BTN140576型大肠杆菌DH10Bac化学感受态细胞厂家

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百奥莱博专业生产供应BTN140576型大肠杆菌DH10Bac化学感受态细胞厂家价格，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：BTN140576型大肠杆菌DH10Bac化学感受态细胞厂家价格
规格：0.1mL*10
英文名：E.coli DH10Bac Chemical Competent Cell
编号：BTN140576
 本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌DH10 Bac感受态细胞，适用于昆虫杆状病毒Bac-to-Bac 系统中同源重组的菌株，用于产生重组Bacmid。使用pUC19质粒检测，本产品转化效率可达107CFU/μg。
 DH10Bac细胞包含亲本Bacmid bMON14272和辅助质粒 pMON7124。亲本Bacmid 包含一个mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和lac Zα-互补因子。
 辅助质粒包含tns ABCD 区域，该区域提供了mini-Tn7从供体质粒插入亲本Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如pFastBac 系列质粒(pFastBac1，pFastBacDual等)含有Tn7R和Tn7L 同源重组臂，Tn7R和Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和SV40 病毒的PolyA 加尾信号。当含有靶基因pFastBac的重组质粒转化到DH10Bac细胞后，发生重组后就可产生重组Bacmid，提取纯化重组Bacmid转染昆虫细胞Sf9或Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外，DH10Bac细胞中的The φ80dlacZDM15基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象，用于重组bacmid的蓝白斑筛选。
 菌株基因型为：F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ-rpsL nupG/pMON14272/pMON7124。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，避免反复冻融，有效期半年。

自备试剂：重组质粒、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 制备含有如下抗生素的LB 固体平板：50 μ g/mL Kanamycin，7 μ g/mL gentamicin，10μg/mL tetracycline，100μg/mL X-gal，40μg/mL IPTG。
2. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以100μL感受态细胞为例。
3. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入1-10 ng 重组质粒，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
4. 42℃热击90秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
5. 每个离心管中加入900μl 无菌的SOC(不含抗生素)，混匀后置于37℃ 摇床，200rpm 振荡培养4小时。
6. 用 SOC培养基进行10倍梯度稀释，如分成3个稀释梯度10-1,10-2,10-3。
7. 取 100μl的各个梯度的培养物用于涂布。等平板中的液体完全吸收后，倒置平板，37℃培养24-48小时。
8. 保留剩余的菌液保存于4℃，视平板上菌落生长情况决定去留。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

更多有关BTN140576型大肠杆菌DH10Bac化学感受态细胞厂家价格的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·对*醌固定液
编号：BTN131293
英文名称：p-Benzoquinone Fixative Solution
规格：250mL
本固定液为0.4%对*醌PBS溶液。该固定液对抗原具有较好的保护作用，但是对超微结构的保存有一定的影响，因此，常常与醛类固定剂混合使用。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期半年。

·一步法无内毒素质粒DNA提取试剂盒
编号：BTN80201
英文名称：One-step Endotoxin-free plasmid DNA extraction kit
规格：50次
本试剂盒是在一步式质粒DNA提取试剂盒2.0(BTN70903)和液相内毒素清除剂(BTN60607)两产品的基础上开发出来的无内毒素质粒DNA提取试剂。用本产品提取的质粒DNA，内毒素的污染浓度低，适合于转染等对内毒素的污染敏感的实验。

试剂盒特点：
1.在提取质粒前去除内毒素(存在于细菌表面)，从源头上避免料内毒素和质粒DNA 接触，从根本上防止了内毒素对质粒DNA的污染。
2. 独创的一步法质粒DNA提取技术，操作快捷，只需要5-10分钟。
3.质粒回收率高，一次处理后90%的质粒DNA可以回收回来。
4. 得到的质粒DNA可以直接用于转染等实验。

试剂盒组成：

 

