液相内毒素清除剂品牌

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")液相内毒素清除剂品牌，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：液相内毒素清除剂品牌
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
英文名：Liquid endotoxin scavenger
编号：BTN60607
规格：100次
去除液体生物样品(包括质粒DNA样品)中污染的内毒素(endotoxin)具有重要的临床意义，因为内毒素对原代细胞、传代细胞和整体动物均具有显著的毒性作用。由于内毒素(化学本质为脂多糖，即lipopolysaccharides)是包括E.coli在内的革兰氏阴性细菌细胞壁的主要组成成分，并且带电性跟DNA 类似，所以从E.coli细胞中提取的质粒DNA和重组蛋白质药物中常常含有大量的内毒素污染，并且很难用用常规方法(包括硅胶膜吸附，离子交换吸附、凝胶排阻过滤、*化铯超速离心)去除。本产品就是专门用于高效去除生物样品中的内毒素污染。

产品特点：
1. 简单快速，一次处理只需要20分钟左右，不需要复杂仪器设备。
2.高效，一次处理可以去除90%以上的内毒素，经过三次重复抽提可将内毒素的水平降低到0.2 EU(endotoxin unit，约0.1 ng LPS)/mL以下。
3.适用范围广，可用于DNA、RNA、蛋白质或其他生物样品。
4. 不影响DNA和绝大部分蛋白质的活性，处理过的质粒DNA可用于转染实验。
5. 既可小规模使用(在1.5mL离心管内)，也可放量使用。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
如果使用前本产品有分层，冰浴后振荡混匀。

一：用于体积小于500μl的DNA/RNA样品
1.在一干净的离心管中加入500μl的样品。如果不足500μl,可以用水或TE补足。
2. 加入50μl的3 M 醋酸*(pH5.2)，混匀后冰浴5分钟。
3. 加入50μl预冷的本产品，充分混匀后冰浴10分钟。
4. 65℃水浴直到溶液变浊或出现分层为止(一般需要1-5分钟)
5.室温12000～15000×g离心2分钟(不能低温离心)，离心后上层为无色透明，下层为淡蓝色。
6. 将上清转移到新的离心管中。
7. 如果需要，可以重复步骤3～6。
8. 加1倍体积的异丙醇或两倍体积的乙醇，混匀，12000～15000×g离心30分钟。
9. 弃上清后用70%酒精洗2次。
10. 空气干燥沉淀后加入100μl 无内毒素的水或TE缓冲液溶解沉淀。
11. 测定DNA和内毒素的含量，与未纯化的样品比较。
二：用于体积大于500μl的DNA/RNA样品
整个操作同上，只是在15或50mL塑料离心管中进行，离心速度不能超过离心管的承受力。
三：整合到碱变性法质粒DNA 制备过程中
整个操作同上，只是：
1.样品必须是加溶液III离心后得到的上清液或最后得到的质粒溶液。
2. 如果处理的是加溶液III离心后得到的上清液，可以略去第2 步操作。
3.处理后的溶液需要用试剂盒提供的或自备的上柱液调整盐离子浓度，然后上柱，以后的操作按试剂盒提供的操作手册进行。
4. 洗脱DNA 所用水或溶液必须无内毒素污染。
四：对蛋白质和其它生物样品
整个操作同上，只是：
1． 略去第2 步操作，加3 M 醋酸*(pH5.2)只为沉淀核酸。
2． 第4 步改为37℃保温以免蛋白质变性，溶液呈混浊状或分相一般需要20-30分钟。
3． 略去第8 步和以后操作。

疑难解答：
Q:为何用常规的方法很难去除生物样品中的内毒素?
A:因为内毒素带电性跟DNA和部分蛋白质相同，所以基于带电性的分离方法(如硅胶膜吸附，离子交换吸附)不能将它们分开;同时内毒素又是双性分子(类似于细胞膜的磷脂分子)，能够形成大小不等的聚合物，跟质粒DNA和蛋白质大小接近，所以基于分子量大小的分离方法(如凝胶排阻过滤和*化铯超速离心)也不能将其有效分离。

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·十二烷基磺酸*
编号：BTN131049
英文名称：SDS
规格：100g
本产品是促进溶解的理想去垢剂。在SDS(十二烷基)中碳链长度的独特分布利于在凝胶电泳实验中溶解病毒蛋白。可用于需要在SDS-PAGE后进行复性的实验(如果按照Blank,等的方法处理凝胶来去除C14和C16烷基磺酸盐)。


