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503
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
pUM19-T Vector TA克隆载体批发由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多pUM19-T Vector TA克隆载体等克隆与表达产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:pUM19-T Vector TA克隆载体批发
规格:5μg
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
pUM19-T载体是一种高效克隆PCR产物(TA Cloning)的专用载体。它是在线性化pUC19载体的基础上,在两侧的3’端添加碱基T而制成。特殊的纯化方式使得超过99%的pUM19载体两端都具有3’-T突出端,因此极大的降低了载体自连率。由于大部分耐热聚合酶反应时都会在PCR 产物的3’端添加一个A,可与pUM19载体3’端的T互补连接,因此可大大提高PCR 产物的连接和克隆效率。pUM19载体多克隆位点位于β-lactamase基因内,可以通过蓝白斑快速筛选含有插入片断的重组子。连接使用的PCR 片段3’端应带有A 末端;Pfu DNA Polymerase等高保真聚合酶的扩增产物不带A,应先在其末端加A后再进行TA克隆。本品随载体提供对照片段(500bp)用于阳性对照反应。
1.将载体置于冰上融化。建议第一次使用时将载体分装成小份保存,每次取一支使用。
2.按下表配置连接反应体系
ddH2O——To 10 μl
10×Ligase Buffer——1 μl
pUM19-T Vector (50 ng/μl)——1μl (约0.025 pmol)
插入片段*——0.075 pmol~0.25 pmol
T4 DNA Ligase (400 U/μl)——1 μl
注:插入片段与载体的摩尔比应在3:1~10:1之间。请根据琼脂糖凝胶电泳或紫外分光光度计检测确定插入片段的浓度,并根据其大小计算摩尔量。1 pmol 1 kb双链DNA的质量约为660 ng。
3.对照反应体系(可选):
ddH2O——6 μl
10×Ligase Buffer——1 μl
pUM19-T Vector (50 ng/μl)——1 μl (约0.025 pmol)
500 bp control insert(50 ng/μl)——1 μl (约0.15 pmol)
T4 DNA Ligase (400 U/μl)——1 μl
4.轻轻吹打混匀反应体系,室温22-26℃孵育1-2小时,或16℃过夜。
5.转化:
1) 将连接产物加入到100 μl感受态细胞中(连接产物的体积不要超过感受态细胞体积的1/6),轻轻弹匀,冰上孵育30分钟。
2) 将离心管置于42℃水浴,不要晃动,准确热激90秒后,立刻置于冰水浴中,不要晃动,静置2-3分钟。
3) 向离心管中加入900 μl LB或SOC培养基,150 rpm, 37℃振荡培养45分钟,使菌体复苏,抗性基因表达。
4) 2500 g离心5分钟,去掉900 μl上清。用剩余培养基将菌体重悬混匀,用无菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀,室温正置10分钟。待菌液被平板吸收后,37℃倒置培养过夜。
注:如果使用超级感受态细胞(转化效率>108 cfu/μg),可以直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存,一周之内都可重新涂板。
储存条件:-20℃。
注意事项
1) 尽量避免反复冻融,可将载体和对照片段分装成小份后保存。
2) 为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
更多有关pUM19-T Vector TA克隆载体批发的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·40%丙*(代"烯")酰胺/甲叉双丙*(代"烯")酰胺,29:1
编号:SY0340
英文名称:40% Acryl/Bis Solution, 29:1
规格:500ml
Acryl-Bis常用于配制聚丙*(代"烯")酰胺凝胶(PAGE胶),包括SDS-PAGE胶等,可以用于蛋白或核酸的分离。聚丙*(代"烯")酰胺凝胶是由丙*(代"烯")酰胺(Acrylamide,简称Acryl)和交联剂甲叉双丙*(代"烯")酰胺(N,N’-methylene bisacrylamide,简称Bis)在由TEMED(N,N,N’,N’-四甲基乙二*(代"胺"))催化过硫*酸还原产生的自由基的存在下,引发聚合反应,形成不带电荷、且具有分子筛性质的网状结构。凝胶的孔径由两个参数决定,分别是单体总浓度(%T, w/v)和交联剂比重(%C)。

通过改变这两个参数,可优化孔径确保得到最佳的分离效果和最佳分辨率。%T决定凝胶的相对孔径大小,%T越高,平均孔径越小。
本品为含40%(w/v)Acryl/Bis的水溶液,两者之间的比例为29:1,适合蛋白和核酸分离。
储存条件:4℃,避光
pUM19-T Vector TA克隆载体批发关键词:SY0022,pUM19-T Vector TA克隆载体,百奥莱博
·30ml重力层析空柱
编号:SY0408
英文名称:Gravity Chromatography Columns
规格:1套
百奥莱博提供的重力层析空柱,适用于多种亲和层析介质的装填,以便于后续相应蛋白的纯化。本品为30ml 重力层析空柱,总装填体积30ml。
储存条件:室温
·NRSF-Luc荧光素酶报告基因质粒
编号:SY0135
英文名称:NRSF Luciferase Reporter Plasmid
规格:1μg
NRSF-Luc荧光素酶报告基因质粒(NRSF luciferase reporter plasmid)是用于检测NRSF转录活性水平为目的的报告基因。NRSF(Neuron-Restrictive Silencer Factor)又被称作REST(RE1-Silencing Transcription factor)主要是在非神经元细胞中阻遏某些神经性基因的表达。随着研究的深入,发现NRSF-REST在神经发育过程中有着复杂的调控功能。
NRSF-Luc荧光素酶报告基因质粒主要应用于Neuron Silencing Factor信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。
pGMNRSF-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个NRSF结合位点,可以高灵敏度地检测NRSF的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得NRSF报告基因质粒更易于转染。
质粒图谱

使用说明
pGMNRSF-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
pUM19-T Vector TA克隆载体批发关键词:SY0022,pUM19-T Vector TA克隆载体,百奥莱博
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北京百莱博科技有限公司是克隆与表达产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购pUM19-T Vector TA克隆载体批发。
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