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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
417
- 英文名:
Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI)大量库存促销,我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI)大量库存促销
英文名:Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit
规格:20 rxn
编号:SY0474
产地:国产|进口
Annexin V-Alexa Fluor488/PI细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor488/PI Apoptosis Detection Kit)是用Alexa Fluor488标记了的Annexin V作为探针,来检测细胞早期凋亡的发生,可用流式细胞仪或其他荧光检测设备进行检测。
其检测原理为:在正常的活细胞中,磷脂酰丝*酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,但在早期凋亡的细胞中,PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ(膜联蛋白-V)是一种分子量为35-36KD的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝*酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。
另外,本试剂盒中还提供了碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。PI是一种核酸染料,它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜,但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。因此,将Annexin V与PI联合使用时,PI 则被排除在活细胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-)之外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被Alexa Fluor488 和PI 结合染色呈现双阳性(Annexin V+/PI+)。
试剂盒组份:
Annexin V-Alexa Fluor488————————100 μl
PI Staining Solution (20 μg/ml)————200 μl
4×Binding Buffer————————————4 ml
注意事项
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝*酸与Annexin V-Alexa Fluor488的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇时胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
4) 试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
5) Annexin V-Alexa Fluor488和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
储存条件:4℃,有效期一年。
北京细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI)大量库存促销正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
·Alexa Fluor 594标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
编号:SY0688
英文名称:Alexa Fluor 594 AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG (H+L)
规格:100μl
本品是由Alexa Fluor 594标记的山羊抗小鼠IgG(H+L),使用抗原偶联的琼脂糖微珠从山羊抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的小鼠IgG分子,也会与其他小鼠免疫球蛋白的轻链结合。可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应,但不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。Alexa Fluor 594的光谱性质类似于Texas Red,Amax(最大激发波长)为591nm,Emax(最大发射波长)为614nm。
本品适合做单标实验,广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学(ICC),流式细胞术(FC)以及免疫组化(IHC)等。要做多标(multiple-labeling)实验,建议使用与相近物种的血清蛋白或者免疫球蛋白预先经过亲和吸附处理的二抗。
浓度:0.75mg/ml
缓冲液:0.005M 磷酸*,0.125M *化*, pH 7.6
稳定剂:7.5mg/ml BSA(无IgG,蛋白酶),50% 甘油
荧光素:Alexa Fluor 594, Amax=591, Emax=614
防腐剂:0.025% 叠氮化*
推荐稀释比例:1:50~400(适用于大多数实验)
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
·MEF3-Luc荧光素酶报告基因质粒
编号:SY0133
英文名称:MEF3 Luciferase Reporter Plasmid
规格:1μg
MEF3-Luc荧光素酶报告基因质粒(MEF3 luciferase reporter plasmid)是用于检测MEF3(myocyte enhancer factor 3)转录活性水平为目的的报告基因。
MEF3-Luc荧光素酶报告基因质粒主要应用于Myocyte Enhancer Factor 3信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。
pGMMEF3-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个MEF3结合位点,可以高灵敏度地检测MEF3的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得MEF3报告基因质粒更易于转染。
质粒图谱

使用说明
pGMMEF3-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
北京细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI)大量库存促销关键词:细胞凋亡检测试剂盒,Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection K,细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI),SY0474
·蛋白A纯化预装柱
编号:SY0468
英文名称:Protein A 4FF Chromatography Column, 1ML
规格:1ml
本品Protein A 4FF Chromatography Column,1ml是一种装填了Protein A Agarose Resin 4FF的中压预装柱,规格1ml,预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA 等,方便客户操作。
天然蛋白A(Protein A)是一种发现于金黄色葡萄球菌的细胞壁表面蛋白,与分离自G型或C型链球菌属的蛋白G类似,主要通过与免疫球蛋白(Ig)的Fc区相互作用,结合大多数哺乳动物的IgG,可用于多种抗体(单抗和多抗)的分离纯化。在与不用的免疫球蛋白亚类的结合特性上,ProteinA 和Protein G结合性能不太一样(详见附录1)。
本品使用的是基因改造后的蛋白A,不仅维持其本身的Ig亲和特性,同时也去除了天然蛋白本身的非主要结合域以降低非特异性结合,Protein A Agarose Resin 4FF以高度交联的琼脂糖凝胶为基质,重组Protein A为配基,具有很高的物理化学稳定性,可以在相对较高的流速下进行抗体的纯化,适用于工业客户。利用本品经过一步亲和层析,即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体,使用方便,应用广泛。
基质(Matrix):高度交联的4%琼脂糖微球
配体(Ligand):重组蛋白A
孔径(Bead size):45-165µm
最大流速(Flowmax):0.3MPa,3bar
储存缓冲液:含20%乙醇的1×PBS
载量(Capacity):>40mg human IgG/ml 基质
pH范围:3-12
储存条件:4℃,有效期两年
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文献和实验Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
Q:Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么? A:Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合,将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合,并产生强烈的荧光,正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,核染料 PI 或 7-AAD
示例: Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左)或未加药 (右)处理4h,FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后,流式细胞仪荧光检测。 Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞,Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。 实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况,检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。 流式检测细胞凋亡的数据分析方法: 1) 选中所有颗粒,将FSC
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