- ￥120 - 3550
- 百奥莱博
- 北京
- BTN90309-TDL
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输,4℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
Red Cell Lysis Solution,Type B
- 库存：
350
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格：
100mL
产品特点：
1.可以处理人全血、小鼠全血、脾细胞中的红细胞。
2.高效，一次处理能裂解80%以上的哺乳动物红细胞，能回收90%左右的白细胞。一般样品最多只需要处理两次。
3.扩容性好，可以一次处理多达几十毫升的样品，也可以处理100μL的血液。
4.基于NH4Cl 裂解法，得到的白细胞主要用于流式细胞分析。
储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。
使用方法：
用去离子水将本产品(10×)稀释为1×工作液(1mL 本产品加9mL去离子水)，待温度回到室温或37℃加热到37℃的时候再使用。工作液不能长期放置，只能现配现用。
一．裂解哺乳动物全血中的红细胞
1.离心哺乳动物抗凝血液后弃血浆部分，按每1mL 哺乳动物抗凝血液细胞沉淀加10mL 1×工作液的比例加入红细胞裂解液B型的1×工作液。
2. 轻柔吹打充分混匀。
3.室温放置 15分钟(注意：放置时间不要超过15分钟)。
4. 4℃1000rpm离心10分钟，吸弃红色的上清液。
5. 如果红细胞裂解不完全，可以重复第 1-4 步。
6. 用适当的自备缓冲液(如Hanks溶液)重悬白细胞沉淀。
7. 用于细胞计数和流式细胞分析等后续试验。
二．裂解组织细胞中的红细胞
1. 按标准方法用自备的胰酶将组织消化成单个细胞悬液，离心弃上清。
2. 按 1：10的比例向细胞沉淀中加入红细胞裂解液B型工作液，轻柔吹打均匀。
3.室温放置 15分钟(注意：放置时间不要超过15分钟)。
4. 4℃ 1000rpm离心10分钟，吸弃红色的上清液。
5. 如果红细胞裂解不完全，可以重复第 2-4 步。
6. 用适当的自备缓冲液(如 Hanks溶液)重悬白细胞沉淀。
7. 用于细胞计数和流式细胞分析等后续试验。
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文献和实验#01 什么是同型对照？ 同型对照（Isotype Control），是指与使用的流式抗体具有相同种属来源、亚型、荧光标记物、使用剂量和浓度，但对目标靶点无特异性结合的抗体。同型对照通常用来消除抗体与抗原的非特异性结合造成的背景染色。 #02 为什么要做同型对照？ 流式抗体与靶标的结合，是通过抗体的 Fab 端与靶标 Marker 进行特异性结合而完成的。白细胞（除T细胞外）表面大多表达 CD16、CD32、CD64 等 Fc 受体，这些受体可与各种抗体的 Fc 端非特异性结合，出现非特异
大部分老师做流式实验时，会用到空白对照、单阳对照、同型对照、生物学对照等，用到 FMO 对照的比较少。尽管如此，FMO 对照在设置圈门时仍具有重要的参考价值。 一方面，FMO 对照有助于精确地设置阴阳性群体界限。我们在做多色实验时，可能会出现某些通道信号难以区分的情况，主要是因为其他某个荧光对该通道的干扰很大。FMO 对照（Fluorescence Minus One，荧光扣除一）减少了其中一个通道的荧光抗体，能够帮助衡量其它通道的荧光漏溢情况。 如下图所示，PerCP/Cyanine
的上样条件。细胞量为1×106 个/ml，1ml。 2) 上机前，应对样本进行混合，以使样本均一(注意使用排枪吹打，勿产生气泡)。 3) 以上protocol 仅针对于悬浮细胞。 4) 药物刺激浓度需先做梯度检测。 第七章 流式细胞分析分选术 42 2. Cell Cycle Assay 常用的实验细胞株包括：293(T)，MCF7，U2OS，Saos，Hela 等 以U2OS 细胞为例 2.1 细胞培养及铺板 1) 细胞株及材料： a) 细胞
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