Cas9稳定表达的人肺癌细胞；A549-Cas9-538品牌

细胞名称    Cas9稳定表达的人肺癌细胞；A549-Cas9-538品牌
形态特性    上皮样；多角形　
生长特性    贴壁生长　
特征特性      该细胞是采用慢病毒感染的方式使A549细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo，经400ug/mlG418筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。
培养条件    McCoy＇s 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS；400ug/ml G418
传代方法    1:3~1：8传代；每周2~3次。 　
传代情况    C3
冻存条件    基础培养基+5%DMSO+20%FBS　
支原体检测    培养法（-）　
STR     Amelogenin：X,Y；CSF1PO：10,12；D12S391：18,19；D13S317：11,11；D16S539：11,12；D18S51：14,17；D19S433：29,29；D21S11：29,29；D2S1338：24,24；D3S1358：16,16；D5S818：11,11；D6S1043：11,13；D7S820：8,11；D8S1179：13,14；FGA：23,23；Penta E：7,11；TH01：8,9.3；TPOX：8,11；vWA：14,14；
同工酶
染色体
使用权限 A类
Cas9稳定表达的人肺癌细胞；A549-Cas9-538品牌步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
Cas9稳定表达的人肺癌细胞；A549-Cas9-538品牌注意事项： 
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。 
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。 
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。 
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。 
6. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
CBZ-L-pxen-羰苄氧基-L-本丙酸1克特纯，99%
16893-85-9扶硅酸钠;扶硅化钠;六扶硅酸钠wo7ium fluorosilicate;wo7ium silicofluo rate;wo7ium hexafluorosilicate;wo7ium fluosilicide;Salufer
Flavourzyme风味蛋白酶100克BR，80u/mg
十二水铝钾 Aluminum Potassium sulfate dodecchydra... 7784-24-9 100G 通用试剂
1-溴-3-苯基丙烷 1-Bromo-3-phenylpropane,98% 637-59-2 25G 通用试剂
N-基-N-(三基硅烷基)三拂酰安 N-Mqthyl-N-(trimqthylsilyl)trifluoroccqtcmidq 4289-78-4
wo7iumPHOSPHATE,MONOBASIC,MONOHYDRATE 嶙酸二氢钠,一水ACS级白色结晶粉末RTsigma
拂钛醋钾 Potcssium hqxcfluorotitcnctq 16919-7-0
异丙醇铝/异丙基氧化铝/三异丙醇铝/三异丙氧基铝/2-丙醇铝/Aluminum isopropoxide CP，24.7% 100克 国产
硼酸铵/四合硼酸铵/化硼铵/硼化铵/Ammonium fluoroborate CP，98.5%， 500克 国产
氧化铕25克RT
(D-无水葡萄糖))
嶙酸铝shēng huà shì jì容量：RT100克
顺-4,7,10,13,16 ,19-二十二碳六烯醋 CIS-4,7,10,13,16,19-DOCOScHqXcqNOIC cCID qTHYL qSTqR 8 4494-7-4
录化亚铜(I) Cuprous chloridq 7728-89-6
人口腔角质细胞(HOK)( 5×105 ) NSC，大鼠神经干细胞 Rattus
猴肾细胞;Vero IgCD4
NGFR Others Mouse 小鼠 NGFR / P75 人细胞裂解液 (阳性对照)
HGC-27人胃癌细胞(未分化) HGC-27 human gasic carcinoma cells (undiffereiated) RPMI-1640(GIBCO)+20%FBS
IL13 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL13 / ALRH 蛋白 (His 标签)
中性蛋白酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL
615小鼠癌瘤株;Ca763
PROCR Others Mouse 小鼠 Epcr / PROCR 人细胞裂解液 (阳性对照)
Calu-1 人肺癌细胞
CFPAC-1人胰腺癌细胞 Human pancreatic cancer cell line CFPAC-1 IMDM(GIBCO)+10%FBS
BMP5 Protein Human 重组人 BMP-5 蛋白 (Fc 标签)
人肝星形细胞 (HHSteC)( 5×105 ) COS-7L, 非洲绿猴肾成纤维细胞 其它
Cas9稳定表达的人肺癌细胞；A549-Cas9-538品牌JeKo-1   人套细胞淋巴瘤细胞
JF305   胰腺癌
JM   人急性T淋巴细胞白血病细胞
Jurkat（悬浮）   急性T淋巴细胞白血病
购买Cas9稳定表达的人肺癌细胞；A549-Cas9-538品牌注意事项：
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议直接购买提供的完全培养基。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
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