无缝克隆试剂盒促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

无缝克隆试剂盒促销的品牌：百奥莱博，是优质的克隆与表达产品，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多无缝克隆试剂盒等克隆与表达产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：无缝克隆试剂盒促销
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
英文名：Seamless Cloning and Assembly Kit
无缝克隆是一种简单、快速、高效的DNA 定向克隆技术，该技术突破传统，不依赖内切酶和连接酶，不受限制性内切酶酶切位点的限制，利用同源重组的原理，可将任何DNA片段克隆至任何载体的任何位点。反应及转化时间短，阳性率达95%以上。

产品特点：
1. 简单、高效地定向克隆DNA片段。
2.可同时定向克隆两个或多个DNA片段。
3. 不依赖内切酶和连接酶，不受限制性内切酶酶切位点的限制。
4. 省时，反应时间加转化时间短至20分钟。
5. PCR产物(仅有目的条带、无非特异条带和引物二聚体)可直接进行重组反应，无需纯化。

试剂盒组成：

 

成分	规格
2×Seamless Mix	125μl
阳性对照DNA片段I	10μl
阳性对照DNA片段II	10μl
阳性对照线性化载体	10μl
超纯水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

1. 线性化载体的制备：
 可通过单酶切、双酶切或PCR扩增的方法来制备。(如果线性化不彻底，将会导致阴性克隆的产生，推荐使用双酶切或PCR扩增的方法。)
2. DNA片段的制备：
 1)DNA片段可通过PCR扩增或酶切的方法制备，PCR扩增片段无需纯化即可用于重组反应。
 2)PCR扩增法引物设计原则：
  A.引物的3´端必须包含18-50个能与模板DNA 结合的碱基序列，以便PCR扩增出目的DNA片段。
  B.引物的5´端必须包含15-80个与线性化载体末端同源的碱基序列，以便PCR扩增片段能与线性化载体进行重组反应。
3. 重组反应：
 1)按照如下体系操作：
 2)50℃反应15分钟，然后将离心管放置于冰上。如当天不进行转化实验，请将连接产物放-20℃保存。
 注：线性化载体建议使用20-60 ng，DNA片段按照与线性化载体摩尔比3：1使用。
4.转化：
 1)取5μl连接液至50-100μl 刚刚融化的感受态细胞中，轻轻混匀，冰浴2-30分钟。
 2)42℃水浴热激30秒。
 3)立即放置于冰上静置2分钟。
 4)加入300-500μl 无菌SOC或LB培养基(不含抗生素)，37℃，200-250rpm 振荡培养60分钟。
 5)吸取 200μl菌液涂板，为得到更多克隆，可先3000 g离心2分钟，弃掉部分上清，用移液器轻吹菌体，至充分悬浮，取全部菌液涂板，然后37℃培养过夜(12-16小时)。
5. 用菌落PCR、直接测序或其他方法鉴定重组子。
6. 阳性对照反应(可选)
 将本试剂盒提供的阳性对照DNA片段和线性化载体按如下体系操作：
阳性对照DNA片段I(600bp，20 ng/μL)

或阳性对照DNA片段I(900bp，30ng/μL)

1μl
阳性对照线性化载体(2.8kb，30ng/μL)	1μl
2×Seamless Mix	5μl
超纯水	3μl

 50℃反应15分钟，然后按照步骤4转化涂板后用菌落PCR、直接测序或其他方法鉴定阳性重组子。

欲咨询购买无缝克隆试剂盒促销，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：

·IPTG溶液
编号：BTN80909
规格：1.5mL

·重组蛋白L
编号：BTN131082
英文名称：Peptostreptococci protein L
规格：1mg
本品为重组蛋白L，纯度大于90%，带6×HIS标签，分子量为40kD。

储存条件：-20℃保存，有效期1年。

·酸洗玻璃珠(1500～2000μm)
编号：BTN100307E
英文名称：Acid-Washed Glassbeads(1500～2000μm)
规格：10g
本品为重组蛋白L，纯度大于90%，带6×HIS标签，分子量为40kD。

储存条件：-20℃保存，有效期1年。

·血液游离DNA提取试剂盒(液体样品DNA提取试剂盒)
编号：BTN121001
英文名称：Free DNA extraction kit
规格：50次
本试剂盒是专门用于从各种微量和痕量样品中提取DNA和RNA的试剂盒。

试剂盒特点：
1. 核酸的回收率高，可以达到90%以上，可以跟QIAGEN的同类产品媲美。
2.一管式操作，减少了样品污染的可能。
3.一站式套装，除样品外客户不需要准备任何试剂，降低了实验误差。
4. 安全无毒，不需要使用*酚和*仿等有机溶液。
5.可以处理各种形态的样品，包括液体样品，单个或少量的细胞，微小胚胎等等。
6.与PCR、荧光PCR、RT-PCR、荧光RT-PCR等后续反应兼容。
7. 试剂稳定，可以长期放置。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	15ml
溶液B	25ml
溶液C	55ml
溶液D	5ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，溶液A和溶液D需要4℃保存，溶液B和溶液C室温保存，有效期一年。溶液B和溶液C具有挥发性，使用后需要将瓶盖拧紧。