成分	规格
菌体内毒素清除剂	200ml
溶液A	50ml
吸附柱活化液	25ml
离心吸附柱(小提)	50只
离心吸附柱(小提)套管	50只
通用预洗液	50ml
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(溶液A最好4℃保存)，有效期一年。

使用方法：

一:菌体内毒素的清除
1. 收集1.5-3mL E.coli 饱和菌液，12000rpm离心1分钟，弃上清，得到细菌沉淀。
2.在沉淀中加入1mL菌体内毒素清除剂，温和混匀后10000-12000rpm离心1分钟，弃上清(含内毒素)。
3. 再重复上述操作3次，得到的菌体沉淀可以直接进入下面的一步法质粒DNA提取操作。

二：一步法质粒DNA提取
4.在菌体沉淀中加入0.6mL溶液A(用前需摇匀)，充分吹打或振荡30秒裂解细菌，直到裂解液变澄清(一般需要半分钟左右)。注:此方法丌同于碱裂解法，故可以充分吹打或振荡。
5.活化离心吸附柱：在离心吸附柱中加入0.5mL 吸附柱活化液，套上收集管后室温放置2分钟，然后12000rpm离心2分钟，倒弃穿透液，再将吸附柱套上收集管后待用。活化后的离心吸附柱必须立即使用。如果丌活化，质粒得率将低20-40%左右。
6. 将第4 步得到的裂解液全部转移到离心吸附柱中，室温静置2分钟使质粒DNA 不膜结合。注意：必须静止2分钟，否则质粒DNA 丌容易吸附上。
7.室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
8.在离心吸附柱中加入0.6mL的通用预洗液(注意:是通用预洗液，丌是通用洗柱液，丌要用错。通用预洗液非常容易产生沉淀，用前需要加热到60℃左右使之融化，混匀后再用)，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
9.在离心吸附柱中加入0.6mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
10.在离心吸附柱中加入0.4mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
11.室温12000～15000g离心半分钟，甩干残留液体。
12. 将离心柱置于一个新的1.5mL自备塑料离心管中，加入30-100μL DNA洗脱液2.0，室温放置2分钟。
13. 12000～15000g离心半分钟，离心管底溶液即无内毒素质粒DNA。


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·96孔板血液DNA提取试剂盒(真空法)
编号：BTN131194
英文名称：96 Microwell Plate Blood DNA Extraction Kit
规格：1次

·硅胶膜离心吸附柱系列(小量提取)
编号：BTN60911
英文名称：Silica Spin Column for Miniprep
规格：50套
硅胶膜离心吸附柱目前广泛用于基因组DNA提取、总RNA提取、DNA反应纯化、DNA胶回收和质粒DNA制备等分子生物学实验，但是由于硅胶膜吸附核酸的能力千差万别(详细分析见百奥莱博综述Silica-DNA结合原理及影响因素)，使得市场上相关产品的质量也良莠不齐。百奥莱博经过精心研究，找到特殊的化学修饰方法，使普通硅胶膜吸附核酸的能力大为增加，好于市场上绝大多数产品。本产品就是基于化学修饰硅胶膜的微型离心吸附柱。

产品特点：
1.高载量，在同等上样条件下吸附能力比同类产品高1-2倍左右。
2.上样体积为0.7mL。
3.与各种常用的，基于Silica-DNA结合原理的上柱液和洗柱液兼容。
4.可以再生使用(需要百奥莱博的离心吸附柱再生液)。
5. 结合DNA的性能不会随放置的时间变化。

储存条件：常温运输及保存，有效期两年。

使用效果：

图注: 本产品(T)和国内杭州V公司离心吸附柱(V)用于从1.5mL E.coli菌液中提取pGEM3质粒DNA(使用百奥莱博柱式质粒DNA提取试剂盒试剂)，最后用100μl TE洗脱质粒DNA，5μl用于电泳。

图注: 本产品(左)和上海S公司离心吸附柱(右)用于从玉米叶片中提取总RNA。洗脱量为100μl，10μl用于甲醛胶变性电泳。


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