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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
3个月
- 英文名：
MiaoLingBio
- 库存：
1000
- 供应商：
淼灵生物
- 规格：
1管
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文献和实验共沉淀最大的优势在于该体系是在生理条件下检测蛋白质之间的相互作用，因此，不仅可以检测到体内形成的天然复合体，而且可排除过表达靶蛋白所带来的假阳性。其次内源性的靶蛋白质是完全加工、修饰和成熟的蛋白质，因此，依赖于修饰的蛋白质相互作用也能被检测到。 二、实验步骤： 1. 构建表达质粒 2. 共转细胞 3. 收集并裂解细胞 4. 加入蛋白A/G和抗体共同孵育 5. Westernblot检测
"把基因表达量调高"听起来是个简单需求，但用 CRISPRa 和用 cDNA 过表达质粒，得到的细胞模型和结论都可能完全不同。选错的话，表型实验从一开始就偏了。 先说结论：过表达质粒是在细胞质里额外生产一份蛋白，表达量远高于生理水平、不考虑 isoform 和调控背景、也无法保证定位正确；CRISPRa 是在内源基因组位点上激活转录，产物是天然的剪接 isoform、受内源调控元件约束、表达量更接近生理范围。想问"这个基因多了会怎样"用过表达，想问"把这个基因的内源表达调高
相关专题 HuH7细胞 转入LXRα/RXRα表达质粒 ，并以抗LXRα抗体 处理。经chip 后对产物进行PCR 分析。从实验结果可以明确LXRE2为与调控 蛋白 特异结合的位点。 标签: 广州赛诚生物 chip 转录调控 作者：广州赛诚生物 点击： 次
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