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- 库存:
大量
- 英文名:
Plate Count Agar
- 保质期:
3年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
常温、避光、防潮保存
| 名称 | 英文名称 | 编号 | 规格 | 价格 |
| 平板计数琼脂(含麦芽提取物) | Plate Count Agar | LM0101-3 | 250g | 询价元 |
| 产品说明及用途:.用于菌落总数测定 | ||||
简述培养基制备的要求
使用脱水培养基和其他含有有害物质(胆盐或其它选择剂)的成分时,应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明配制。如质量/体积、pH、制备条件、灭菌条件和操作步骤等,并做好记录。
水
配制培养基使用蒸馏水或相同质量的水,以排除测试条件下抑制或影响微生物生长的物制。如果蒸馏水的用氯消毒的水制备的,在蒸馏前应先对氯进行中和(见GB/T6682)。盛放蒸馏水的容器最好是由中性材料制成的(如中性玻璃、聚乙烯等)。在初次使用前要确认容器中不含任何抑制因子。
平板计数琼脂(含麦芽提取物)为保证蒸馏水的质量,电阻率应至少达到300000Ωcm。
警告:采用离子交换器(去离子)生产的去离子水,微生物含量较高,这种水在过滤灭菌后仍可能带有细菌生长的抑制因子。所以配置培养基时最好不要使用这种方法生产的去离子水而应使用蒸馏水。
称量和复水
称量所需的脱水培养基(注意缓慢操作,必要时佩带口罩或在通风柜中操作,以防吸入含有毒物质的培养基粉末),平板计数琼脂(含麦芽提取物)先加入少量的水,充分混合(注意避免培养基结块),然后再加入至所需的量。
溶解
脱水培养基加水后适当加热,并不停搅拌使其快速溶解,必要时,重新溶解。含琼脂的培养基在加热前应先浸泡几分钟。用各别成分制备的培养基应将不同成分分别加入适量的水中,并充分溶解,然后再加入到所需的量。
pH值的测定和调整
用pH计测pH,必要时进行调整。在实验室用各别成分制备培养基,除特殊说明外,培养基灭菌后冷却到25℃时,pH的变化不应超过0.2个单位。一般使用浓度约为40g/L(约1mol/L)的氢氧化钠溶液或浓度为36.5g/L(约1mol/L)的盐酸溶液调整培养基的pH。
平板计数琼脂(含麦芽提取物)注:商品化的培养基高压灭菌后pH值可能变化很大,但采用优质蒸馏水或去离子水配配制时,灭菌前无需调节pH值。
分装
将制配制好的培养基分装到适当的容器中,根据不同用途,容器的体积可为培养基的1倍、2倍或3倍。
灭菌
培养基和试剂应采用湿热灭菌或过滤灭菌。亮绿培养基等特定的培养基中含有对光和热敏感的物质,只能煮沸灭菌。煮沸后应迅速冷却,避光保存(参见相关标准或供应商使用说明)。
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文献和实验,立即倒入预备(2-4天)的含凝固1.5%琼脂LB固体培养基的平板内,轻轻晃动平板使均匀分布。 (4)37℃培养6-8hr后,观察噬斑形成。 (5)用剪去部分头部的吸头挖取单个噬斑到0.5ml的SM液中,加0.05ml氯仿,震荡。37℃温育10min。 (6)重复⑴-⑷,获得单个噬斑滴度。 2. λ噬菌体液体培养 (1)取2ml新鲜培养的宿主菌,离心,0.4ml LB培养基重悬,加λ噬菌体0.1ml(新鲜获得的单个噬斑,依滴度使之与宿主菌比约1/500-1000)。 (2)加麦芽
℃。7. PEG 80008. 10%SDS9.EDTA: 0.5M pH8.010.苯酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)11.异丙醇12.无水乙醇、70%乙醇二、操作步骤1.λ噬菌体平板培养⑴ 用SM液10倍梯度稀释λ噬菌体原种。⑵ 取0.1ml各梯度稀释离心到一消毒微量离心管中,加0.2ml新鲜培养的宿主菌,加麦芽糖(0.2%),MgSO4(10mm),37℃温育20min,使噬菌体颗粒吸附于细菌。⑶ 取熔化(47℃)0.7%琼脂LB固体培养基3ml与上述管混匀,立即倒入预备(2-4天)的含凝固
. 异丙醇 12. 无水乙醇、70%乙醇 二、操作步骤 1. λ噬菌体平板培养 ① 用SM液10倍梯度稀释λ噬菌体原种。 ② 取0.1ml各梯度稀释离心到一消毒微量离心管中,加0.2ml新鲜培养的宿主菌,加麦芽糖(0.2%),MgSO4(10mm),37℃温育20min,使噬菌体颗粒吸附于细菌 。 ③ 取熔化(47℃)0.7%琼脂LB固体培养基3ml与上述管混匀,立即倒入预备(2-4天)的含凝固
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