
  本试剂盒提供一种简单、快捷、高效的提取质粒的方法，在碱裂解法裂解细胞的基础上，采用独特的硅基质膜吸附技术和试剂配方，通过离心吸附柱在高盐状态下高效专一的结合溶液中的质粒DNA，经过两步洗涤，一步洗脱，最大限度的去除蛋白质、基因组、RNA和其他杂质。得到的质粒DNA可直接用于细胞转染、PCR、酶切、测序、连接等生物学实验。

试剂盒组成：

 

组份	50次	200次
Buffer P1	15ml	60ml
Buffer P2	15ml	60ml
Buffer N3	20ml	80ml
Buffer PB	10ml	35ml
Buffer PW(浓缩液)	6ml	25ml
Buffer EB	10ml	30ml
RNase A(10mg/ml)	150μl	600μl
吸附柱DM及收集管	50套	200套

自备试剂：无水乙醇。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、所有组分可在干燥、室温(15～30℃)环境稳定保存1年，将吸附柱置于2～8℃可保存更长时间，加入RNase A的Buffer P1 置于2～8℃可稳定保存6个月。
2、第一次使用前，将RNase A溶液全部加入到Buffer P1中，混匀，置于2–8℃保存，使用前需在室温中放置一段时间，恢复至室温后使用。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。
4、使用前若发现Buffer P2、Buffer N3、Buffer PB有沉淀，可在37℃水浴几分钟，即可恢复澄清(请勿剧烈晃动Buffer P2)。
5、注意不要直接接触Buffer P2 、Buffer N3和 Buffer PB，使用后应立即盖紧盖子。
6、提取质粒的量和纯度与细菌培养浓度、菌株种类、质粒大小、质粒拷贝数等因素有关。

操作步骤：
1、取1-5ml过夜培养的菌液加入离心管(自备)中，13000rpm(~～16200×g)离心30秒收集菌体沉淀，尽量吸弃上清。
2、向留有菌体沉淀的离心管中加入250μl Buffer P1(请先检查是否已加入RNase A)，使用移液器或涡旋振荡器充分混匀，悬浮菌体沉淀。
注意：如果菌块未彻底混匀，将会影响裂解效果，导致提取量和纯度偏低。
3、向离心管中加入250μl Buffer P2，温和地上下颠倒混匀4-6次，充分混匀使菌体裂解，此时溶液应变得清亮粘稠。
注意：温和混匀，不要剧烈震荡，以免打断基因组DNA，造成提取的质粒中混有基因组DNA片段。此步骤所用时间应不超过5分钟，避免质粒受到破坏。
4、向离心管中加入350μl Buffer N3，立即温和地上下颠倒混匀8-10次，充分混匀，此时应出现白色絮状沉淀。13000rpm离心5分钟。
注意：Buffer N3加入后应立即混匀，避免产生局部沉淀。
5、将步骤4中所得的上清液转移到已装入收集管的吸附柱DM中，13000rpm离心30秒钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
6、向吸附柱中加入150μl Buffer PB，13000rpm离心30秒。
7、向吸附柱中加入400μl Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇)，13000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液。
8、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中，向吸附膜的中间部位加入50-100μl Buffer EB，室温放置2分钟，13000rpm离心1分钟，将质粒溶液收集到离心管中。-20℃保存质粒。
注意：
1)为了增加质粒的回收效率，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置2分钟，13000rpm离心1分钟，将质粒溶液收集到离心管中。
2)质粒拷贝数较低或>10 kb时， Buffer EB在65-70℃水浴预热，可以增加提取效率。

储存条件：室温(15～30℃)。


北京现货高纯质粒小提试剂盒优惠价极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·1kb DNA Ladder
编号：WE0245
规格：100次(500μl)|500次(5×500μl)
  1 kb Ladder由8条DNA片段组成，分别为1 kb、2 kb、3 kb、4 kb、5 kb、6 kb、8 kb和10 kb。本产品为已含有1×Loading Buffer的DNA溶液，可取5μl直接电泳，使用十分方便
；电泳时5 kb的DNA片段量约为150ng，显示亮带，其他条带的DNA量约为50ng。

