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- 技术资料
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-20
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3个月
- 英文名:
MiaoLingBio
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1000
- 供应商:
淼灵生物
- 规格:
1管
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文献和实验dmdfe 本人将GFP基因后面加了一段大约110bp的序列,插入PET28A的BamH1和Hind3位点,最后在BL21中表达。 经SDS-PAGE验证表明: 目的蛋白 大量存在菌体裂解后沉淀即包涵体中,但是该沉淀无色。 少量存在于上清中,上清显微弱的绿色。 看文献大量报道GFP融合蛋白几乎都形成可溶性表达,目的蛋白在上清中,并且诱导条件没有太大要求。 想请教一下各位做过GFP原核表达的经验
Nanobiotechnology. 2020 Jan 9;18(1):10. 二、慢病毒介导 CD63-GFP 表达: 将外泌体的特定蛋白 CD63 和绿色荧光蛋白 GFP 的表达元件构建成质粒再包装到慢病毒中,随后用此慢病毒感染细胞,使细胞分泌的外泌体带有绿色荧光。 图6 用 GFP 标记的外泌体分别与 SH-SY5Y、BV2 和 DRG 细胞共培养 Artif Cells Nanomed Biotechnol. 2019 Dec;47(1):2918-2929. 图7 注射有 CD63-GFP 的外泌体后观察
【共享】如何检测GFP、GFP、YFP、EYFP、CFP抗体?
以及定位分析。那么该如何检测GFP其他的一些突变体,如EGFP、YFP、EYFP、CFP的表达和定位呢?我们来看一下GFP标签与其它突变体标签的关系。YFP(Yellow Fluorescent Protein)是黄色荧光蛋白,其序列与GFP基本相同。YFP就是把Thr203以Tyr取代,这样的GFP不发出绿色荧光,而发出较长波长的黄色荧光,也就是YFP。因此两者最大的区别则是发射波长了,在其他序列上没有区别。而EGFP是增强型的GFP,发生了双氨基酸取代,Leu(亮氨酸)取代GFP上的Phe64
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