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- 服务名称:
EMSA检测
- 提供商:
北京普瑞华盛生物科技有限公司
- 规格:
膜
凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析,当检测如转录调控因子一类的DNA结合蛋白,可用纯化蛋白,部分纯化蛋白或核蛋白提取物。在检测RNA结合蛋白时,依据目的RNA结合蛋白的位置,可用纯化或部分纯化的蛋白,也可用细胞核或胞质提取物进行检测。
本公司提供的EMSA服务,是基于化学发光检测系统与EMSA相结合,利用生物素标记的探针与HRP标记的亲和素的结合,通过增强型化学发光底物可以发出的荧光的性质,检测出DNA-蛋白质或RNA-蛋白质相互作用产生的电泳迁移率的变化。
操作流程:
1、从组织或细胞样品中提取核蛋白或重组表达蛋白混合物
2、BCA蛋白定量
3、EMSA检测
4、核蛋白混合物与探针等进行反应
5、预电泳及电泳:SDS-PAGE电泳分离蛋白样品
6、湿法转印
7、紫外交联
8、杂交孵育:与Biotin结合的SA-HPR孵育及洗膜
9、化学发光检测(ECL),胶片曝光。
客户提供:
1、新鲜或正确保存的组织或细胞样品
2、互做核酸序列信息
3、阳性对照样品(尽量提供)
4、相关文献(可选)
我们提供:
1、探针的设计与合成
2、PieceEMSA检测试剂盒
3、预实验曝光结果
4、正式试验曝光结果
5、完整的实验报告
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文献和实验Electrophoretic Mobility Shift Assay(EMSA)
20cm Gel Preparation, Sample Separation, and Visualization: Glass Plate Preparation:• Wash both panes of glass with windex and 70% EtOH• Dry with KimWipe• Assemble with toothed spacers on sides, winged spacer on bottom• Clamp corners
Electrophoretic Mobility Shift Assay (EMSA)
Sugden lab,McArdle Laboratory for Cancer Research,University of Wisconsin-Madison Medical School DNA /EMSA.pdf">http://mcardle.oncology.wisc.edu/sugden/Protocols/PDF files/Association of protein with DNA /EMSA.pdf Electrophoretic Mobility Shift
Electrophoretic Mobility Shift Assay--电泳迁移率检测
凝胶迁移或电泳迁移率检测(Electrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA)是一种检测蛋白质和DNA序列相互结合的技术,最初用于研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用,可用于定性和定量分析。这一技术目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用,已经成为转录因子研究的经典方法。其基本原理是蛋白质可以与末端标记的核酸探针结合,电泳时这种复合物比无蛋白结合的探针在凝胶中泳动的速度慢,即表现为相对滞后。该方法可用于检测DNA结合蛋白、RNA结合
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