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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
568
- 英文名:
Serum/Plasma RNA column Extraction Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")血清血浆游离RNA提取试剂盒批发,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:血清血浆游离RNA提取试剂盒批发
英文名:Serum/Plasma RNA column Extraction Kit
规格:50次
编号:BTN130978
产地:国产|进口
本试剂盒是专门用于从血清/血浆等液体样品中提取游离RNA的产品。
试剂盒特点:
1. 操作简单,整个过程只需要20分钟左右,不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
2. 灵敏度高,通过RT-PCR检测到的最终灵敏度可以达到50拷贝/mL。
3. 安全无毒,不需要使用*酚和*仿等有机溶液。
4.与RT-PCR和荧光RT-PCR兼容。
5. 价廉物美,性价比远低于国外同类产品。
6.适用于各种材料,包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。
试剂盒组成:
| 成份 | 编号 | 规格 |
| 溶液A | BTN130978A | 30mL |
| 离心吸附柱(小提) | BTN60911 | 50套 |
| 通用洗柱液 | BTN60408 | 50mL |
| RNA洗脱液 | BTN71207 | 10mL |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在1.5mL离心管中加入0.1-0.2mL血清/血浆样品。如果样品需要富集,可以将1.5mL液体在4℃下24,000 g冷冻离心60分钟,移弃1.3mL后继续操作。
2. 加入0.6mL溶液A,振荡30秒混匀后室温放置10分钟。注意:溶液A在 4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 将溶液全部转移到离心吸附柱中,室温放置2分钟。
4. 12000~15000g室温离心1分钟,弃收集管中穿透液。
5. 加入0.8mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心1分钟,弃收集管中穿透液。
6. 12000~15000g室温离心半分钟。
7.在离心吸附柱的滤膜的中部加入30-100μL通用洗脱液,然后将离心吸附柱套入一新的1.5mL离心管中,室温放置2分钟。
8. 12000~15000g室温离心1分钟,离心管中收集的样品即为RNA。
9. RNA样品可以直接用于RT-PCR或逆转录反应,也可放-80℃长期保存。注:游离的RNA一般含量极少,不宜用电泳法检测。
疑难解答
Q:提取血清血浆等液体样品/病毒核酸(RNA或DNA)为何很难?
A:原因一是量少。病毒颗粒中的RNA或DNA是作为遗传物质保存,每个病毒最多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万种RNA分子,每种RNA有很多拷贝),同时其长度也十分有限(一般不到细胞基因组的万分之一),样品中病毒数往往又不是很多,使得样品中病毒核酸的绝对量往往比一个细胞中核酸的绝对量还少,所以操作中十分容易丢失。另外,由于得到的核酸绝对量很少,不能使用电泳和测OD检测,只能通过PCR或RT-PCR检测,而PCR或RT-PCR的条件又需要优化,所以要确定提取是否成功十分不容易。
欲咨询购买血清血浆游离RNA提取试剂盒批发,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·*仿-异戊醇混合溶液
编号:BTN100804
英文名称:Chloroform-Isoamyl Alcohol
规格:250mL
本品是*仿和异戊醇的24:1混合液,主要用于处理用饱和酚抽提过的核酸或蛋白质溶液,去除其中残留的酚。
储存条件:常温运输和保存、避光。有效期一年。
疑难解答:
Q:酚抽提后一定要用*仿抽提吗?
A:是。酚跟水互溶,所以用饱和酚抽提过的水相中还有残留的酚,如果直接从中沉淀核酸,酚就会污染样品,抑制很多后续的反应。如果再用*仿抽提,则可以去除残留的酚,因为*仿非极性很强,比重大,可以把水相的酚萃取出来并且离心时使有机相(酚*仿混合物)相处于下层,方便吸取位于上面的水相(乙*(代"醚")曾经用于此目的,但比重轻,不好取水相,所以现在基本没人使用)。
Q:异戊醇的作用为何?
