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嵘崴达
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文献和实验NK-92为人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞,属于IL-2依赖型NK细胞系。是NK细胞功能研究、CAR-NK工程化改造及免疫治疗机制探索的常用悬浮模式细胞,细胞聚团生长,边缘清晰、折光性强。细胞增殖依赖重组IL-2,缺少IL-2的细胞会在72 h内死亡。本文将针对NK-92的细胞培养流程进行梳理和指导。 一、细胞复苏 1.【准备工作】水浴锅提前预热至37℃;9mL完全培养基37℃预热;生物安全柜紫外照射灭菌30min; 2.【融化】液氮取出冻存管,37℃水浴快速摇晃融化,约1-2
群体的集落,称为菌落。每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点,例如菌落的大小,表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑,边缘整齐或不整齐,菌落透明或半透明或不透明,颜色以及质地疏松或紧密等。因此,可通过平板培养来检查环境中细菌的数量和类型。 三、器材 肉膏蛋白胨琼脂平板,无菌水,灭菌棉签(装在试管内),接种环,试管架,酒精灯或煤气灯,记号笔(或蜡笔),废物缸。 四、操作步骤 每组在“实验室”和“人体”两大部分中各选择一个内容做实验,或由教师
)。 (2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO 或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为3×106~1×107/mL之间。 (3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中,安瓿装1~1.5mL在火焰喷灯上封口,封口处要完全封闭,圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。 (4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜,次日转入
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