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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Biotin 3' End DNA Labeling Kit
- 保存条件:
-20
- 规格:
20T
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase(TdT)可以在不依赖于模板的情况下催化在DNA的3'-OH端加上dNTP的反应。关于TdT催化双链DNA末端加dNTP的反应效率,3'端突出的双链DNA要比平端或3'端缩进的双链DNA高很多。TdT催化单链DNA末端加dNTP的反应效率要比双链DNA高很多。在适当的条件下,TdT也可以催化RNA 3'末端加NTP的反应。
生物素3'末端DNA标记试剂盒适合标记纯化的单链DNA,如果用于标记EMSA探针,可以在单链标记后再进行退火。
本试剂盒中提供了已经用生物素标记好的Biotin-Control Oligo,可以用作检测DNA标记效率的对照。
如果每个标记反应的探针量为5pmol,本试剂盒可以用于20个标记反应。
包装清单:
产品编号 产品名称 包装
D3106-1 TdT Buffer(5X) 250μl
D3106-2 TdT(10U/μl) 20μl
D3106-3 Biotin-11-dUTP(5μM) 100μl
D3106-4 Biotin-Control Oligo(0.4μM) 100μl
D3106-5 Ultrapure water 1ml
D3106-6 探针标记终止液 200μl
D3106-7 TE 15ml
— 说明书 1份
保存条件:
-20℃保存。
生物素3'末端DNA标记试剂盒注意事项:
需自备用于检测探针标记效率的带正电荷尼龙膜,以及用于生物素检测的相关试剂。带正电荷尼龙膜(FFN12/FFN16)可以向碧云天订购。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验公司的Atlas Pure Total RNA Labeling System: 这是一个从Total RNA中制备同位素标记的cDNA探针的试剂盒。利用生物素偶联的Oligo(dT)和磁珠偶联的Streptavidin将mRNA吸附到磁珠上,加入MacroArray(包括尼龙膜基质和塑料基质)提供的基因特异引物混合物(CDS Primer)、同位素标记物和逆转录酶,直接在磁珠上合成同位素标记的cDNA探针,最后从磁珠上洗脱标记好的探针,纯化后即可用于杂交。这个标记试剂盒可以从少至10μg
Chemiluminescent Hybridization & Detection Kit),即可组合出完整的非放射性检测分析系统。不过这个系统不适用于玻片基质的芯片的探针标记。 由于Atlas系列的DNA微阵列膜上每个点的核酸量有限,所以对标记探针的灵敏度要求非常高,一般情况下同位素是首选。如今Atlas SpotLight标记试剂盒特别提供逆转录所需的试剂,可以将2μg以上的mRNA或者50μg以上的RNA样品制备成生物素标记的单链cDNA探针,由于没有竞争性抑制,单链探针的灵敏度要大大高于双链探针。另外生物素标记
一种基于手动芯片点样仪的快捷高效的转基因植物PCR-dot-blot鉴定法
1~6),与阳性对照(含有OSsec27p的质粒)一致(Lane 8),而阴性对照(野生型烟草基因组DNA)中未出现(Lane 7),说明结果可信。但还需要用斑点杂交的方法进一步确认其序列信息。 2.2 PCR-dot-blot 将1~4号及7号PCR产物回收纯化除去引物,与OSsec27p的DNA溶液一同调整DNA浓度约为20ng/μl,一同用芯片点样仪点于尼龙膜上(斑点直径约500~780μm),每次点样均设置阳性和阴性对照,各样品的位置如图2左侧所示。然后以生物素标记的OSsec27p
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