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文献和实验Nat Methods：陈玲玲/杨力/李劲松等开发新技术，实现环状 RNA 功能性筛选和研究
Methods 官网）前述实验结果表明 RfxCas13d 是一种高效、特异的 circRNA 敲除工具。研究团队构建了靶向 9 个人类细胞系中 2908 个高表达 circRNA 的 BSJ-gRNAs 文库，尝试使用该工具鉴定潜在的参与细胞增殖的候选 circRNA。 BSJ-gRNA 文库构建（图源：Nature Methods 官网） 研究团队将 BSJ-gRNA-RfxCas13d-HT29 细胞转移到裸鼠体内进行体内功能缺失（loss-of-function，LOF）表型筛筛选，注射 22 天后
CRlSPR/Cas9是细菌和古生物菌用来抵抗外来质粒或噬菌体等遗传物质入侵的一种获得性免疫系统。利用CRlSPR/Cas9技术建立哺乳动物全基因组突变库或者与某类功能相关的基因突变体库，通过功能性筛选和富集以及随后的PCR扩增和深度测序分析，发掘与筛选表型相关的基因，称为CRlSPR/Cas9 gRNA文库筛选。gRNA文库是药物筛选或靶向筛选特定通路的理想工具，gRNA文库的建立将在功能基因筛选、疾病机制研究及药物研发等方面发挥重要的功能。 CRlSPR/Cas9 gRNA文库筛选流程
折叠，在细胞内形成聚集体并产生神经毒性。尽管对 HD 发病机制的理解取得了重大进展，但仍然没有有效的治疗方法。 使用病毒 AAV9-mini-cmv-spCas9, AAV9-control-gRNA-RFP，AAV9-HTT-gRNA-RFP-20Q 注射方式 脑立体定位注射，耳静脉注射 注射剂量 （1）脑立体定位注射：表达 gRNA 和 Cas9 的病毒以 1:2 的比例混合，将 30μL 的混合病毒（总共 1-1.5E+12vg）注入猪纹状体的两侧（每侧15μL），注射
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