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MiaoLingBio
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淼灵生物
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文献和实验毛状根产生的Ri质粒。Ri质粒是发根农杆菌染色体外的一个约250kb的大质粒，带有冠瘿合成酶基因。在Ri质粒上，存在与转化有关的两个主要功能区，即T-DNA (转移区)和Vir (致病区)。Vir区基因并不发生转移，但它对T-DNA的转移非常重要。当发根农杆菌感染植物时Ri质粒上的T-DNA可以转化并插入到植物细胞基因组中，其整合和表达的结果导致了大量毛状根的产生。处理菌株后可提高Vir区的表达并明显提高药用植物外植体的转化率。 发根农杆菌Ri质粒有几种不同的类型，分别是农杆碱型
室完成。 1.2 农杆菌菌株 大肠杆菌DH5α为受体菌，克隆质粒为PUC19，植物表达载体为PROKⅡ，根癌农杆菌菌株LBA4404,由中国科学院北京微生物所提供。具有ACC脱氨酶基因，长度为1kb,位于表达载体pROKⅡ35s上。 1.3 实验方法 1.3.1 哈密瓜无菌苗的获得 分别取皇后、伽师瓜种子去皮,70%的酒精溶液浸泡1min,再用0.1%的升汞溶液消毒6～
保存的菌种，在试验前必须进行菌株的生物特性鉴定。菌株鉴定的判断标准，如表1所示。表1 试验菌株鉴定的判断标准菌株组氨酸缺陷脂多糖屏障缺损氨苄青霉素抗性切除修复缺损四环素抗性自发回变菌落数*TA97TA98TA100TA102+++++++++++++++----+90-18030-50100-200240-320注「+」表示需要组氨酸「+」表示具有 rfa 突变「+」表示具有 R 因子「+」表示具有 △uvrB 突变「+」表示具有 pAQ1 质粒*在体外代谢活化条件下自发回变菌落数略增 7.2
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