注意事项：
1、本产品可直接化冻混匀使用，无需加热。
2、请及时更换电泳缓冲液并使用新制琼脂糖凝胶，以免影响电泳结果。
3、DNA琼脂糖凝胶电泳时，凝胶的纯度对DNA条带的清晰度影响很大，因此尽量选用质量好的琼脂糖，推荐凝胶浓度为0.7%-1%，电压4-8 v/cm。
4、凝胶浓度与DNA片段的分离性能关系密切。凝胶浓度越大，对短片段DNA分离性能越好；反之，凝胶浓度越小，越有利于长片段DNA的分离。

使用方法：
取5μl 加入琼脂糖凝胶的加样孔中(如果加样孔较宽，大于6mm时，须适当增加上样量)，进行电泳。


0.7%琼脂糖凝胶电泳图(5μl)

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期24个月。

·SuperSYBR Mixture(高含量ROX校正染料)
编号：WE0135
英文名称：SuperSYBR Mixture(High ROX)
规格：5ml
  本品是专用于染料法(SYBR Green I)实时荧光定量PCR的预混体系，浓度为2×，包含BaldStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I荧光染料、Mg2+和ROX II校正染料，操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后cDNA靶序列的检测。
  本品所含的荧光染料SYBR Green I可以与所有的双链DNA结合，使该产品可用于不同靶序列的检测而不需合成特异性标记探针。本品含有的BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新高效热启动酶，在常温下没有聚合酶活性，有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的PCR缓冲体系与热启动酶的组合，有效抑制了非特异性的PCR扩增，显著提高了PCR的扩增效率。
  所含的ROX染料可校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，本试剂盒中ROX校正染料含量较高，适用于ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等需要较高ROX信号进行校正的荧光定量PCR仪 。

试剂盒组成：

组份	1ml	5ml
2×SuperSYBR Mixture(High ROX)	1ml	5×1ml
ddH2O	1ml	5×1ml

产品特点
1、本产品中使用了全新高效热启动酶BaldStar Taq DNA Polymerase与独特的PCR缓冲体系，显著提高PCR的扩增效率，具有高灵敏度和特异性强的特点。
2、适用于荧光定量PCR检测，能够准确地对目的基因进行定量和检测。

注意事项：
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2、本产品中含有SYBR Green I荧光染料和ROX染料，保存本产品或配制PCR反应液时应避免强光照射。
3、避免反复冻融本品，反复冻融可能使产品性能下降。
4、本品不能用于探针法荧光定量PCR。
5、配制反应液时，请使用新的或者无污染的枪头和离心管，尽量防止污染。

操作步骤：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×SuperSYBR Mixture(High ROX)	2 5μl	1×
Forward Primer，10μM	1μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	1μl	0.2μM
Template DNA	2μl
ddH2O	up to 50μl

注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可得到较好结果，可以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。
3)推荐反应体系为50μl，也可以根据实际实验需求按比例扩大或者缩小反应体系。

2、PCR反应程序：
注意！本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成！

建议采用下表显示的两步法PCR进行程序设定，本程序是以ABI7500荧光定量PCR仪为例。若因Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR 扩增，三步法操作步骤详见《反应条件的优化》。
 

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	15 s	35-40 个循环
退火/延伸	60℃	1 min
融解曲线分析	95℃	15 s
	60℃	1 min
	95℃	15 s
	60℃	15 s

注意：
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)退火温度请以60-64℃作为设定范围的参考，发生非特异性反应时，可提高退火温度。
3)本程序是以ABI 7900荧光定量PCR仪为参照设定，融解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定。

