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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
3个月
- 英文名:
MiaoLingBio
- 库存:
1000
- 供应商:
淼灵生物
- 规格:
1管
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文献和实验条件下消化20min。用孔径为300μm不锈钢筛网滤出组织块,收集滤液,在4℃条件下离心(400g,10min)。吸去上清液,用HA液混悬沉淀细胞,在4℃条件下保存; 4. 按操作步骤3重新操作1次,得到细胞悬液; 5. 将操作步骤3和4收集的细胞悬液混合,用孔径为100μm不锈钢筛网过滤,收集滤液,在4℃条件下离心(400g,10min)。然后,用4℃的HA液混悬沉淀细胞,再离心1次; 6. 用HACM液混悬细胞,调整细胞密度至0.5×106 —2×106 个/ml;
块重复消化1次; 3. 将组织块用TGMD液清洗后,放入消化液b中,在30℃条件下消化30min。用孔径为300μm不锈钢筛网滤出组织块,收集滤液,在4℃条件下离心(400g,10min)。吸去上清液,用HA液混悬沉淀细胞,在4℃条件下保存; 4. 按操作步骤3重新操作1次,得到细胞悬液; 5. 将操作步骤3和4收集的细胞悬液混合,用孔径为100μm不锈钢筛网过滤,收集滤液,在4℃条件下离心(400g,10min)。用HACM液混悬细胞,调整细胞密度至0.5×106 —2×106
可以用于任何DNA导入哺乳类动物进行暂时性表达或长期转化的研究。该方法往往被用于贴壁细胞的转染,也是最好的方法。 1. 试剂的配制 (1)2×HBS 1.63 g NaCl ;1.19g Hepes;0.023 g Na2 PO4 ·2H2 O;加水至100 ml pH 7.1 过滤,4℃保存 (2)2mmol/L CaCl2 过滤除菌 (3)TE:0.1mmol/L EDTA,1mmol/L Tris-HCL PH 8.0 (4)G418(新霉素G418)液:1g G418溶于
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