北京大肠杆菌Rosetta感受态细胞厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")北京大肠杆菌Rosetta感受态细胞厂家，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京大肠杆菌Rosetta感受态细胞厂家
品牌：百奥莱博
英文名：E.coli Rosetta Competent Cell
编号：BTN140379
产地：国产|进口
 本产品为采用大肠杆菌Rosetta菌株经特殊工艺处理得到的大肠杆菌化学感受态细胞，具有*霉素抗性，补充大肠杆菌缺乏的6 种稀有密码子(AUA，AGG，AGA，CUA，CCC，GGA)对应的tRNA，提高外源基因，尤其是真核基因在原核系统中的表达水平，经 pUC19质粒检测转化效率高达 109cfu/μg。

基因型：F- omp T hsd SB(rB- mB-)gal dcm pRARE(CamR)

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

北京大肠杆菌Rosetta感受态细胞厂家极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·cl857 Sam7 λDNA(非甲基化)
编号：BTN90407C
英文名称：Lambda DNA
规格：5μg
本产品Lambda DNA(λDNA)为λ噬菌体中的DNA，是一种常见的DNA底物，分子量为31.5×106Da/48502bp，浓度为200～500μg/ml。A型为普通Lambda DNA。B型为不含N6-甲基腺嘌呤Lambda DNA。C型为非甲基化的cl857 Sam7 λDNA，是从感染的大肠杆菌GM119菌株中分离得到的。该菌株缺乏dam及dcm甲基化酶活性。非甲基化的λDNA以作为对DNA甲基化敏感的限制性酶的底物。

储存溶液：Tris-HCl(pH8.0)10mM；EDTA 1mM

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

纯度：
1. OD260nm/280nm＞1.8。
2. 琼脂糖凝胶电泳出现清晰单一条带。
3. 1μg的λDNA在Hind III酶切Buffer中37℃保温16小时后，琼脂糖凝胶电泳时出现清晰单一条带。
4. 1g的λDNA 用Hind III酶切(37℃，2小时)后，在琼脂糖凝胶电泳时出现8条清晰的DNA电泳带。

·二甲*蓝FF溶液(电泳级)
编号：BTN100934
英文名称：Xylene Cyanol Solution
规格：10mL
二甲*蓝FF分子式为C25H27N2O7S2Na，分子量为554.62。CAS号为4463-44-9。 蓝黑色粉末。易溶于乙醇，溶于水呈蓝色。有刺激性。本产是二甲基蓝FF的1%水溶液，用作制备电泳上样液和生物染色剂的母液。其泳动率在0.5-1.4%琼脂糖中，与4 KbdsDNA接近。在8%变性PAGE中，相当于75bp dsDNA，在8%非变性胶中，相当于160bp dsDNA。

储存条件：常温运输及密封干燥避光保存，有效期两年。


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·10M*化*溶液(RNase-Free)
编号：BTN100907
规格：250mL

·杆菌肽溶液
编号：BTN120682
英文名称：Bacitracin Solution
规格：1mL
本产品是浓度为100mg/mL的杆菌肽溶液。杆菌肽(枯草菌肽； 雀西杆菌素；Ayfivin；Baciguent；Bacitin)，分子式C66H103N17O16S ，分子量是1422.69，CAS号是1405-87-4，易溶于水，能溶于乙醇、甲醇和冰乙酸。杆菌肽是由地衣型芽孢杆菌产生的多肽类抗生素，对大多数革兰氏阳性菌特别是耐药葡萄球菌具有较强的抗菌作用。

抗性机制：本品溶液能被多种重金属盐类沉淀，抗菌谱与青霉素相似，对革兰阳性细菌和阴性球菌、肺炎双球菌、葡萄球菌、淋球菌、脑膜炎双球菌及螺旋体等均有杀菌作用。其作用机制不仅作用于细胞壁，也影响原生质体，对胞浆膜也有损坏作用，影响其渗透性。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期6个月。


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·溶菌酶溶液(10mg/mL)
编号：BTN100815
英文名称：Lysozyme Solution
规格：1.5mL
本产品是浓度分别为10mg/mL的蛋清型溶菌酶溶液，可以用于下列分子生物学实验。
➤ 核酸纯化；
➤ 包涵体蛋白纯化；
➤质粒DNA纯化；
➤ 几丁质的水解；
➤细胞壁的水解。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。


