相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
相关阅读
源叶生物 十万种现货试剂速发,品质稳、品类全,实验不再等!Takara 秋促来袭,提取+反转录+定量套装仅 1200 元abinScience 体内级抗体 全年锁价 低至 ¥1200阿拉丁 22万+ 科研级产品现货速发,品质严控、科研无忧- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
Cas9稳定表达的人肺癌细胞;A549-Cas9-538
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 库存:
50
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
低温冷藏
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
上皮样;多角形
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 规格:
株
形态特性 上皮样;多角形
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞是采用慢病毒感染的方式使A549细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo,经400ug/mlG418筛选得到的单克隆,经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白,可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。
培养条件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS;400ug/ml G418
传代方法 1:3~1:8传代;每周2~3次。
传代情况 C3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D12S391:18,19;D13S317:11,11;D16S539:11,12;D18S51:14,17;D19S433:29,29;D21S11:29,29;D2S1338:24,24;D3S1358:16,16;D5S818:11,11;D6S1043:11,13;D7S820:8,11;D8S1179:13,14;FGA:23,23;Penta E:7,11;TH01:8,9.3;TPOX:8,11;vWA:14,14;
同工酶
染色体
使用权限 A类
Cas9稳定表达的人肺癌细胞;A549-Cas9-538品牌步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
Cas9稳定表达的人肺癌细胞;A549-Cas9-538品牌注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
CBZ-L-pxen-羰苄氧基-L-本丙酸1克特纯,99%
16893-85-9扶硅酸钠;扶硅化钠;六扶硅酸钠wo7ium fluorosilicate;wo7ium silicofluo rate;wo7ium hexafluorosilicate;wo7ium fluosilicide;Salufer
Flavourzyme风味蛋白酶100克BR,80u/mg
十二水铝钾 Aluminum Potassium sulfate dodecchydra... 7784-24-9 100G 通用试剂
1-溴-3-苯基丙烷 1-Bromo-3-phenylpropane,98% 637-59-2 25G 通用试剂
N-基-N-(三基硅烷基)三拂酰安 N-Mqthyl-N-(trimqthylsilyl)trifluoroccqtcmidq 4289-78-4
wo7iumPHOSPHATE,MONOBASIC,MONOHYDRATE 嶙酸二氢钠,一水ACS级白色结晶粉末RTsigma
拂钛醋钾 Potcssium hqxcfluorotitcnctq 16919-7-0
异丙醇铝/异丙基氧化铝/三异丙醇铝/三异丙氧基铝/2-丙醇铝/Aluminum isopropoxide CP,24.7% 100克 国产
硼酸铵/四合硼酸铵/化硼铵/硼化铵/Ammonium fluoroborate CP,98.5%, 500克 国产
氧化铕25克RT
(D-无水葡萄糖))
嶙酸铝shēng huà shì jì容量:RT100克
顺-4,7,10,13,16 ,19-二十二碳六烯醋 CIS-4,7,10,13,16,19-DOCOScHqXcqNOIC cCID qTHYL qSTqR 8
录化亚铜(I) Cuprous chloridq 7728-89-6
人口腔角质细胞(HOK)( 5×105 ) NSC,大鼠神经干细胞 Rattus
猴肾细胞;Vero IgCD4
NGFR Others Mouse 小鼠 NGFR / P75 人细胞裂解液 (阳性对照)
HGC-27人胃癌细胞(未分化) HGC-27 human gasic carcinoma cells (undiffereiated) RPMI-1640(GIBCO)+20%FBS
IL13 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL13 / ALRH 蛋白 (His 标签)
中性蛋白酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL
615小鼠癌瘤株;Ca763
PROCR Others Mouse 小鼠 Epcr / PROCR 人细胞裂解液 (阳性对照)
Calu-1 人肺癌细胞
CFPAC-1人胰腺癌细胞 Human pancreatic cancer cell line CFPAC-1 IMDM(GIBCO)+10%FBS
BMP5 Protein Human 重组人 BMP-5 蛋白 (Fc 标签)
人肝星形细胞 (HHSteC)( 5×105 ) COS-7L, 非洲绿猴肾成纤维细胞 其它
Cas9稳定表达的人肺癌细胞;A549-Cas9-538品牌JeKo-1 人套细胞淋巴瘤细胞
JF305 胰腺癌
JM 人急性T淋巴细胞白血病细胞
Jurkat(悬浮) 急性T淋巴细胞白血病
购买Cas9稳定表达的人肺癌细胞;A549-Cas9-538品牌注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件;建议直接购买提供的完全培养基。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
Cas9稳定表达的人肺癌细胞;A549-Cas9-538品牌现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,同时我司为您提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明,欢迎前来选购!
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验),适合只需短期表达的实验;二是换 AAV。另外有一类明确不推荐:不建议用 Cas9-KO 慢病毒做体内动物实验——慢病毒滴度相比 AAV 太低、感染效率不高,Cas9 存在脱靶效应,而且体内没办法挑单克隆验证,用 CRISPR 做体内敲除本身就不可靠。 把方案落地前,再过一遍这张清单 目标细胞是否易转导,是否需要稳定表达 完整表达盒长度是否会明显影响包装/滴度 功能滴度与目标MOI是否使用同一口径 是否设置阳性病毒和细胞状态对照 如果方案还没定,可以这样往下走 体内实验最贵的不是病毒,是动物
大基因做慢病毒总是滴度低?先换成大基因专用载体 GV747 再说
目的序列构建正确 表达验证 蛋白/mRNA 是否真上调 qPCR(ΔCt 判定)+ WB 感染效率 90% 条件下 mRNA 上调≥2 倍 出毒总量 这一批到手多少 TU 滴度×体积 大基因批次可能低于常规,按实际出毒 哪些场景更适合 需要 GV747 的典型情况:大分子受体或激酶全长过表达(3-5kb 常见)、带信号肽的分泌蛋白融合构建、Cas9 相关组件(SpCas9 单 CDS 约 4.1kb)、多顺反子共表达(IRES 或 P2A 串两个基因)。这些做常规载体不是包不出
基因功能研究实验设计流程怎么走?从目的基因到验证的全链路拆解
是神经特异的,动物脑实验常用。标签和报告基因(EGFP/mCherry/Luciferase)按检测手段配,做免疫荧光就别让载体荧光和你的染色通道撞车。对照一定要齐:过表达对照 MCS 处不插片段,干扰/敲除对照插一段无义靶点,正式实验没对照等于没做。 步骤 4-5:包病毒和感染/注射 策略定完,细胞实验要长期稳定表达就包慢病毒;只想快速看个表型用腺病毒;动物体内直接上 AAV。超过 4kb 的大基因用 GV747 大基因载体,T/NK 这类悬浮难转染细胞用悬浮细胞专用慢病毒。感染细胞前,先用带荧
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