A:用于消除振荡中形成的泡沫。
·一站式GST标记蛋白质微量纯化套装(含溶菌酶和核酸酶)
编号:BTN111116B
英文名称:One-Stop GST-Tagged Protein Miniprep Pack(B)
规格:20次
重组蛋白N端的GST谷胱甘肽S转移酶能提高重组蛋白的水溶性,所以常用于蛋白质重组表达。GST-谷胱甘肽亲和层析是利用GST 标记的蛋白能与谷胱甘肽层析介质结合,并能被还原型谷胱甘肽洗脱的特点而建立,是目前分离纯化GST 标记蛋白质的重要方法。本产品就是专门用于上述目的,其原理如下:
产品特点:
1.一站式套装,含所需的谷胱甘肽介质、溶液和层析柱,用户只需要提供表达GST 标记蛋白的细菌(酵母、杆状病毒、培养细胞)即可,非常方便。
2.专一性强,一次过柱即可获得纯度高达95%的GST-标记蛋白。
3.只能在非变性条件下使用,只可用于纯化没形成包涵体的GST 标记蛋白。
4.每次可以处理20mL的表达菌液,适合初步筛选和鉴定。
5.提供4mL浓度为50%的谷胱甘肽-Agarose 介质,可吸附5-10mg GST 标记蛋白质。
6.本介质可以反复使用多次。
试剂盒组成:
| 成分 | 20次(A) | 20次(B) |
| 谷胱甘肽-Agarose介质,50% | 4ml | 4ml |
| 10×PBS缓冲液 | 100ml | 100ml |
| 溶液A | 1ml | 无 |
| GST洗脱缓冲液成分一 | 25ml | 25ml |
| GST洗脱缓冲液成分二 | 约80mg | 约80mg |
| 溶菌酶(20KU/mg) | 无 | 30mg |
| Benzonase(2U/μL) | 无 | 20μl |
| PMSF(10mg/mL) | 0.5ml | 0.5ml |
| 6mL层析柱(带筛板) | 1套 | 1套 |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,溶菌酶、Benzonase和PMSF 需低温运输。收到货后,介质需4℃保存,溶菌酶、Benzonase和PMSF 需-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
注意:
1.每步得到的样品最好都留存少量作为SDS-PAGE分析的对照,在下面描述中就不再提醒。
2.本实验需要用到的1×PBS缓冲液可用自备的超纯水稀释本试剂盒提供的10×PBS缓冲液而得。PBS缓冲液用超纯水稀释后极其容易长细菌,注意防止污染。
3.GST 洗脱液的配制方法是将约80mg GST 洗脱液成分二干粉全部加入到GST 洗脱液成分一溶液中,摇晃直到干粉全部溶解即得GST 洗脱液,分装成小份放-20℃保存,每次用一管。
一、重组蛋白的表达和细菌收集
1.37℃振荡培养20mL含表达质粒的细菌到OD600=0.6-0.8。
2.加IPTG 到终浓度为0.1mM,30℃振荡培养3小时或22℃振荡培养8小时(或过夜)。
3.4℃ 5000g离心10分钟收集20mL表达菌液,弃上清。
4.用1×PBS缓冲液重悬细菌沉淀,4℃ 5000g离心10分钟,弃上清。沉淀可直接用于裂解或放-80℃保存。
二、细胞裂解
5.如果用本产品A型,用1mL冰浴的新鲜配制的细胞裂解液(1mL 1×PBS缓冲液+50μl溶液A+ 25μl 10mg/mL的PMSF溶液)重悬细菌沉淀,冰上超声裂解菌体直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。超声参数需根据仪器型号自行摸索,一般选1K-10K 频率处理15次,每次20秒,间隔1分钟(必需放置在冰上)。裂解物不能粘稠,否则会堵塞层析柱。
6.如果用本产品B型,在1mL冰浴的新鲜配制的细胞裂解液(在20mL 1×PBS缓冲液中加入所有30mg 溶菌酶干粉,溶解后分装成1mL/管,取一管使用,剩余的-20℃放置)中加入25μl 10mg/mL的PMSF溶液和1μl Benzonase,用此混合液重悬细菌沉淀后冰上放置30分钟,得到细菌裂解物。
7.将超声或酶法细胞裂解物在13000 g 4℃离心10分钟去除未裂解细胞和裂解细胞碎片以防堵柱,所得上清即含可溶性GST 标记蛋白。
三、层析柱的制备和GST蛋白纯化
8.摇晃将谷胱甘肽-Agarose 介质充分混匀后,取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中(介质用量需要根据GST蛋白产量决定,100mL菌液一般使用200μL介质即可)。下列步骤各溶液的用量均针对200μL介质而定,如果介质用量不同,各溶液用量需相应调整。
9.用5mL预冷的1×PBS缓冲液洗柱。
