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363
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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2~8℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品,包括北京现货禽流感病毒N1亚型荧光PCR检测试剂盒(AIV-N1)哪里买在内的动物疫病PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品,欢迎选购。
名称:北京现货禽流感病毒N1亚型荧光PCR检测试剂盒(AIV-N1)哪里买
等级:科研试剂
产地:国产|进口
编号:SYA328
品牌:百奥莱博
规格:48次/盒|96次/盒
北京现货禽流感病毒N1亚型荧光PCR检测试剂盒(AIV-N1)哪里买极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·志贺氏菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA003
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for Shigella
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
志贺氏菌属(Shigella)是一类革兰氏阴性杆菌,是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌,通称痢疾杆菌。人类及其它动物对志贺氏菌易感,10-200个细菌即可致病。本方法为荧光PCR检测方法,反应在同一管内进行,操作简单,并有效防止了污染,能对样品中或预培养液中的志贺氏菌进行快速检测,具有特异性高、敏感性强和操作简便的特点。志贺氏菌的探针报告基团为FAM,淬灭基团为None。
二、用途:
该试剂盒适合于增菌培养物、疑似病料及食品中志贺氏菌的检测。
三、试剂盒组成:(50T/Kit)
组份 数量 规格
志贺氏菌荧光qPCR反应液(Shig-qPCR MIX) 1管 750μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(Shig-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-18℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与DNA提取
6.1 样品的采集
6.1.1 食品样品:样品采集与预培养参照《中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准食品微生物学检验志贺氏菌检验(GB 4789.5-2012)》要求进行。
6.1.2 粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
6.1.3 病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
注:上述样品建议经过增菌后,收集培养物用于检测。
6.2 DNA提取(用户可根据需要选择商业化DNA提取试剂盒)
6.2.1 培养物:取培养物50μL(培养至一定浊度)或者挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min,取上清5μL进行PCR反应。
6.2.2 粪便样品:挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中,加入0.5mL生理盐水,振荡混匀,13000rpm离心3分钟,弃上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
6.2.3 其他液体标本:取标本2-3mL,13000rpm离心3min,弃上清,沉淀中加入50μl DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qPCR反应液(Shig-qPCR MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(Shig-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(Shig-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明Shig核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明Shig核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行Shig qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明Shig核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
北京现货禽流感病毒N1亚型荧光PCR检测试剂盒(AIV-N1)哪里买关键词:百奥莱博,禽流感病毒N1亚型荧光PCR检测试剂盒(AIV-N1),SYA328
·口蹄疫(FMDV)通用型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA500
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·鹅源性成分单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA299
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·鼻疽伯克霍尔德菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA800
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
本试剂盒适用于检测血液、痰、脑脊液、尿、浓性渗出物等样品中的鼻疽伯克霍尔德菌(BP),用于鼻疽伯克霍尔德菌(BP)的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
本试剂盒用一对鼻疽伯克霍尔德菌特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对鼻疽伯克霍尔德菌进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
试剂盒组成:
| 组份 | 数量 | 规格 |
| BP反应液(BP-qPCR MIX) | 1管 | 672μL/管 |
| DNA抽提液(DNA Extraction) | 2管 | 1.5mL/管 |
| 酶混合物(Enzymes MIX) | 1管 | 48μL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
| BP阳性对照(BP-PTC) | 1管 | 50μL/管 |
储存条件:-20℃以下,有效期6个月。
使用方法:
一、样品采集:取抗血液、痰、脑脊液、尿、浓性渗出物。
二、DNA提取:
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入50uL核酸提取液,100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
三、检测步骤:
1.试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BP-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| 荧光PCR反应液 | 14µL | N×14µL |
| 酶液 | 1µL | N×1µL |
| 总量 | 15µL | N×15µL |
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(BP-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
2.qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
| 1循环 | 50℃ for 2 min预变性 | 1循环 | 95℃ for 10 minPCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec |
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX 参比荧光。
四、结果分析:
1.结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
2.试验成立判定
➤阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照(BP-PTC):均产生扩增曲线。
➤以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
