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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
Cas9稳定表达的人胰腺癌细胞;PANC-1-Cas9-554
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 库存:
24
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
低温冷藏
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
上皮样;多角形
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 规格:
株
形态特性 上皮样;多角形
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo,经400ug/mlG418筛选得到的单克隆,经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白,可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;400ug/ml G418
传代方法 1:2~1:4传代;每周2~3次。
传代情况 C3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:10,12;D12S391:22,22;D13S317:11,11;D16S539:11,11;D18S51:12,12;D19S433:11,16;D21S11:28,28;D2S1338:23,24;D3S1358:17,17;D5S818:11,13;D6S1043:11,12;D7S820:8,10;D8S1179:14,15;FGA:21,21;;Penta E:7,14;TH01:7,8;TPOX:8,11;vWA:15,15;
同工酶
染色体
使用权限 A类
Cas9稳定表达的人胰腺癌细胞;PANC-1-Cas9-554使用说明书步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
Cas9稳定表达的人胰腺癌细胞;PANC-1-Cas9-554使用说明书注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
2'-DEOXYGUANOSINEMONOHYDRATE2'-脱氧鸟苷超纯级白色结晶粉末RTsigma
119-42-6邻环己酚2-CYCLOHEXYLpxenOL
etxyl 3-aminothiopxene-2-carboxylate 31823-64-0
乙基三苯基化膦 Ethyltriphenylphosphonium iodide,≥95% 4736-60-1 25G 表面活性剂
Tetraheptylammoniumbromide溴化四庚1克4N,99.8%
BPLS琼脂25克RT
298-46-4卡马西平CarbaMazepine
Dimetxyl-2,5-thiopxenedicarboxylate 4282-34-2
乙酸异辛酯 2-Ethylhexyl acetate,≥99% 103-09-3 500ML 通用试剂
美洛西林内 Mqzlocillin wo7ium 4027--7
盐酸吖啶,英文名或英文缩写:Acridine xy7nochloride,级别:AR,99%,规格:1克
盐酸环丙扶哌酸,英文名或英文缩写:Ciprofloxacin xy7nochloride,级别:BR,500u/mg,规格:5克
2-亚基生物素 2-Iminobiotin,≥98% 13395-35-2 25MG 通用试剂
化 Mercury(II) chloride (99.999% trace me... 7487-94-7 5G 通用试剂
HUVEC-c 单一来源的人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 500,000cells 表皮角化细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
真皮成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
EDAR Others Cynomolgus 食蟹猴 EDAR 人细胞裂解液 (阳性对照)
Calu-3细胞,人肺腺癌细胞(胸膜渗出液) 大鼠肝星形细胞,CFSC-8B细胞 CM-M089小鼠皮肤肥大细胞完全培养基100mL
SiHa(人子宫颈鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2
叙利亚仓鼠细胞系;Syrian Hamster AV12
CL-0152MDA-MB-453(人癌细胞)5×106cells/瓶×2
F10 Others Human 人 Coagulation Factor X / FX / F10 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人滑膜细胞裂解物HSL
NCI-H838[H838]细胞,人肺癌细胞 人肺腺癌细胞,A2细胞 脑静脉血管内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
兔角膜后基质层成纤维细胞;RCBBF
HAVCR2 Others Human 人 TIMD3 / TIM3 / HAVCR2 人细胞裂解液 (阳性对照)
Cas9稳定表达的人胰腺癌细胞;PANC-1-Cas9-554使用说明书A-375 [A375], 人恶性黑素瘤细胞株
A549/DDP, 人肺腺癌耐药细胞株
SP2/0, 小鼠骨髓瘤细胞
WM35, 人黑色素瘤细胞
购买Cas9稳定表达的人胰腺癌细胞;PANC-1-Cas9-554使用说明书注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件;建议直接购买提供的完全培养基。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
Cas9稳定表达的人胰腺癌细胞;PANC-1-Cas9-554使用说明书现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,同时我司为您提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明,欢迎前来选购!
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CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 293FT 细胞转染验证 and trouble shooting
前期记录CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 确定目标基因CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 目标基因背景调查CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- sgRNA 及引物设计CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 构建 sgRNA+Cas9 载体golden gate 构建好载体,酶切验证成功293FT 细胞转染验证1. sgRNA+pSpCas9 载体用 lipofectamine 3000 转染至 293FT 细胞(按照转染试剂的说明书走),确保转染效率> 70
蛋白的复合物晶体结构,又基于晶体结构分析,设计并合成了特异性及体内安全性显著提高的雷公藤红素衍生物 19-048,证明了雷公藤红素的体内毒性,可以通过靶标发现及基于结构的化学优化而降低,同时表明,抑制 PRDX1 有望用于治疗结直肠癌。值得注意的是,本研究使用了汉恒生物提供的针对 PRDX1 的 CRISPR-Cas9 慢病毒。 下面,我们一起来看具体的研究结果: 首先,作者通过 RNA 测序得到用雷公藤红素处理后的差异表达基因,然后用 OTTER 富集雷公藤红素的氧化还原相关靶蛋白,发现雷公
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