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北京2×富含GC PCR MasterMix厂家

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  • 百奥莱博
  • 北京
  • 2025年07月11日
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      608

    • 英文名

      2×GC-rich PCR MasterMix

    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃,避免反复冻融

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专业生产供应北京2×富含GC PCR MasterMix厂家,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。


    名称:北京2×富含GC PCR MasterMix厂家
    规格:1ml
    英文名:2×GC-rich PCR MasterMix
    品牌:百奥莱博
    产地:国产|进口
    编号:WE0116
      本品是由Bes Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×。预配好的PCR混合液使操作更加简单快捷,可最大限度地减少人为误差和污染。经过优化的缓冲液配方使酶的作用发挥最大功效,实现对复杂模板的高保真、高效率扩增,独创的MasterMix配方使整个反应体系非常稳定,重复性好。本品不含染料,PCR程序结束后可根据需要加入适量上样缓冲液后进行电泳操作。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。主要适用于对保真性要求较高的PCR反应和结构复杂的模板如GC含量高,有二级结构等的扩增,对简单模板有效扩增的片段可达20kb,对复杂模板可达10kb。

    产品组成

     
    组份 1ml
    2×GC-Rich PCR MasterMix 1ml
    ddH2O 1ml

    注意:2×GC-Rich PCR MasterMix含有Bes Taq DNA Polymerase,3 mM MgCl2 和400μM each dNTP。

    质量控制
    1、经检验无外源核酸酶活性;
    2、PCR方法检测无宿主残余DNA;
    3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因。

    使用方法
    以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

    1、PCR反应体系
    试剂 50μl反应体系 终浓度
    2×GC-Rich PCR MasterMix 25μl
    Forward Primer,10μM 2μl 0.4μM
    Reverse Primer,10μM 2μl 0.4μM
    Template DNA <0.5μg <0.5μg/50μl
    ddH2O up to 50μl  

    注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。

    2、PCR反应条件
    步骤 温度 时间 循环数
    预变性 94℃ 2 min  
    变性 94℃ 30 s 25-35 个循环
    退火 55-65℃ 30 s
    延伸 72℃ 30 s
    终延伸 72℃ 2 min  

    注意:
    1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
    2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,Bes Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
    3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

    储存条件:-20℃,避免反复冻融。

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    北京2×富含GC PCR MasterMix厂家关键词:WE0116,2×富含GC PCR MasterMix,2×GC-rich PCR MasterMix

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