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- 库存:
836
- 英文名:
Red Cell Lysis Solution,Type B
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应红细胞裂解液B型(流式细胞分析用)厂家现货,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:红细胞裂解液B型(流式细胞分析用)厂家现货
规格:250mL
品牌:百奥莱博
编号:BTN90309
英文名:Red Cell Lysis Solution,Type B
产地:国产|进口
本品用于快速裂解哺乳动物全血中的红细胞而基本不破坏白细胞和其他淋巴细胞的完整性和生物学活性。由于红细胞是血液的主要细胞成份,不含DNA和RNA,其所含血红素能抑制PCR反应,所以先用本产品裂解红细胞,再提取基因组DNA或RNA 有助于提高所得样品纯度。
产品特点:
1.可以处理人全血、小鼠全血、脾细胞中的红细胞。
2.高效,一次处理能裂解80%以上的哺乳动物红细胞,能回收90%左右的白细胞。一般样品最多只需要处理两次。
3.扩容性好,可以一次处理多达几十毫升的样品,也可以处理100μL的血液。
4.基于NH4Cl 裂解法,得到的白细胞主要用于流式细胞分析。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
用去离子水将本产品(10×)稀释为1×工作液(1mL 本产品加9mL去离子水),待温度回到室温或37℃加热到37℃的时候再使用。工作液不能长期放置,只能现配现用。
一.裂解哺乳动物全血中的红细胞
1.离心哺乳动物抗凝血液后弃血浆部分,按每1mL 哺乳动物抗凝血液细胞沉淀加10mL 1×工作液的比例加入红细胞裂解液B型的1×工作液。
2. 轻柔吹打充分混匀。
3.室温放置 15分钟(注意:放置时间不要超过15分钟)。
4. 4℃1000rpm离心10分钟,吸弃红色的上清液。
5. 如果红细胞裂解不完全,可以重复第 1-4 步。
6. 用适当的自备缓冲液(如Hanks溶液)重悬白细胞沉淀。
7. 用于细胞计数和流式细胞分析等后续试验。
二.裂解组织细胞中的红细胞
1. 按标准方法用自备的胰酶将组织消化成单个细胞悬液,离心弃上清。
2. 按 1:10的比例向细胞沉淀中加入红细胞裂解液B型工作液,轻柔吹打均匀。
3.室温放置 15分钟(注意:放置时间不要超过15分钟)。
4. 4℃ 1000rpm离心10分钟,吸弃红色的上清液。
5. 如果红细胞裂解不完全,可以重复第 2-4 步。
6. 用适当的自备缓冲液(如 Hanks溶液)重悬白细胞沉淀。
7. 用于细胞计数和流式细胞分析等后续试验。
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文献和实验细胞类型中,相应抗原的表达量,可以粗略地将抗原分子分为三类: 1. 很容易鉴定、容易区分阴阳性细胞群、阴阳性峰明显分开的抗原。例如:CD3,CD4,CD19 等。 2. 很容易鉴定、较高水平表达、经常连续性表达。例如:CD27,CD28,CD45RA, CD45RO 等。 3. 低水平表达、激活性 Marker、未知但关键。例如:CD25,STAT5,Foxp3 等。 表达量的强弱,可以参考厂家的质检结果,但更多地需要参考文献里具体细胞群体的表达。 第三步、了解实验所用流式细胞仪的配置
。 实验类型:大多数只标明用于WB、IP、IHC、IF、ChIP的抗体都不适用于流式实验(FC,flow cytometry)。选择标明用于FC实验的抗体,并有引用文献和实验数据图。 克隆号:有一些标记物有多个克隆号,选择文献报道中使用多,荧光标记种类多的克隆号。 厂家和批号:不同厂家或同一厂家生产的不同批号的相同荧光的相同标记物的抗体,荧光染料的强度可能有少许差别,不建议一次实验混合使用。 2、流式抗体荧光标记的方式包括直接标记和间接标记两种。 在流式实验过程中,直标抗体一抗上连接有荧光染料,间标
流式细胞技术(Flow cytometry, FCM)是利用流式细胞仪进行的一种单细胞定量分析和分选技术。流式细胞术是单克隆抗体及免疫细胞化学技术、激光和电子计算机科学等高度发展及综合利用的高技术产物,它能有效地从单细胞水平区分异质性细胞群体,检测对象包括但不限于悬浮细胞、贴壁细胞或从实体组织分离的单细胞悬液和其他生物颗粒。 一、细胞表面染色步骤 样本准备 1.1 采集全血或组织(脾,淋巴结,胸腺和骨髓),用细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS)制成单细胞悬液。对于体外
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