3.结果判定
➤在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明鼻疽伯克霍尔德菌核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明鼻疽伯克霍尔德菌核酸阴性。
➤如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行鼻疽伯克霍尔德菌qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明鼻疽伯克霍尔德菌核酸阳性;否则判为样本阴性。
五、注意事项:
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
北京现货禽流感病毒N1亚型荧光PCR检测试剂盒(AIV-N1)哪里买关键词:百奥莱博,禽流感病毒N1亚型荧光PCR检测试剂盒(AIV-N1),SYA328
·禽流感病毒H7N9(AIV- H7N9)双重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA524
等级:科研实验专用
规格:10次/盒|48次/盒
·RoundupReady®转基因抗除草剂大豆特异性基因单重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA278
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·恶性疟原虫单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA123
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对恶性疟原虫特异性引物,结合一条特异性荧光探针,用荧光PCR 探针技术进行恶性疟原虫的检测。
二、用途:
本试剂盒可用于恶性疟原虫检测鉴定及突发公共卫生事件的处置,还可用于恶性疟原虫的环境监测、卫生检疫及感染的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(48T)
| 组份 | 数量 | 规格 |
| 恶性疟原虫荧光PCR反应液(qPCR MIX) | 1管 | 672μL/管 |
| DNA抽提液(DNA Extraction) | 2管 | 1.5mL/管 |
| 酶混合物(DNA Polymerase MIX) | 1管 | 48μL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
| 恶性疟原虫阳性对照(PTC) | 1管 | 50μL/管 |
四、荧光PCR 仪器适用范围
ABI 系列,Bio-Rad 系列,Roche 系列等荧光定量PCR 检测仪等。
五、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃保存,避免反复冻融,有效期为6个月。
六、实验操作步骤
6.1 标本采集
血液:用一次性无菌5ml 注射器抽取疑似人或动物血3-5ml,置于枸橼酸*或EDTA2Na 抗凝管中,摇匀送检。
肺脏等组织:取上述组织1g左右,置于1.5ml洁净EP管中送检。
乳液、体液等标本:取相应标本3-5ml,转至1.5ml洁净EP管中送检。
6.2 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
血液样本:直接取200μl 抗凝血,转至一洁净的1.5ml 离心管中,加入1ml 双蒸水,剧烈震荡30s,8000rpm 离心5min,弃上清,至无明显红色沉淀。(若沉淀明显,请再重复上述步骤一次)。加入1ml生理盐水,剧烈震荡15s,13000rpm 离心5min,弃上清。沉淀加入50μl 核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀)并与沉淀混匀,100℃恒温10min,13000rpm 离心3min,取上清4μl 进行PCR 反应。
肺、淋巴结等固体组织:剪取约0.1g 组织,用生理盐水洗去血污,剪碎加入0.5mL TE 转移到匀浆器中匀浆。将匀浆液50μl 转移到1.5mL 离心管中,加入50μl 核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀)并与沉淀混匀,100℃恒温10min,13000rpm 离心3min,取上清4μl 进行PCR 反应。
乳液等液体标本:取标本2-3mL,13000rpm 离心3min,弃上清,沉淀加入50μl 核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀)并与沉淀混匀,100℃恒温10min,13000rpm 离心3min,取上清4μl进行PCR 反应。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5μL 加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 PCR 扩增
从试剂盒中取出荧光PCR 反应液(恶性疟原虫-qPCR MIX)、酶混合物(DNA Polymerase MIX),室温融化并振荡混匀后,10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| 荧光PCR反应液 | 14µL | N×14µL |
| 酶混合液 | 1µL | N×1µL |
| 总量 | 15µL | N×15µL |
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm 离心10s,向设定的N 个PCR 反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(PTC)5μL,10000rpm 瞬时离心10 秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
| 1循环 | 50℃ for 2 min | |
| 预变性 | 1循环 | 95℃ for 10 min |
| PCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec |
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
阳性对照(PTC):均产生扩增曲线。
以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明恶性疟原虫核酸阳性。
Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明恶性疟原虫核酸阴性。
如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行恶性疟原虫real time PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明恶性疟原虫核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA 酶。
(3)PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
北京百莱博科技有限公司专业生产动物疫病PCR检测试剂盒产品,欢迎来电咨询选购北京现货禽流感病毒N1亚型荧光PCR检测试剂盒(AIV-N1)哪里买。
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文献和实验厦门大学 香港大学 北京万泰生物药业有限公司 联合研制出 目前, 由 H5N1 亚型禽流感病毒引发的高致病性禽流感正在世界各地不断蔓延 ,今年 1 月以来已先后在越南、柬埔寨、日本、菲律宾、泰国、印度尼西亚、俄罗斯、哈萨克斯坦、罗马尼亚、克罗地亚、希腊、英国、土耳其、哥伦比亚等国家流行,爆发区域涉及亚、欧、美洲,尤其是亚洲首当其冲,因感染该病毒而造成的死亡人数不断攀升。根据世界
、H3、H5、H7和H9等各亚型毒株,对野生型的人H5N1病毒则有更高的生产效率[15]。其工艺流程:复苏细胞库的Vero细胞,经方瓶和转瓶扩增种子细胞,接种至生物反应器中,经过反应器逐级放大至6000L反应器,控制细胞密度在2×106~3×106/mL,按一定的病毒感染复数(Multiplicity of infection,MOI)接种病毒,病毒吸附lh后加入胰酶,32~35℃孵育48~72 h后收获病毒液。 2.2 国内应用现状 国内禽流感疫苗或流感疫苗的生产工艺均采用鸡胚生产
等,经过数日的科技攻关,终于确诊了候鸟的死亡系H5N1亚型禽流感病毒感染所致。 由于过去没有发现过候鸟禽流感疫情,刘金华等的发现加剧了对世界禽流感防控形势恶化的担忧。因为候鸟一旦感染病毒,不可能处以像家禽一样被简单扑杀的方式。科学家们担心,当迁徙季节到来,病毒可能随着鸟类的迁徙,飞出亚洲,越过喜马拉雅山脉,经过印度、澳大利亚、新西兰等地,最后传遍全球。 “候鸟禽流感的发生预示禽流感不再是某个区域或国家的问题,而将是一个世界各国政府必须要共同关注的问题。”刘金华更为关心自己研究
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