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Western blot 中文称为免疫印迹,实验过程是将待测蛋白质转印到膜上,通常为PVDF膜或者NC膜等,然后利用抗体进行检测的方法,是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。
其基本原理是通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离细胞或组织样本中的蛋白,转移到固相载体(如PVDF膜或者NC膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且可以保持其分离的多肽类型及生物学活性不变。蛋白质或多肽作为抗原,与相应的抗体起免疫结合,再与辣根过氧化酶(HRP)或者碱性磷酸酶(AP)或同位素标记的二抗起反应,经过底物显色以检测电泳分离的特异性目的蛋白表达情况。该法结合了凝胶电泳和固相免疫测定两种技术的高特异性和高敏感性,可以对目标蛋白进行定性和半定量的分析。
拓普生物是为生命科学研究提供一站式专业服务的公司,其成立即建立健全的WB平台,有多个跑胶系统和转膜系统,其中转膜系统包括湿转和半干转,可以同时进行多样本和多蛋白检测;另外还具备了专业的技术人员和实验监控人员,可以对实验结果进行严格的把关。
如下是我们公司的WB平台的仪器设备
WB实验流程:

结果展示:

WB灰度分析的统计结果
其基本原理是通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离细胞或组织样本中的蛋白,转移到固相载体(如PVDF膜或者NC膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且可以保持其分离的多肽类型及生物学活性不变。蛋白质或多肽作为抗原,与相应的抗体起免疫结合,再与辣根过氧化酶(HRP)或者碱性磷酸酶(AP)或同位素标记的二抗起反应,经过底物显色以检测电泳分离的特异性目的蛋白表达情况。该法结合了凝胶电泳和固相免疫测定两种技术的高特异性和高敏感性,可以对目标蛋白进行定性和半定量的分析。
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WB灰度分析的统计结果
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