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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
921
- 英文名:
SuperPure RNA Extraction Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温(15~30℃)
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")WE0192型超纯RNA提取试剂盒(国产,进口),我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:WE0192型超纯RNA提取试剂盒(国产,进口)
规格:50次|200次
英文名:SuperPure RNA Extraction Kit
编号:WE0192
产地:国产|进口
本试剂盒是基于TRIzon改进后的柱式总RNA提取试剂盒,裂解液充分裂解并匀质化样本,采用独特的硅基质膜吸附技术,通过离心吸附柱在高盐状态下高效专一的结合溶液中的RNA,同时最大限度的有效除去蛋白质、无机盐离子及有机杂质等;可从动物组织、植物材料、各种微生物及培养细胞等样品中快速提取总RNA,每次可处理 30-50 mg组织或5×106细胞,可同时处理多个不同样品。本试剂盒提取得到的RNA可直接应用于RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| TRIzon Reagent | 60ml |
| Buffer RW1 | 40ml |
| Buffer RW2(浓缩液) | 11ml |
| RNase-Free Water | 10ml |
| 吸附柱RM及收集管 | 50套 |
| RNase-Free离心管(1.5ml) | 50个 |
保存条件:TRIzon Reagent 2~8℃避光保存,其他组分室温(15~30℃)。
自备试剂:*仿(新开封或提取RNA专用)、70%乙醇(无RNase水配制)、无水乙醇。
产品特点:
1、纯度高:最大限度除去蛋白质等杂质,提取的RNA可直接用于下游各种实验。
2、提取量大:独特的裂解液配方,充分裂解细胞或组织,RNA提取量多至100μg。
3、快速:步骤少,操作简单,节省时间。
4、兼容性强:适用于多种动植物组织和细胞RNA的提取。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、预防RNase污染,应注意以下几方面:
1)使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
2)玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5 M的NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。
3)配制溶液应使用无RNase的水。
4)操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
2、样品应避免反复冻融,否则影响RNA提取得率和质量。
3、使用前若发现TRIzon Reagent有沉淀,可置于56℃水浴几分钟,即可溶解。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer RW2中加入无水乙醇。
5、所有离心步骤若无特殊说明均在室温下进行,且所有操作步骤动作要迅速。
6、若下游实验对DNA非常敏感,建议用不含RNase的DNase I(货号:WE0213S)对RNA进行处理。
操作步骤:
1、样品处理
①植物组织:取新鲜植物组织在液氮中充分研磨或将植物组织剪碎后直接在TRIzon Reagent中迅速研磨,每30-50 mg组织加入1ml TRIzon Reagent,混匀。
注意:样品体积一般不要超过TRIzon Reagent体积的10%。
②动物组织:取新鲜或-70℃冻存的动物组织尽量剪碎,每30-50 mg组织加入1ml TRIzon Reagent,匀浆仪进行匀浆处理。或在液氮中研磨后加入TRIzon Reagent 1ml混匀。
注意:样品体积一般不要超过TRIzon Reagent体积的10%。
③单层培养细胞:吸去培养液,可直接在培养板中加入适量TRIzon Reagent(每10cm2 面积需要1ml TRIzon Reagent),用取样器反复吹打使细胞裂解。也可用胰蛋白酶处理后,将细胞溶液转移至RNase-Free的离心管中,300×g离心5 min,收集细胞沉淀,仔细吸除所有上清,加入TRIzon Reagent 1ml混匀。
注意:
1)收集细胞数量不要超过1×107。
2)TRIzon Reagent加量根据培养板面积决定,不是由细胞数决定。如果TRIzon Reagent加量不足,可能导致提取的RNA中有DNA污染。
3)收集细胞时一定要将细胞培养液去除干净,否则会导致裂解不完全,造成RNA的产量降低。
④细胞悬液:离心收集细胞。每5×106-1×107动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加入1ml TRIzon Reagent。
注意:
1)加入TRIzon Reagent前不要洗涤细胞,以免RNA降解。
2)一些酵母和细菌细胞可能需要匀浆仪或液氮研磨处理。
⑤血液处理:直接取新鲜的血液,加入3倍体积的TRIzon Reagent(推荐0.25ml全血加入0.75ml TRIzon Reagent),充分振荡混匀。
⑥可选步骤:对于蛋白、脂肪、多糖或胞外物质含量高的样品,如肌肉组织、脂肪组织或植物的块茎,可以在匀浆处理后4℃,12000rpm(~~13400×g)离心10分钟以除去不溶物质,此时沉淀中含胞外物质、多糖和高分子量的DNA,而RNA存在于上清中。
2、样品中加入TRIzon Reagent后反复吹打几次,使样本充分裂解。室温放置5分钟,使蛋白核酸复合物完全分离。
3、以每1ml TRIzon Reagent加入200μl*仿的比例加入*仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置2分钟。
4、4℃ 12000rpm(~~13400×g)离心10分钟,此时样品分为三层:红色有机相,中间层和上层无色水相,RNA主要在上层水相中,将上层水相移到一个新的RNase-Free离心管(自备)中。
5、在得到的水相溶液中加入等体积的70%乙醇(无RNase水配制),颠倒混匀。
6、将上步所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱中。若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入700μl Buffer RW1,12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
