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MiaoLingBio
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1000
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淼灵生物
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1管
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文献和实验【求助】逆转录病毒、慢病毒载体与其他真核表达载体在稳定筛选时的区别？
roy_liu823 逆转录病毒和慢病毒载体经包装后可以得到携带外源基因的病毒，将病毒感染细胞后，外源基因可以整合到细胞基因组中，经过稳定的筛选后，就可以得到稳定表达外源基因的细胞。 而一些真核表达载体如pcDNA3.1经脂质体转染进细胞后，也可以整合到细胞基因组中，并经过G418的筛选后，也可以得到稳定表达外源基因的细胞。我就很困惑：这两者有什么区别？用逆转录病毒或慢病毒载体的优势在哪？如果我想得到能稳定表达某一基因的骨髓基质干细胞，是不是用pcDNA3
系统应用最为常见，以CMV启动子构建的pcDNA3能在大多数哺乳动物细胞中高效表达所插入的外源基因，并且是高拷贝数质粒，为大量制备质粒DNA带来了方便。 (1)质粒骨架元件：表达质粒的复制起始位点是质粒自我复制的基础，它确定了在免疫细胞中质粒的拷贝数和质粒DNA的产生数。目前常用的复制起点是大肠杆菌质粒ColEI复制起点，该起点可确保质粒在大肠杆菌细胞中维持20个以上的拷贝数。 (2)启动子和增强子元件：启动子为重要的调控序列，是一段位于转录
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