使用方法：
1. 将不超过0.1mL的样品转移到自备的1.5mL旋盖塑料离心管中。
2. 加入0.3mL溶液A，盖上盖子后振荡3-5秒。注意:溶液A用前需37℃-65℃水浴融化并充分摇匀后方可使用。
3.室温静置10分钟。
4. 加入0.4mL溶液B，盖上盖子后振荡3-5秒。
5. 15000g室温离心15分钟。强烈建议在离心管管壁上用记号笔做简单标记以区别离心面和向心面。
6.小心移弃上清。注意不要触及离心面管底的核酸沉淀。
7. 加入1.0mL溶液C，振荡数秒后15000g室温离心5分钟。注意：将离心管放入离心机时一定要将离心面向外。
8.小心移弃上清。注意不要触及离心面管底的核酸沉淀。
9. 短暂离心数秒。注意：将离心管放入离心机时一定要离心面向外。
10.小心移弃残留上清(残留的溶液C会影响后续反应)。此时管壁(离心面方向)上将有可见的膜状沉淀。
11. 加入100μl溶液D，用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁的膜状沉淀，使其溶解。溶解液如果混浊或有少量不溶物是正常现象，不溶沉淀物中就裹含有核酸。
12. 直接取适量样品用于PCR或RT-PCR，也可短期保存于-20℃或-80℃。


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·通用洗柱液
编号：BTN60408
规格：250mL

·PCR Mix染料
编号：BTN131212
英文名称：PCR Mix Dye
规格：10mL
本产品可加入到PCR反应液中，使PCR产物可直接上样电泳，其分子量相当于50bp大小的DNA片段，不干扰观察。
注：本产品不是PCR荧光染料，是一类可见光染料(类似电泳用的*酚蓝，二甲*蓝等指示剂)

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

·taq酶抗体
编号：BTN130815
英文名称：Taq Antibody
规格：500U
Taq Antibody是Hot Start PCR用抗Taq抗体，其与Taq酶结合后抑制DNA聚合酶活性。使用本制品进行PCR扩增时，高温变性前抗Taq抗体与Taq酶结合抑制DNA聚合酶活性，能够在低温条件下有效抑制引物的非特异性退火及引物二聚体引起的非特异性扩增。抗Taq抗体在PCR反应最初的DNA变性步骤中变性，DNA聚合酶活性恢复，达到Hot Start PCR效果。使用本制品无需特殊的抗Taq抗体失活处理，可以在常规PCR反应条件下使用。其工作原理如下：


储存条件：低温运输，-20℃保存、有效期一年。

活性定义：Taq Antibody与Taq DNA Polymerase混合，25℃，10 min温浴后，在55℃，10 min条件下抑制90％以上的1U的Taq DNA Polymerase活性的Taq Antibody量定义为1U。

纯度：
1. 10 U的Taq Antibody和1μg的λDNA-Hind III在37℃或70℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
2. 10 U的Taq Antibody和1μg的Supercoiled pBR322 DNA在37℃或70℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
3. 10 U的Taq Antibody和1μg的λDNA在37℃或70℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
4. 10 U的Taq Antibody和1μg的16S，23S rRNA在37℃或70℃下反应1小时，RNA的电泳谱带不发生变化。
5. 35Cycles的PCR反应条件下，无Mouse Genomic DNA的污染。


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·酸洗玻璃珠(200μm)
编号：BTN100307B
英文名称：Acid-Washed Glassbeads(200μm)
规格：10g
本品是用浓酸充分洗涤后的玻璃珠，它是玻璃珠法破碎细菌和真菌的必备成分，主要用于从具有坚硬外壁的微生物细胞(如真菌孢子、酵母细胞、结核细胞等)中提取DNA、RNA和蛋白质大分子，因为用其他方法，包括酶解方法都很难沉底破碎具有坚硬外壁的微生物细胞。

产品特点：
1. 经过充分的酸洗，免去用户接触具有腐蚀性的浓酸。
2. 用本产品破碎具有坚硬外壁的微生物细胞，属于物理方法，不但比温和的化学破壁法普适性更好、重复性更好，同时不需要使用酶，因此不容易被酶中的外源核酸或蛋白质污染。
3. 用玻璃珠破碎法提取一个样品只需要10余分钟时间，非常快捷。注意：本产品需要跟本公司提供的裂解液、上柱液、离心吸附柱等配合使用才能用于核酸纯化。
4.一次可以处理5mL的微生物样品。
5. 本系列产品有各种规格、适用于不同材料。具体请参考下表：

编号	玻璃珠直径	最适用途
BTN100307A	100μm	作为超声破碎细菌时的添加物
BTN100307B	200μm	破碎细菌
BTN100307C	400μm	破碎酵母(如酿酒酵母)
BTN100307D	800μm	破碎霉菌、孢子等

储存条件：常温运输及保存，保存期为两年。

使用方法：
以我公司玻璃珠法柱式真菌DNA提取试剂盒(BTN100303)为例：离心收集1-5mL过夜培养的真菌细胞，加入0.5mL溶液A和体积相当于0.5mL的、直径为400μm玻璃珠(大约0.5克)，振荡器上以最高速度振荡10分钟，，再加入0.5mL溶液B，震荡2分钟，2000rpm离心2分钟，在上清中加入3倍体积的溶液C，上柱，用通用洗涤液洗两次，干甩一次，最后用50-100μL DNA洗脱液洗脱基因组DNA待用。

使用效果：

图注：使用本产品C型(BTN100307C)提取3mL过夜培养的毕赤酵母菌液，最后用50μl DNA洗脱液洗脱，5μl用于琼脂糖电泳。电压300V，电泳时间5分钟，染料为绿如蓝，缓冲液为SuperBuffer。

我公司正在打折促销克隆与表达全系列产品，恭候您的咨询选购无缝克隆试剂盒促销。