10.将第7 步得到的上清液(含可溶性GST标记蛋白)上柱,让重力使上柱液自然流出,收集并保存穿透液用于SDS-PAGE电泳。GST和谷胱甘肽之间的结合很缓慢,所以流速一定不能快,否则结合不充分。流速一般在0.2-1mL/分钟即可。如要提高GST 标记蛋白与介质的结合效率,可用本试剂盒提供的红盖将层析柱下的漏液口堵上,让细菌裂解液和介质在4℃结合30分钟或过夜。也可以将穿透液反复上柱。
11.用0.5-2mL 1×PBS缓冲液洗柱,收集并保存穿透液(含杂蛋白)。
12.用0.2-1mL GST洗脱液洗柱,收集并保存穿透液(含GST 标记蛋白)。由于可能含蛋白酶污染,所以穿透液不能在4℃放置,需立即用于后续处理(如浓度测定或SDS-PAGE电泳)或-80℃长期放置。
13.对收集的2种穿透液和洗脱液进行蛋白定量或SDS-PAGE分析。注意:如果不预先脱盐,则只能用Bradford法或OD 检测法(1 OD280 约等于0.5mg/mL蛋白)测定穿透液和洗脱液的蛋白浓度。由于GST的分子量为26 KD,所以在SDS-PAGE胶上,GST 标记蛋白将比天然蛋白大26 KD。
附:GST柱的恢复(本试剂盒不含所需试剂)
1.用3倍体积的6M盐*(代"酸")胍处理柱子10分钟。
2.用3倍体积的超纯水处理柱子10分钟。
3.用3倍体积的缓冲液一(0.5M NaCl,0.1M Tris·HCl,pH8.5)处理柱子10分钟。
4.用3倍体积的缓冲液二(0.5M NaCl,0.1M Tris·HCl,pH4.5)处理柱子10分钟。
5.再重复3-4 步两次。
6.用3倍体积的超纯水处理柱子3次。
7.用3倍体积的1×PBS缓冲液处理柱子2次。
8.堵上漏口,加3倍体积的1×PBS缓冲液待用。若长时间不用,则第7步和第8步的1×PBS改成20%的乙醇。
血清血浆游离RNA提取试剂盒批发关键词:BTN130978,Serum/Plasma RNA column Extraction Kit,血清血浆游离RNA提取试剂盒
·Southern级血液DNA提取试剂盒
编号:BTN130931
英文名称:Blood DNA extraction kit(Southern Grade)
规格:10次
·Tris盐*(代"酸")溶液(1M,pH9.0)(不含RNase)
编号:BTN80933
英文名称:RNase-Free Tris-HCl Solution
规格:250mL
·柱式革兰氏阳性菌RNA提取试剂盒
编号:BTN130970
英文名称:Gram positive bacteria RNA Column extraction kit
规格:50次
·超快DNA-RNA两用转膜试剂盒
编号:BTN121110
英文名称:Rapid Nucleic Acid Blotting Kit
规格:5次
本试剂盒是基于毛细管转膜法的Southern和Northern印迹膜制备试剂,专门用于从电泳得到的凝胶中制备用于Southern杂交和Northern杂交的印迹膜。其操作流程如下:
产品特点:
1.即开即用,提供制备5张13×20cm大小的Southern杂交和Northern杂交印迹膜所需要的印迹膜和溶液,不需要用户单独准备。
2.快速:转膜过程只需要1小时,整个过程只需要2.5小时(对DNA)或1.5小时(对RNA)。
3.跟硝酸纤维素膜、带电尼龙膜、中性尼龙膜和PVDF膜兼容。包括Nytron、Gene Screen Plus、Zetabind、Biotrans、Hybond-N、Immobilon等。
4.A型提供硝酸纤维素膜,适用于400bp以上的靶分子,背景低。B型提供带电尼龙膜,适用于40bp以上的靶分子,结合力强。如需中性尼龙膜或PVDF膜,需另购。
5.使用优化的下向转膜法,不但效率比上行转膜法高30%左右,而且条带弥散度低、分辨率高。
可用琼脂糖胶(包括脉冲电泳胶,DNA电泳、RNA甲醛胶电泳和RNA戊二醛电泳)和DNA PAGE胶。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 660g |
| 溶液B | 100ml |
| 溶液C | 250ml |
| 硝酸纤维素膜13×20cm | 5张(仅A型提供) |
| 带电尼龙膜13×20cm | 5张(仅B型提供) |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
一:Southern印迹膜的制备
1.按常规方法进行电泳(包括脉冲电泳),本试剂盒不提供电泳所需试剂。如果进行常规的Southern杂交,建议使用0.7%琼脂糖进行电泳,分离酶切的基因组DNA。电泳时最好加电泳分子量对照、酶切对照(先将标记的全长lambda DNA或探针质粒与样品DNA的混合,再酶切)、阴性样品(不含检测片段的DNA样品)、杂交分子量对照(标记的1.lambda/Hind III)等。电泳后和荧光标尺并排拍照。