·YPG液体培养基
编号：BTN130896
英文名称：YPG Liquid Medium
规格：250mL
YPG(YEPG；YEP-甘油)培养基是一种混合培养基，包含有不支持阴性菌落或pet变异的不发酵碳碳源-甘油，其他成分和YPD培养基相同。

储存条件：常温运输及保存，有效期两年。

·T7 RNA聚合酶
编号：BTN120310
英文名称：T7 RNA Polymerase
规格：1000U
T7 RNA聚合酶是一种高度特异识别T7启动子序列的DNA依赖的5´→3´RNA聚合酶，它可以催化单链或双链DNA T7启动子下游NTP的掺入，合成与T7启动子下游的模板DNA互补的RNA。

产品特点：
1．对于T7启动子有高度的特异性，用于体外RNA(含小RNA)的合成。
2．能识别修饰的NTP(生物素标记、地高*(代"辛")标记、荧光素标记的NTP)，可用于标记探针。
3．所得RNA可用于下列后续实验：核酸杂交、基因组DNA序列分析、核糖核酸酶保护测定、反义RNA合成，体外翻译，RNA剪接、RNA二级结构分析、RNA-蛋白质相互作用、核酸扩增、siRNA、miRNA等小RNA。

产品组成：

 

成分	规格
T7 RNA聚合酶(20U/μL)	50μl
5×反应缓冲液	250μl
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、制备DNA模板(本试剂盒不含所需试剂，此处信息仅供参考)
PCR片段和质粒DNA都可以用作体外转录的模板，但是必须注意以下几点。
⑴必须使用线性化的DNA。如果是质粒DNA，则必须先用适当的限制性内切酶切成线状。
⑵ 需要转录的DNA序列的上游必须有T7启动子。如果模板是PCR产物，则可以在设计引物时将T7启动子序列(5´TAA TAC GAC TCA CTA TAG GG 3´)加上。如果是将DNA片段克隆到载体上，则需要选择有T7启动子的载体，并且克隆位点必须位于T7启动子下游。
⑶ 需要转录的DNA序列的下游端最好不要是3´突出。如果是3´突出(比如选择了Pst I来线性化质粒)，则最好用T4 DNA聚合酶修平。
⑷必须保证DNA模板中没有RNase。由于提取质粒DNA的过程中一般要使用大量的RNase A，因此质粒DNA一般都有严重的RNase A污染，所以在用作模板前，最好采取胶回收得方法回收质粒DNA。并且加入少量总RNA一起保温，然后电泳检测RNA是否被降解，以此来判断纯化的DNA模板是否有残留RNase A。

二、体外转录反应(本试剂盒不含除酶和反应液之外的相关试剂)
1．在一个RNase-free的塑料离心管中，在室温下(不是在4℃下)按次序加入下列成分：

成分	加入量	备注
DNA模板		如果使用质粒DNA,必须反复酚-*仿抽提去除残留的RNase,然后再乙醇沉淀质粒DNA
PCR片段	50ng左右
质粒DNA	1μg左右
RNase抑制剂
5×反应缓冲液	4μl	需室温时使用
NTP(2.5mM each)	4μl
T7 RNA聚合酶	0.5-1μL
RNase-free水	补水到20μL

注：此为20μL反应体系的用量，对其他反应体系，各成分的用量可以按比例增减。如果需要标记RNA探针，则需要订购NTP分开的试剂盒。如果需要得到加帽RNA，则需要加入自备的加帽修饰核苷酸。
2．37℃保温1-2小时。
 注意：延长保温时间并不能提高产量。
3．70℃加热10分钟灭活T7 RNA聚合酶。
4．取1-3μL电泳检测转录效果。一般1μg DNA可以合成5-10μg的RNA。
5．得到的RNA可以放-80℃保存。

三、如果需要去除DNA模板(仅产品不提供所需试剂)
1．在体外转录体系中加入1μL自备的RNase-free DNase(3-5U/μL)。
2．37℃保温15-30分钟。
3．补水到100μL。
4．用自备的等体积(100μL)的Tris饱和酚-*仿抽提一次去除残留的DNase和RNA聚合酶。
5．加200μL微量核酸沉淀剂(用前需要摇晃混匀)，振荡后15000rpm离心3～5分钟，弃上清。
6．加入1mL 75%乙醇，震荡10秒后15000rpm离心3～5分钟，弃上清。
7．短暂离心数秒，用枪头吸弃上清。晾干，所得沉淀即体外转录所得的RNA。可溶于RNase-free水中后立即使用或放-80℃长期保存。

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