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- 详细信息
- 文献和实验
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785
- 英文名:
Orth Fixative Solution
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输和保存
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应Orth固定液折扣价,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:Orth固定液折扣价
产地:国产|进口
规格:250mL
编号:BTN140411
英文名:Orth Fixative Solution
该固定液固定组织较缓慢,不适合作为临床的活检固定液,4毫米厚的组织固定时间需36-72小时,该液对于染色质的固定好,显示清晰,但可溶解部分红细胞和含铁血黄素。
该固定液不能沉淀蛋白质,它必须和醋酸配成混合固定液。它不能长期固定组织,经它固定的组织应充分水洗后保存于80%酒精中。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
Orth固定液折扣价极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
多聚甲醛-蔗糖溶液 5%|10%|20%|30% 500ml
9007-43-6 细胞色素C(牛心) Cytochromes C
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ARB12002 大鼠S-100 蛋白尿液中含量检测 Rat soluble protein-100,s-100 ELISA KIT
73049-73-7 胰蛋白胨
F030217 HRP标记兔抗狗IgG抗体 Rabbit Anti-Dog IgG*HRP
马脾铁蛋白 Sodium D-pantothenate 9007-73-2
双链λ噬菌体DNA载体 100ug
ARB10520 人白细胞介素8(IL-8)含量测试 Human interleukin 8,IL-8ELISA KIT
甘*酸 Hydroxymethyl resin 56-40-6
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司盘40 dCTP,3Na 26266-57-9
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Ringer"s液(哺乳动物专用) 500ml
BL0961 封闭用马血清(原液)
9012-54-8 纤维素酶R-10 Cellulase R-10
Orth固定液折扣价关键词:Orth Fixative Solution,Orth固定液,BTN140411
·植物叶绿体蛋白提取试剂盒
编号:BTN130887
英文名称:Plant Chloroplast Protein Extraction Kit
规格:15次
本试剂盒是结合植物叶绿体纯化试剂盒和细菌蛋白质提取试剂盒而推出的新兴产品,专门用于植物叶绿体蛋白的快速提取。
产品特点:
1. 即用型试剂盒,用户不需要单独配制各种溶液。
2. 本产品足够15次提取,每次可处理30g叶片。
3. 得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、免疫印迹分析、蛋白活性测定和BCA法及Lowry法蛋白定量(不适用于Bradford法)。
4. 已经成功用于菠菜、大豆、莴笋、白菜、烟草和甜菜等植物,还可用于更多植物(可能需要优化条件)。
试剂盒组成:
| 成份 | 规格 |
| 匀浆液成分一 | 250mL×2 |
| 匀浆液成分二(干粉) | 3g |
| Percoll | 60mL |
| 带柄尼龙滤膜 | 1个 |
| 植物叶绿体纯化试剂盒 | 15次 |
| 溶液A | 15mL |
| 溶液B | 1.5mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,保存期限一年。
使用方法:
注意:叶绿体对温度高度敏感,所以整个操作必须在冰上或者在冷室进行,所用器皿和溶液均需要在4℃预冷。离心时一定要在4℃进行,离心力以g而不是rpm计算。如果需要研究叶绿体的功能,提取还需要在昏暗的光线条件下进行。
一:叶绿体的纯化
1. 实验前1-2天将植物放在暗室培养以减少叶绿体中淀粉颗粒的形成,否则离心时这些颗粒很容易使叶绿体破裂。叶片在实验前需先用自来水洗净,再用蒸馏水淋洗,去掉多余水分。如果叶片采集后不能立即处理,则保存时需要保持叶片湿润,即使如此,叶片的放置时间也不能超过一天。
2. 新鲜(实验当天)制备匀浆液:将自备的去离子水与匀浆液成分一按4:1的比例混合,然后在混合液中加入匀浆液成分二干粉到终浓度0.1%(每100mL中加入0.1 g干粉),摇晃溶解后所得溶液即为匀浆液,冰上预冷待用。一次实验(从30 g叶片提取叶绿体)所需要的匀浆液体积跟材料不同而不同。
3. 新鲜采集植物叶片,快速去除叶脉并将叶片剪成1-3 cm2大小的碎片并浸泡在适量的预冷的匀浆液中(每克叶片加4mL匀浆液,但对烟草和大豆,每克叶片需要加6mL匀浆液)。
