副溶血性弧菌耐热相关溶血素荧光PCR检测试剂盒(TRH)报价

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

副溶血性弧菌耐热相关溶血素荧光PCR检测试剂盒(TRH)报价是高品质的细菌PCR检测试剂盒产品，由北京百奥莱博供应，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多副溶血性弧菌耐热相关溶血素荧光PCR检测试剂盒(TRH)等细菌PCR检测试剂盒产品请联*(代"系")我司咨询订购。

北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应副溶血性弧菌耐热相关溶血素荧光PCR检测试剂盒(TRH)报价，产品信息：

类别：细菌PCR检测试剂盒

产品名	产品编号	等级含量	包装规格
副溶血性弧菌耐热相关溶血素荧光PCR检测试剂盒(TRH)	SYA072	科研试剂	48次/盒

等级：科研试剂

编号：SYA072

品牌：百奥莱博

规格：48次/盒

产地：国产|进口

一、简介：

本试剂盒用一对副溶血性弧菌耐热相关溶血素特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对副溶血性弧菌耐热相关溶血素的核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

 

二、用途：

该试剂盒适用于检测水样粪便、疑似污染的水、食物等样本中的副溶血性弧菌耐热相关溶血素(TRH)，用于副溶血性弧菌耐热相关溶血素(TRH)感染的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

 

三、试剂盒组成：(48T)

 

组份	数量	规格
TRH反应液(TRH-qPCR MIX)	1管	672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction)	2管	1.5mL/管
酶混合物(Enzymes MIX)	1管	48μL/管
阴性对照(NTC)	1管	50μL/管
TRH阳性对照(TRH -PTC)	1管	50μL/管

 

四、荧光PCR 仪器适用范围

ABI 系列、MJ 系列、Roche 系列，博日系列及其他荧光定量PCR 检测仪。

 

五、储存条件及有效期：

本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6 个月。

 

六、样品采集、前处理与DNA 提取

6.1 样品采集

水样便取0.5-1 mL；疑似污染的食物取1g。

6.2 样本前处理：

水样便13000rpm离心2min，去尽上清；疑似污染的食物用手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨，加入1.5mL生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中；疑似污染的水直接取100μL。

6.3 DNA提取

可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的(DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)，并按照相应试剂盒说明进行操作。

对上述处理好的样本加入50uL核酸提取液，100℃恒温处理10min，13000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5mL EP管，-20℃保存；

 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5μL加入到反应体系中即可。

由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

 

七、检测步骤：

7.1 试剂的准备

从试剂盒中取出荧光PCR 反应液(TRH-qPCR MIX)、酶混合液(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm 离心10s。

设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

 

试剂	每个反应加入的量	N个反应加入的量
荧光PCR反应液	14µL	N×14µL
酶混合液	1µL	N×1µL
总量	15µL	N×15µL

计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N 个PCR 反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(TRH-PTC)5μL，10000rpm 瞬时离心10秒。

7.2 qPCR反应条件

将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件：

 

	1循环	50℃ for 2 min
预变性	1循环	95℃ for 10 min
PCR扩增	40循环	95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec

在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

 

八、结果分析：

8.1 结果分析条件设定

直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。

8.2 试验成立判定

(1)阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。

(2)阳性对照(TRH-PTC)：均产生扩增曲线。

(3)以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。

8.3 结果判定

(1)在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明副溶血性弧菌耐热相关溶血素核酸阳性。

(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明副溶血性弧菌耐热相关溶血素核酸阴性。

(3)如果Ct值>35，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。

(4)对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行副溶血性弧菌耐热相关溶血素qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明副溶血性弧菌耐热相关溶血素核酸阳性；否则判为样本阴性。

 

九、注意事项：

(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。

(2)所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA 酶。

(3)PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等)，防止实验室污染。

(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。

(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

副溶血性弧菌耐热相关溶血素荧光PCR检测试剂盒(TRH)报价专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

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