反应条件的优化：
在荧光定量反应条件优化时，应从引物浓度、退火温度、延伸时间等方面进行考虑，以提高反应特异性和扩增效率。
1、反应特异性和扩增效率高的实验体系应具备以下条件：
1)反应特异性高：阴性对照无引物二聚体等非特异性扩增；不产生目的片段以外扩增。
2)扩增效率高：Ct值低；PCR扩增效率高，接近理论值100%。
2、反应条件优化方法：
1)引物浓度：通常引物浓度以0.2μM可得到较好结果，可以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。若提高反应特异性，可降低引物浓度；若提高扩增效率，可增加引物的浓度，由此优化反应体系。
2)退火温度：建议采用两步法PCR，退火温度60℃进行反应。若提高反应特异性，可提高退火温度，以60-64℃作为设定范围的参考。若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增，三步法的退火温度请以56℃-64℃的范围作为设定参考。
3)延伸时间：建议采用两步法PCR，延伸时间1 min进行反应。若提高扩增效率，可尝试将延伸时间增加，或尝试三步法PCR。
注意！本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成！

三步法荧光定量PCR(本程序是以ABI7900荧光定量PCR仪为例)：
 

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	10 s	35-40个循环
退火	56-64℃	30s
延伸	72℃	32s
融解曲线分析	95℃	15s
	60℃	1 min
	95℃	15 s
	60℃	15 s

注意：
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度。
3)若需提高反应扩增效率，可适当增加延伸时间。
4)本程序是以ABI 7900荧光定量PCR仪为参照设定，融解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定。

储存条件：-20℃，避免反复冻融


北京现货高纯质粒小提试剂盒优惠价关键词：PlaPure Mini Extraction Kit,WE0162,高纯质粒小提试剂盒


·Y染色体人基因组DNA定量试剂盒
编号：WE0232
英文名称：Y Human Male DNA Quantification Kit
规格：1ml|5ml
  本产品是一种检测人类男性Y染色体浓度的实时荧光定量PCR试剂盒，包括精心优化的PCR反应液、引物混合物、标准品，尤其适用于珍贵、微量DNA样本的定量检测。试剂盒采用了全新高效、快速的热启动扩增酶Goldstar Taq DNA Polymerase，有效避免常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增。本品实现对Y染色体的准确定量，后续可应用于各种领域如遗传制图、物种多态性研究、疾病基因定位、亲子鉴定和法医鉴定等研究分析。
  ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同，因 此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
  不需要ROX校正的仪器：Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-radiCyler iQ，iQ5，CFX96等。
  需要Low ROX校正的仪器：ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System， QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system， Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
  需要High ROX校正的仪器：ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。


北京现货高纯质粒小提试剂盒优惠价关键词：PlaPure Mini Extraction Kit,WE0162,高纯质粒小提试剂盒

N-乙酰-D-脯*酸 Bromothymol blue sodiu*(代"m") salt 16395-58-7
蒽醌 Puromycin dihydrochloride 84-65-1
CC0801 高效感受态细胞制备试剂盒
SJ0456 Potassium Chloride *化*(代"*")
BFD054 呋*(代"喃")它酮快速检测卡
ARB11413 人结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)Elisa分析 Human haptoglobin,hpt/hp ELISA KIT
F030101 HRP标记小鼠抗乙肝核心抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBcAg*HRP
多粘菌素B硫*(代"酸")盐 Azure Ⅱ 1405-20-5
PY02-181  山梨醇麦康凯琼脂基础  250克  
*化钕 2,4,6-Trimethyl benzoyldiphenyl phosphine oxide 10024-93-8
ARB10337 人水通道蛋白4(AQP-4)含量测试 Human aquaporin 4,aqp-4 ELISA KIT
甲基环戊烯醇酮 Phosphoglucose isomerase 765-70-8
BFD018 羊口蹄疫抗体检测试剂盒
ARB13792 豚鼠血清总补体(CH50)免费代测 Guinea pig 50% complement hemolysis,ch50 ELISA KIT
F010103 小鼠抗乙肝核心抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HbcAg
ARB13798 豚鼠免疫球蛋白G(IgG)Elisa方法检测 Guinea pig immunoglobulin g,IgG ELISA KIT
ARB11224 人细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)elisa检测 Human intercellular adhesion molecule 1,icam-1 ELISA KIT
PY02-261  改良马丁琼脂  250克  
SJ0238 Mimumum Essentiul Medium(MEM)
389-08-2 Nalidixic acid  *啶酮酸

我公司正在火爆促销DNA纯化系列产品，欢迎您的垂询选购北京现货高纯质粒小提试剂盒优惠价。