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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
3个月
- 英文名:
MiaoLingBio
- 库存:
1000
- 供应商:
淼灵生物
- 规格:
1管
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文献和实验-1,pBADHis, pBADHislacZ,pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C 共表达质粒:pCDFduet-1 以及pCDNA3.1,pEGFP-N2等 大肠杆菌Rosetta(DE3),Rasettagame(DE3),Top10F', BL21(DE3)plySS 等 酵母表达质粒: pPICZαA, pGAPZαA, 酵母细胞 KM71, X33 yingzi
杆菌质粒 Kan PET系列载体 pET42b 大肠杆菌质粒 Kan PET系列载体 pET43.1b 大肠杆菌质粒 Amp PET系列载体 pET44a 大肠杆菌质粒 Amp PET系列载体
加热灭活酶。通过凝胶提取试剂盒纯化消化的pET-32α(+)载体骨架和从pMD18-T载体切下的基因片段。用T4 DNA连接酶在23℃下用pET-32α(+)载体骨架连接基因片段1小时,载体末端和插入末端的比例为1:3(fmol)。将10μl连接反应与100μl感受态大肠杆菌 BL21(DE3)在冰上混合10分钟,并将混合物在42℃下孵育90秒。加入800μlLB并在37°C下孵育40分钟。涂在含有100μg/ ml氨苄青霉素的LB平板上。在37°C孵育过夜。通过菌落PCR筛选插入物的存在或制备
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