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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
3个月
- 英文名:
MiaoLingBio
- 库存:
1000
- 供应商:
淼灵生物
- 规格:
1管
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文献和实验-1,pBADHis, pBADHislacZ,pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C 共表达质粒:pCDFduet-1 以及pCDNA3.1,pEGFP-N2等 大肠杆菌Rosetta(DE3),Rasettagame(DE3),Top10F', BL21(DE3)plySS 等 酵母表达质粒: pPICZαA, pGAPZαA, 酵母细胞 KM71, X33 yingzi
pMBP-P 大肠杆菌质粒 Amp 分泌表达,His和MBP标签,带凝血酶位点 pMal-C2x 大肠杆菌质粒 Amp 表达MBP标签蛋白,原核表达载体 pMal-P2x 大肠杆菌质粒 Amp pMal-P
"把基因表达量调高"听起来是个简单需求,但用 CRISPRa 和用 cDNA 过表达质粒,得到的细胞模型和结论都可能完全不同。选错的话,表型实验从一开始就偏了。 先说结论:过表达质粒是在细胞质里额外生产一份蛋白,表达量远高于生理水平、不考虑 isoform 和调控背景、也无法保证定位正确;CRISPRa 是在内源基因组位点上激活转录,产物是天然的剪接 isoform、受内源调控元件约束、表达量更接近生理范围。想问"这个基因多了会怎样"用过表达,想问"把这个基因的内源表达调高
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