2.变性:首次使用时需配制变性液2.5L(在3L的干净玻璃烧杯中加入约2L自备的去离子水,搅拌缓慢中加入220g成分A和100mL溶液B,溶解后定容到2.5L后即可用),将凝胶转移到一个至少10倍于胶体积的变性液中,脱色摇床上室温下摇晃处理60分钟(如果使用带正电尼龙膜,此步处理可以缩短到30分钟)。未用完的变性液可放瓶中室温保存。
3.转膜:如果使用带正点的尼龙膜,则直接用上步配制的变性液转膜,如果使用中性尼龙膜和硝酸纤维素膜,则需配置转膜液(在3L的干净玻璃烧杯中加入约2L自备的去离子水,缓慢搅拌中加入440 g成分A和2mL溶液B,溶解后定容到2.5L后即可用)。将凝胶转移到至少10倍于凝胶体积的转膜液中,脱色摇床上室温下摇晃处理15分钟。
4.测量凝胶的大小,然后借助尺子准确切出一张印迹膜,每边比凝胶大1mm,并切去一角,将印迹膜漂浮于去离子水上20分钟确保全部湿润,再按下图设置下行转膜体系(比上行转膜体系效率高30%)。图中membrane即印迹膜,transfer buffer即转膜液,吸水滤纸厚度为2-3cm,一般按每cm2印迹膜需要1mL转膜液的比例准备转膜液。对大的凝胶,可以同时使用两张滤纸分别跟两个容器的转膜液连接以便使转膜匀浆。
5.转膜1小时。结束后用铅笔标记核酸结合面以免搞错。注意:不要过夜转膜,否则信号将降低50%。
6.将印迹膜在中和液中处理10分钟,中和液的用量至少为0.5mL/cm2印迹膜。
7.可将凝胶放入EB(0.5μg/mL)溶液中染色30分钟后UV下观察残留核酸的量,反推转膜效率。此步也可跳过。
8.将印迹膜夹在两层滤纸中间80℃干燥15分钟以固定核酸(不需真空),干燥时间不需延长,否则杂交信号可能会降低。
9.此时印迹膜可直接用于后续的核酸杂交实验或者在干燥状态下保存待用(可放数月)。
二:Northern印迹膜的制备
10.按常规方法进行电泳,本试剂盒不提供电泳所需试剂。本方法适用于甲醛变性胶和乙二醛变性胶,电泳后和荧光标尺并排拍照。
凝胶不需要变性和中和处理(也不能变性,否则RNA将会降解),直接进入转膜步骤(同Southern印迹膜制备的第3到第9步)。
血清血浆游离RNA提取试剂盒批发关键词:BTN130978,Serum/Plasma RNA column Extraction Kit,血清血浆游离RNA提取试剂盒
HC0144 湿盒
苏木色精 Glutaric acid 517-28-2
87-51-4 3-Indole acetic acid(IAA) 吲哚-3-乙酸
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ARB13860 猪可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)含量检测 Porcine soluble intercellular adhesion molecule-1,sicam-1 ELISA KIT
D-甘露醇 N-Methyl-D-aspartic acid 69-65-8
ARB14043 猴Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)Elisa分析 Monkey collagen type Ⅳ,col Ⅳ ELISA KIT
细胞核蛋白提取试剂盒 Nuclear Protein Extraction Kit 50T|100T
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PY04-035 *啶酮酸(II) 10mg/支×10支 每支添加于225ml胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤(TSB-YE)培养基中,用于单增李氏菌增菌肉汤(EB)的配制,也可用于李斯特氏菌的培养
ARB13378 牛流行热病毒抗体(EFV-Ab)尿液中含量检测
BL0882 兔抗山羊IgG免疫血清 0.5ml
F030606 FITC标记山羊抗小鼠IgG2a抗体 Goat Anti-Mouse IgG2a*FITC
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F030501 FITC标记小鼠抗乙肝核心抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBcAg*FITC
25249-54-1 PVPP 聚乙*(代"烯")聚吡*(代"咯")烷铜
BL0901 FITC标记羊抗小鼠IgG抗体
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