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3个月
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MiaoLingBio
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1000
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淼灵生物
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1管
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文献和实验panzerking 我在设计实验 想用NF-kB-luc做报告基因 是不是一定要用β-galactosidase 报告质粒或者Renilla荧光素酶报告质粒作为内参? 我看了有些文献 好像有的用 有的一个都没用 是有这样的情况吗 或者是不是只要保证control组NF-kB-luc转染条件一样就可以做为可用的数据了? lwjssry 不可以,一定要用内参,需要校正对照和处理组细胞数目的差异
细胞 ATP 检测和活体肿瘤示踪,共用一套双荧光素酶体系吗?
酶 (Firefly Luciferase, F-Luc) 和海肾荧光素酶 (Renilla Luciferase, R-Luc)。 『报告基因 (F-Luc)』 将你感兴趣的调控元件(如启动子、基因的 3'-UTR 区域)克隆到萤火虫荧光素酶基因的上下游。当调控元件被激活或靶向结合时,发光的强度会发生变化。 『内参基因 (R-Luc)』 作为对照。由于细胞数量、转染效率等外在因素会影响实验的绝对发光值,海肾荧光素酶作为一个稳定的基础参照,可以用来校正这些误差。 在 ATP 和荧光素酶存在
再登《Cancer Research》!金开瑞双荧光素酶报告系统助力机制研究新突破
结果 实验组1 IDO1启动子-WT + 荧光素酶报告载体 TFAP2A过表达载体 荧光素酶活性显著↑ 实验组2 IDO1启动子-Mut(TFAP2A结合位点突变)+ 荧光素酶报告载体 TFAP2A过表达载体 荧光素酶活性无显著变化 结果解读 当TFAP2A与野生型IDO1启动子共转染时,荧光素酶活性显著升高,表明TFAP2A能够激活IDO1启动子的转录活性。 当TFAP2A结合位点突变后,TFAP2A无法再提升荧光素酶活性,证实了TFAP2A对IDO
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