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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
620
- 英文名:
Total RNA Extraction Kit From Plant Massive Cell & Tissue
- 保质期:
6个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖大量植物RNA提取试剂盒(含DNA清除柱)折扣价在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:大量植物RNA提取试剂盒(含DNA清除柱)折扣价
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:Total RNA Extraction Kit From Plant Massive Cell & Tissue
规格:10次
本试剂盒适用于植物组织细胞总RNA大量提取,在无*酚、*仿RNA快速提取技术基础上,又采取基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可直接用于PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,植物RNA助提剂帮助结合多糖多酚并通过离心去除,然后裂解混合物用乙醇调节RNA结合吸附到基因组DNA清除柱,基因组DNA被清除而RNA被选择性洗脱滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
本试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的*酚,*仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在60分钟内完成。
4.独特的植物RNA助提剂可以有效结合多糖多酚,提高清除效果。
5.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
试剂盒组份:
| 组份 | 10次 |
| 裂解液RLT | 100 ml |
| 裂解液RLT Plus | 50ml |
| 去蛋白液RW1 | 120 ml |
| 漂洗液RW | 25ml×2 |
| RNase-freeH2O | 10ml |
| PLANTbalb | 10ml×2 |
| 基因组DNA 清除柱和收集管 | 10套 |
| 吸附柱和收集管 | 10套 |
注意事项:
1. 所有的离心步骤均可在室温完成,使用可容纳50ml 离心管的离心机。
2. 需要自备乙醇,一次性注射器(可选),研钵。
3. 裂解液RLT 和裂解液RLT Plus和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,需要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 植物组织裂解是否充分直接影响到RNA 提取的质量和产量,本试剂盒中提供的裂解液RLT,主要成分为异硫*酸胍,适用于大多数植物组织的裂解,但有些植物组织(例如玉米的乳白色胚乳)或丝状真菌,由于次级代谢产物较特殊,异硫*酸胍使样品产生固化,导致RNA 无法提取,此时可以向我们索取另一种裂解液RLC,将解决该问题。
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留,本试剂盒由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜,在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留(一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见)影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA 表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁(cleanup),请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前,直接在吸附柱上进行DNase I处理。请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
6. RNA 纯度及浓度检测:
完整性:RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE 电泳缓冲液;150v,15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA,电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb,分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍,否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA,OD260/OD280 读数(10mMTris, pH7.5)在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品,假定在10mM Tris,pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA 不纯。
浓度:取一定量的RNA 提取物,用RNase-free 水稀释n 倍,用RNase-free 水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260, OD280 测定,按照以下公式进行RNA浓度的计算:终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40
储存条件:室温,有效期6个月。
本品别名:大量植物RNA提取试剂盒(含DNA清除柱)|植物大量RNA提取试剂盒|植物RNA大提试剂盒
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文献和实验粉末状后再按每管100 mg的量分装到1.5 ml离心管中,每管再加入600 µl含β-巯基乙醇的植物总RNA提取液)。 加入600 µl Buffer EX,用力混合均匀,13000 rpm离心10分钟。 小心吸取350 µl上清,转入一个洁净的1.5 ml离心管中。 在上清液中加入等体积的RNA沉淀液,盖上管盖混合均匀,13000 rpm离心5分钟。 弃上清,低速离心数秒使管壁上的上清液聚集到管底,用200 µl吸头吸尽残留的上清液。 加入1 ml 70%乙醇,盖上管盖,旋涡震荡悬浮
DNA酶柱上消化试剂盒就要1100元/50次,如果还要使用RNA清洁纯化回收DNA酶消化后的盒子就更昂贵了。近年来北京艾德莱又投入大量研发人力物力,终于独家并且首家推出RN38 EASYspin plus 植物RNA提取试剂盒解决了DNA残留问题,该试剂盒使用基因组DNA清除柱子,配合独家研发的溶液,不需要DNA酶消化,操作简单仅需增加10秒钟清除基因组DNA残留的步骤,不用苯酚,氯仿,30分钟完成全部试验过程。我们测试的几种植物样品中均已经获得成功,使用Qiagen的RNeasy plant
要乙醇沉淀等步骤。3. 快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。4. 独有的植物RNA助提剂可以有效结合多糖多酚,提高清除效果。5. 多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。♦ 注意事项1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。2. 需要自备乙醇, β-巯基乙醇,一次性注射器(可选),研钵
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