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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
人急性单核细胞白血病细胞;THP-1
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 库存:
32
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
低温冷藏
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
单核细胞
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 规格:
株
冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
细胞名称 人急性单核细胞白血病细胞;THP-1使用说明书
形态特性 单核细胞
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞对乳汁珠和激活的红细胞有吞噬作用,无表面和胞质免疫球蛋白。 可以用佛波醇 TPA诱导单核细胞分化。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 优质胎牛血清,10%;0.05mM β-巯基乙醇
传代方法 1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
人急性单核细胞白血病细胞;THP-1使用说明书复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
人急性单核细胞白血病细胞;THP-1使用说明书质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。
细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
对细胞的真实性,支持客户鉴定STR或者基因突变测序数据,如证明细胞错误,全额退款。
人急性单核细胞白血病细胞;THP-1使用说明书产品形式:
公司提供2种形式的产品:
第一种是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,-80C也不是细胞储存的最好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;运费电询(顺丰)。
第二种是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,运费电询(顺丰)。
默认是发第二种,如果想要第一种,请事先告知。
人急性单核细胞白血病细胞;THP-1使用说明书购买流程 :
1. 客户确定订购;
2. 公司将合同发给客户签字(电子版或者纸质版),同时快递发票给客户;
3. 由客户报销费用到公司账户;
4. 报账过程中,我公司将复苏细胞,做QC;
5. QC通过,同时费用到账,即可发货给客户(顺丰)。
2-Naphthylthioureaβ-奈硫脲500克CP,97%
120-51-4本苄酯Benzyl Benzoate;Benzyl benzene carboxylate;Benzyl pxenyl forMate
4-硝基本-N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷,英文名或英文缩写:PNP-Nag,级别:超纯,80%,规格:1公斤
3,4-二拂本晴, 98% 3,4-Difluorobqnzonitnilq 6448-6-0
NZMBROTHNZM 肉汤, 粉末生物技术级粉末RT不sigma
pxenOL-FREETOTALRNAPURIFICATIONKIT无酚总RNA提取试剂RTsigma
58880-19-6曲古柳菌素A ≥98% (HPLC)TRICHOSTATIN A
3-Iodothiopxene-2-carboxylic acid 60166-84-9
乙酸乙酯 Ethyl chloroacetate,99% 105-39-5 100ML 通用试剂
烟酰安 NiccincMidq;VitcMin B3;NiccincMidq;Nicotinic ccid cMidq;3-Pyridinqccrboxylic ccid cMidq 98-9-0
盐酸25克
D 5g/25g/100g原装 Sigma C7252
六甲基嶙酰三胺shēng huà shì jì容量:2~8℃5克
顺铂 Cisplctin 1
环丁安 Cyclobutylcminq 216-34-9
S100A1 Others Human 人 S100A1 人细胞裂解液 (阳性对照)
T-104BII型胶原酶(含100mL酶解缓冲液)10mL
CSF2 Others Rat 大鼠 GM-CSF / CSF2 人细胞裂解液 (阳性对照)
TE 354.T细胞,人皮肤基底细胞癌 人胚肾细胞,AAV-293细胞 原代单核细胞培养特制添加剂Many types of cells包装:5/2.5/1ml
盘羊皮肤细胞;ASHS3
星形细胞生长添加物AGS
CL-0168Neuro-2a/N2a(小鼠脑神经瘤细胞)5×106cells/瓶×2
GSK3B Others Human 人 GSK3B 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人视网膜色素上皮细胞裂解物HRPEpiCL
NCI-H1755[H1755]细胞,人肺癌细胞 人胚肺成纤维细胞,HELF细胞 卵巢上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
兔主动脉平滑肌细胞;SMC
TIMP2 Others Human 人 TIMP2 / TIMP-2 人细胞裂解液 (阳性对照)
人急性单核细胞白血病细胞;THP-1使用说明书kasumi-1, 人白血病细胞株
人肺微血管内皮细胞完全培养基 100mL
人肺大动脉内皮细胞完全培养基 100mL
人肺大动脉平滑肌细胞完全培养基 100mL
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文献和实验称为原代细胞培养,适合用腺病毒感染。由于细胞增长缓慢,病毒感染效率较低,因此需要进行 MOI 梯度摸索实验,选择适合的 MOI 进行实验,从而提高病毒感染效率(MOI 摸索实验参考第一部分第四小节)。 原代细胞培养和感染注意事项: 1、由于原代细胞增长缓慢,使用腺病毒感染,可以在接种时提高汇合度到 50-60% 左右,确保在感染后 2 天时细胞汇合度达到 90~100%。感染非分裂细胞如神经元细胞,接种后不再增殖,可按照 100% 的汇合度进行接种。 2、若使用慢病毒感染原代细胞,建议接种时细胞
网到高尔基体)或 Monensin(抑制高尔基体内的蛋白运输)来处理细胞,无法达到富集胞内 IL-1β 的目的。研究显示,它的分泌借助了如下方式(图 3):A)外泌体的胞吐作用;B)分泌性溶酶体的胞吐作用;C)质膜上微泡的脱落; D)借助质膜上的特殊转运体。图 3. IL-1β 分泌的可能机制概览如下图中结果显示,活化的 IL-1β 信号绝大部分在经过刺激处理的 THP-1 细胞培养基组中,而不是细胞裂解物组里面。图 4. 刺激 THP-1 细胞检测活化的 IL-1β 表达要点:因此若想检测培养细胞
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检测,投入 50ng 人基因组 DNA ,各取 1μl 转座子进行 DNA 片段化(10 min),扩增后使用 2% 琼脂糖凝胶电泳检测产量以及分布情况。 图 5.转座子活性检测结果图 结果显示:Vazyme pA-Tn5 融合酶切割 DNA 活性很高,文库产量显著高于 N* 公司同类产品。 B、活细胞 CUT&Tag 实验 投入 10,000 个 HEK293 细胞,分别使用 Vazyme #TD902 与 N* 公司同类产品,按照各自说明书推荐的反应体系进行 CUT&Tag
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