4. 将浸泡了叶片的匀浆液转移到Waring匀浆机(即家用制备果汁的匀浆机)中,低速匀浆10秒,避免起泡沫。用玻璃棒把液面的碎片按入匀浆机底部后,再低速匀浆10秒。注意:除Waring匀浆机外,还可以选择Dounce玻璃匀浆器,Polytron匀浆机和研磨(加玻璃珠)等裂解细胞的方法,但这些方法的单次处理量都比较小,需分成很多小份单独匀浆,然后再汇集。
5. 用带柄尼龙滤膜过滤匀浆液,可先将滤液收集到预冷的200mL量筒中,再等分到4个预冷的50mL的塑料离心管中(每个管中的滤液不要超过35mL)。带柄尼龙滤膜后可反复使用。
6.在水平转子离心机上4℃ 200 g离心3分钟(对菠菜,白菜和莴笋材料)或400 g离心1分钟(对甜菜材料),白色沉淀为未破裂的细胞或细胞核。
7. 将上清液(含叶绿体)转移到一个新的、预冷的50mL塑料离心管中。
8.在水平转子离心机上4℃ 1000 g离心7分钟,小心弃上清,沉淀含叶绿体,呈浅绿色。
9.在沉淀中加入1.5mL预冷的匀浆液,手弹离心管底部使叶绿体重悬。注意:重悬时最好避免溶液起泡,也不要用枪头吹打,否则叶绿体容易破裂。沉淀下有白色淀粉属于正常现象,但重悬叶绿体时避免将白色淀粉重悬。
10. 将4管叶绿体重悬液汇集(共约6mL),得到叶绿体粗提液,可直接用于后续的SDS-PAGE,Western,ELISA和蛋白组分析。
11. 如果需要以之为材料精提叶绿体,就需要用密度梯度离心法将完整的叶绿体和其他污染物进一步分离。具体操作步骤是:在50mL塑料离心管中先加入6mL匀浆液成分一和4mL Percoll,充分混合均匀。在其液面上小心铺上叶绿体粗提液。在水平转子离心机上4℃ 1000 g离心8分钟,管底绿色沉淀为完整的叶绿体。小心将上清倒出后,用于叶绿体蛋白提取。
二:叶绿体蛋白质的提取
12. 将1mL的溶液A和100μL溶液B加入到叶绿体沉淀(约15mg湿重)中,吹打混匀。
13. 冰上放置30分钟至1小时至溶液变清。
14. 4℃ 1,2000 g离心1分钟。
15. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要进行SDS-PAGE电泳,可取部分样品到离心管中,加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×),在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。
Orth固定液折扣价关键词:Orth Fixative Solution,Orth固定液,BTN140411
邻*二甲*(代"酸")二环己酯 Pullulanase 84-61-7
SOB培养基粉剂 1L
BL0915 FITC标记BSA抗体
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BTN130649 人单链选择性单功能尿嘧啶-DNA糖基化酶 hSMUG1
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ARB13088 小鼠细胞色素C(Cyt-C)Elisa定量检测 Mouse cytochrome-c,cyt-c ELISA KIT
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SJ0070 Banana powder 香蕉粉
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文献和实验。如把含铬组织直接转移到酒精内,会形成一种非溶性低氧化物而不易除去。 重铬酸钾有溶解染色质的缺点,一般备用液为5%水溶液,固定液使用浓度为1%-3%水溶液。 铬酸(CrO 3 ) 为暗红色或带暗紫色的块状结晶,具有强酸性及腐蚀性,剧毒,易潮解,为强氧化剂,应置于暗处。它是Orth氏液或ZenRer氏液等复合固定剂中的一种成分,不应同酒精、福尔马林等还原剂混合使用。铬酸与乙醇,乙醚少许接触即可引起爆炸。 铬酸可沉淀所有的蛋白质,使不溶于水,并可保存糖
。 (7)在B溶液中染l0~l5min。 (8)在1%醋酸中洗2min。 (9)无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。 [结果] 结缔组织红色,肌肉、胞质灰绿色,红细胞绿色,核蓝黑色。 4. Clark改良Van Gieson台盼蓝法(1971年) 用于胶原纤维、包括非常细的纤维,以及肌肉角化上皮的染色。 [固定] 甲醛固定液。 [试剂配制] (l)A液 0.3g萘酚黄S(naphthol yellow S)溶窜犯100mI蒸馏水。 (2)B液 0.2g酸性
。 (7)在B溶液中染l0~l5min。 (8)在1%醋酸中洗2min。 (9)无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。 [结果] 结缔组织红色,肌肉、胞质灰绿色,红细胞绿色,核蓝黑色。 4. Clark改良Van Gieson台盼蓝法(1971年) 用于胶原纤维、包括非常细的纤维,以及肌肉角化上皮的染色。 [固定] 甲醛固定液。 [试剂配制] (l)A液 0.3g萘酚黄S(naphthol yellow S)溶窜犯100mI蒸馏水。 (2)B液 0.2g酸性
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