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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒优惠,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒优惠
品牌:百奥莱博
编号:GL1556
规格:2×50ml
用途:Western blot、免疫组化中的DAB显色
注意事项:主要由DAB孵育液、氧化剂组成,等量混合后使用,染色后呈棕色。
保存:—20℃,避光,12个月
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DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒优惠关键词:百奥莱博,DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒,GL1556
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文献和实验性笔在组织周围画圈,然后滴加稀释好的一抗,如果做阴性对照实验,就在对照组的组织上滴加 PBS。加完一抗后于 4 °C湿盒中孵育过夜。(抗体的最佳稀释比应预先通过实验确定,时间控制在 15h 以上)。 PBS 冲洗切片 3 次,每次 3 min,吸水纸擦干切片后滴加辣根过氧化物酶标记二抗 ,37 ℃ 孵育 30 min。 信号检测 PBS 冲洗切片 4 次,每次 3 min,甩去 PBS 液体后吸水纸擦干切片,每张切片滴加新鲜配制的 DAB 显色液,显微镜下观察,阳性信号为棕黄色或棕褐色,时间
底物范围较广,包括二氨基联苯胺 (DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。 二氨基联苯胺/金属盐 DAB 是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在 DAB 中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑色,且在水及醇中稳定。DAB/金属盐染色应用的组织染色范围较广。 1. 需要的溶液和特殊设备 DAB,0.05 mol/L Tris 缓冲液 (pH7.6), 0.3% (W
或细胞中目的抗原表达水平低:可延长DAB显色时间或延长二抗孵育时间。 (3)试剂超过有效使用期:及时更换试剂。 (4)操作中,滴加试剂时缓冲液未沥干,致使试剂稀释:可每步滴加试剂前沥干切片中多余的缓冲液(但防止切片干燥)。 (5) 蛋白封闭过度:封闭时间不要超过 2h。 Q3:为什么出现高背景染色,怎么办? (1)一抗浓度过高:对抗体进行滴定以确定获得特异性反应的最佳浓度。 (2)显色过度:缩短显色试剂 DAB 孵育时间。 (3)洗涤不充分:适当增加抗体孵育后的浸洗次数和延长浸洗时间。 (4)封闭
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