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- 2025年07月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Hot Start Taq DNA Polymerase
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海沪震实业有限公司
- 保存条件：
2-8℃保存
- 规格：
500U-1000U
Hot Start Taq DNA Polymerase
别名 : 热启动酶 热启动DNA聚合酶 热启动Taq DNA聚合酶储存条件 : -20℃保存, 有效期至少一年
Hot Start Taq DNA Polymerase品是抗Taq单克隆抗体修饰的热启动Taq DNA Polymerase，高温加热前抗Taq单克隆抗体与 Taq酶结合，抑制聚合酶的活性，从而抑制低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。抗Taq单克隆抗体在PCR反应最初的DNA变性步骤已变性，因此无需特殊失活处理，在常规PCR反应条件下即可使用。在qPCR反应中，能明显提高荧光PCR的扩增效率（尤其对低拷贝数模板），改善其扩增曲线的完美度，其稳定性好、可重复性高、特异性强。此酶室温放置一周，酶活性仍可保持95%以上。
活性定义：1单位(U) Taq DNA Polymerase活力定义为在74℃，30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
质量控制： SDS-PAGE检测Taq DNA Polymerase纯度大于99%；经检测无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残余DNA；能有效地扩增人类基因组中的单拷贝基因；室温存放一周，无明显活性改变。
酶贮存缓冲液： 20mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 100 mM KCl ; 50% glycerol; 稳定剂
适用范围： 用于小于6kb的对保真度要求不高的DNA片段的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定、平末端加A等，产物可以直接用于T/A载体克隆。
建议PCR条件：预变性温度是95度，时间为5-10分钟，其它的和普通Taq酶的反应条件一样。
PCR体系（以50μl反应体系为例）
Template <0.5μg
上游引物（10μM） 1μl
下游引物（10μM） 1μl
10×Buffer（含Mg2+） 5μl
dNTP（各2.5mM） 4μl
热启动Taq酶 0.5-1μl
ddH2O up to 50μl
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文献和实验Hot Start activation approaches are increasingly being used to improve the performance of PCR. Since the inception of Hot Start as a means of blocking DNA polymerase extension at lower temperatures, a number of approaches have been developed
for both DNA sample and reaction mixture preparation, is strongly recommended.The reagents for PCR should be prepared separately and used solely for this purpose. Autoclaving of all solutions, except dNTPs, primers and Taq DNA Polymerase is recommended
The Polymerase Chain Reaction (PCR)
• Template DNA • Reaction buffer (Tris, ammonium ions(and/or potassium ions), magnesium ions,bovine serum albumin) • Nucleotides (dNTPs) • Primers • DNA polymerase (usually Taq) PCR In Detail • Denature, anneal, extend and repeat the cycle 30 to 35
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