储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

·蛋白胶中量回收试剂盒
编号：BTN90403
英文名称：Protein Gel Midi-Extraction Kit
规格：5次
十二烷基硫*(代"酸")*-聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)不仅可用于检测蛋白质的相对分子质量，而且也是分离纯化蛋白质的重要工具之一，随着蛋白质技术的微量化，有必要从凝胶中回收蛋白质以用于制备抗体、免疫印迹、*基酸组分分析或末端序列测定等。本产品就是专门为此用途开发的中量蛋白胶回收法。

产品特点：
1．简单，不需要复杂而昂贵的仪器(如电洗脱仪)。
2．适用于变性胶(SDS-PAGE)和非变性胶。
3．每次可以处理1g的PAGE胶(具体多少蛋白质取决于上样的浓度)。
4．回收率一般在50-90%之间(跟蛋白质大小，洗脱时间相关)。
5．跟后续的实验兼容，包括2-D电泳、质谱测序等。

产品组成：

 

成分	规格
溶液A	5ml
溶液B	50ml
20mL塑料注射器	5只
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1．按常规方法进行变性(SDS-PAGE)或非变性蛋白电泳。
2．切取含目的蛋白的胶(尽可能地把多余的胶切除，否则会影响回收效率)。
 注意：固定和染色后蛋白回收效果很差，所以建议把样品分多孔上样，电泳后只切其中一个样孔的胶条进行固定和染色，然后将此胶条放回到在整体胶中原来的位置，通过显色胶条上的蛋白条带找到在未染色胶上对应区域，并切下此区域的胶进行回收。
3．将切下的、重量不超过1 克的胶块转移到30mL塑料注射器中。
4．用塑料注射器推杆将胶块从端口挤压出去，使之变成细小的碎片，用自备的15mL塑料离心管收集这些破碎的凝胶颗粒。
5．加入1mL溶液A，4℃摇晃洗脱至少2-16小时(过夜)。此时最好将将要使用的溶液B放在冰箱预冷。
6．10000g离心10分钟，转移上清到新的10-15mL的塑料离心管中，注意不要吸取碎胶。
7．加入5倍体积的预冷的溶液B，摇晃混匀。
8．-20℃放置至少10-30分钟。
9．室温12000g(注意：一定要检查使用的离心管是否能够耐受次离心力，如果不能建议将溶液分到1.5mL的塑料离心管中再进行离心处理)离心5-20分钟，弃上清。
10．室温充分晾干，得到的沉淀即为回收的蛋白质。回收的蛋白质可溶解在适当的缓冲液中，可用于后续实验(2-D电泳、质谱测序等)。


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·dNTP溶液(10mM)
编号：BTN51208B
英文名称：dNTP Solution，10mM
规格：0.5mL
本产品是dATP、dTTP、dGTP、dCTP四种核苷酸的混合液，每种核苷酸的浓度为10mM，纯度在98%以上(HPLC检测)，不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染，可以直接用于PCR、RT-PCR、cDNA合成、DNA测序、DNA探针标记等反应。使用浓度根据具体的反应决定，请参考相关手册。



储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

DNA为何使用2"-脱氧核糖和胸腺嘧啶？
 DNA为何不选择现成的光合作用产物核糖和合成RNA的原料尿嘧啶(uracil)分别作为其糖分子和碱基，而去选择需要额外的合成步骤才能得到的2"-脱氧核糖和胸腺嘧啶(thymine)，其原因何在呢？目前的主流观点是：DNA不能选择核糖的原因之一是由于核糖2"位置上的OH基团会使得到的双螺旋骨架结构不均匀、不平行，难以有效地折叠进染色体结构中，而使用2"-脱氧核糖则能得到均匀平行的双螺旋结构；原因之二是核糖2"位置上的OH基团会对邻近的磷酸二酯键进行分子内亲核攻击，降低分子的稳定性，而对遗传物质来说稳定性十分重要，所以DNA选择了失去分子内亲核攻击能力的2"-脱氧核糖。对信使分子而言，稳定性并不重要，所以RNA仍然使用核糖。
 DNA使用胸腺嘧啶的原因是DNA中的胞嘧啶(cytosine)会缓慢水解变成尿嘧啶，如果尿嘧啶也是DNA的正常组成成份，则DNA修复系统就不能区分哪些尿嘧啶是正常的，哪些是需要修复的。使用胸腺嘧啶(比尿嘧啶分子多一个甲基)不但能保持跟尿嘧啶一样的形成碱基对的能力，同时又能跟尿嘧啶区别开来，使DNA分子中出现的任何尿嘧啶都能被尿嘧啶DNA糖苷酶(uracil-DNA glycosylase)发现和修复。


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