9、重复步骤8。
10、12000rpm离心2 分钟,倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟,彻底晾干。
注意:这一步目的是将吸附柱中残余乙醇去除,乙醇残留会影响后续酶促反应(酶切、PCR等)。
11、将吸附柱置于一个新的无RNase离心管中,向吸附柱的中间部位加入30-50μl RNase-Free Water,室温放置1分钟,12000rpm离心1分钟,收集RNA溶液,-70℃保存RNA,防止降解。
注意:
1)RNase-Free Wate体积不应小于30μl,体积过小影响回收率。
2)如果要提高RNA的产量,可用30-50μl新的RNase-Free Water重复步骤11。
3)如果要提高RNA浓度,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,重复步骤11。
储存条件:室温(15~30℃)。
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WE0192型超纯RNA提取试剂盒(国产,进口)关键词:超纯RNA提取试剂盒,SuperPure RNA Extraction Kit,WE0192
·蛋白酶抑制剂混合物
编号:WE0259
英文名称:Protease Inhibitor Cocktail(100×)
规格:1ml
本品为蛋白酶抑制剂的混合物,使用时取出实验所需蛋白抽提试剂进行预冷,按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail(例如990μl抽提试剂中加入10μl Protease Inhibitor Cocktail),使其在抽提试剂中成1×工作液。
注意事项:
1.蛋白酶抑制剂严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。
2.操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
储存条件:-20℃
·生物素标记驴抗小鼠IgG(H+L)
编号:WE0361
英文名称:Donkey Anti-Mouse IgG, Biotin Conjugated
规格:100μl
本产品为生物素标记的经亲和纯化的驴抗体,特异识别小鼠IgG重链和轻链,检测灵敏度高,本底低。生物素与链霉亲和素具有极高的亲和力,反应呈高度专一性。每个链霉亲和素分子具有4个生物素分子结合位点,因此,链霉亲和素可同时以多价形式结合生物素。生物素化的抗体与辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记的链霉亲和素联合使用,将检测信号级联放大,最后通过显色反应或化学发光可检测到微量蛋白。
免疫原:小鼠IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
应用范围:
WB 酶标链霉素检测(1:20000-400000)
ELISA(1:20000-400000)
Enzyme Immunohisto/cytochemistry(1:500-5000)
Flow cytometry(1:200-1000)
Fluorescence Immunohisto/cytochemistry(1:200-1000)
WE0192型超纯RNA提取试剂盒(国产,进口)关键词:超纯RNA提取试剂盒,SuperPure RNA Extraction Kit,WE0192
·RRX标记驴抗大鼠IgG(H+L)
编号:WE0369
英文名称:Donkey Anti-Rat IgG, Rhodamine Red-X Conjugated
规格:100μl
本产品为RRX标记的经抗原亲和纯化的驴抗体,特异识别大鼠IgG重链和轻链,检测灵敏度高,本底低。Rhodamine Red-X(RRX)是近年新开发的一种荧光素,被激发后产生较明亮的红色荧光。它比普通的荧光更加明亮,更加不容易淬灭,且背景更低。由于其发射波长介于Cy2(或FITC)和Cy5中间,且重叠较少,RRX可与Cy2和Cy5一起用于同一样本的多重标记检测。
免疫原:大鼠IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
荧光团:Rhodamine Red-X,Amax=570; Emax=590
应用范围:对于大多数实验(1:50-200)
·人基因组DNA定量试剂盒
编号:WE0230
英文名称:Human Genomic DNA Quantification Kit
规格:1ml|5ml
本产品是采用探针法进行实时荧光定量PCR(qPCR),实现对从各种样品(石蜡样本、流式分选的细胞、血清或血浆样本及少量临床样本等)中抽提的DNA进行浓度和质量的准确检测。产品提供了qPCR过程中所需的全*(代"套")试剂,包括反应混合液,引物混合物,标准品,只需添加提取好的DNA即可开始实验,操作简单方便、省时省力。反应混合物使用了高效、快速的热启动BaldStar Taq DNA Polymerase,扩增灵敏度高,特异性好,缩短了程序反应的时间。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器:Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-radiCyler iQ,iQ5,CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器:ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System, QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system, Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器:ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购WE0192型超纯RNA提取试剂盒(国产,进口)。
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1、【仪器名称】:进口代谢笼。 2、【仪器型号】:2602动物器具。 3、【生产厂家】:意大利TECNIPLAST公司。 4、【检测适用范围】:完全地分离粪便和尿液,尿液不会被污染。 5、【仪器使用优点、缺点】:独特的漏斗和锥形体设计保证了粪便和尿液的分离收集,尿液不会被污染
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









