随机引物法DNA探针标记试剂盒打折促销

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百奥莱博专业生产销*(代"售")随机引物法DNA探针标记试剂盒打折促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：随机引物法DNA探针标记试剂盒打折促销
英文名：Random Primer DNA Labeling Kit
编号：BTN90603A
规格：5次
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
本试剂盒是基于Feinberg和Vogelstein发明的随机引物标记法而开发出来的即用型DNA探针标记试剂盒，标记过程由双链DNA热变性、随机引物与单链DNA结合、在Klenow DNA聚合酶催化下，引物的延伸合成DNA探针并掺入标记的核苷酸三步组成，可用下面的示意图表示：

本产品对Feinberg和Vogelstein经典方法进行了改良。

产品特点：
1. 提供的标记反应液整合了除酶和模板外的所有成分，简化了反应加样步骤，提高了标记反应的可重复性。
2. 使用无外切活性的Klenow exo- DNA聚合酶，已标记DNA探针不会被酶降解。
3.快速，最快1小时即可完成标记反应。
4. 得到的DNA探针比活性高(如果是同位素，可以达到109cpm/μg DNA)，检测灵敏度高。
5. 所需模版DNA量少(只需要10ng以上即可)，DNA可以是各种形状(线状和环状)的、也可以是单链或双链的，长度在100bp以上均可。
6. 得到的探针长度在200-400nt之间，可以用于Southern杂交、Northern杂交、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等。
7. 提供三种标记选择，其中BTN90603A可用于各种同位素标记和其他任何非同位素标记，但需自备标记底物；BTN90603B和BTN90603C可分别用于生物素和地高*(代"辛")标记，不需自备标记底物。

试剂盒组成：

 

成分	规格
2×A型标记反应液(自备标记物型)	50μl(仅A型有)
2×B型标记反应液(生物素型)	50μl(仅B型有)
2×C型标记反应液(DIG型)	50μl(仅C型有)
dATP,2mM	10μL(仅A型有)
dTTP,2mM	10μL(仅A型有)
dGTP,2mM	10μL(仅A型有)
dCTP,2mM	10μL(仅A型有)
Klenow exo-聚合酶(2U/μL)	5μl
超纯水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在一干净的硅化的塑料离心管中加入下列成分：

成分	用量
模板DNA	50-150ng
2×标记反应液(ABC三种之一)	10μl
超纯水	补水到15μl

注意：非同位素标记物由于疏水性强，容易与常用的塑料离心管表面非特异性结合，所以一定要使用硅化的塑料离心管。模板DNA并非越多越好，因为模板会在杂交反应中跟标记的探针杂交，竞争性地抑制探针跟靶分子的杂交。
2. 沸水浴5-10分钟，或在PCR仪上100℃加热5-10分钟使DNA模版充分变性，立即放冰上待用。注意：如果PCR仪器不能设置到100℃，99℃加热5分钟也可。
3.高速离心数秒使所有液体集中在管底，根据试剂盒类型加入下列成份：

试剂盒类型	成分及用量
BTN90603A型	dATP、dGTP、dCTP各1μl(共3μL，浓度均为2mM) 自备的2mM dTTP/标记dUTP混合物(见注)1μL 1μl Klenow exo聚合酶
BTN90603B型	1μl Klenow exo聚合酶 4μl超纯水
BTN90603C型	1μl Klenow exo聚合酶 4μl超纯水

注：上表中的dTTP/标记dUTP混合物中dTTP和标记的dUTP的总浓度为2mM(在20μL体系中混合液的终浓度为0.1mM，dTTP与生物素或DIG标记的dUTP的比例最好为65:35)。由于空间阻碍，并非标记生物素或DIG标记的dUTP越多灵敏度越高，一般dTTP与标记dUTP的比例在65：35为最佳。但如果使用自备的其他标记核苷酸，如fluorescein、hydroxycoumarin、resorufin和aminoallyl标记的dUTP，则用户需要自己摸索其与dTTP之间的最佳比例，如果使用32P标记的dUTP，则比活最好为3000Ci/mmol，浓度为好为10uCi/μL，并且不需要加入dTTP。
4. 轻柔吹打混匀。如有液滴沾在管壁上，高速离心数秒使所有液体集中在管底。
5. 37℃保温1-20小时。标记效率跟模版量和保温时间相关，具体见下表：

模版DNA用量	1小时后探针合成量	20小时后探针合成量
10ng	80ng	900ng
30ng	150ng	1.35μg
100ng	350ng	1.65μg
300ng	750ng	2.2μg
1μg	1.3μg	2.6μg
3μg	1.6μng	2.6μg

6. 加1μl自备的0.5M EDTA(pH8.0)终止反应，立即放冰上待用或放-20℃保存一年。用前需要加热100℃ 5分钟使DNA探针变性成单链，然后直接加入到杂交反应液中即可。如果电泳检测，标记产物将是弥散状态。
 注意：本方法标记核苷酸掺入率极高，因此可以不经纯化直接使用。如果需要纯化，注意不要用酚抽提法纯化非同位素(生物素、DIG和其他等)标记的DNA探针，因为这些标记分子疏水性强，能使标记的DNA进入疏水的有机相而丢失，但可以用乙醇沉淀和Sephadex G50回收(可另购非同位素探针柱式纯化试剂盒)。对比活高的同位素探针，由于其极其不稳定，因此应该立即使用，不要长久放置。

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·Zetterqvist固定液
编号：BTN131280
英文名称：Zetterqvist Fixative Solution
规格：250mL
本产品为常用固定液，主要成分为巴比*(代"妥")*、乙酸*等。此固定液是活检及动物实验较好的固定液，固定效果较单纯甲醛更好。固定时间一般15分钟-1小时为宜。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

·柱式石蜡包埋组织DNA提取试剂盒
编号：BTN130934
英文名称：FFPE DNA column extraction kit
规格：30次
本产品为常用固定液，主要成分为巴比*(代"妥")*、乙酸*等。此固定液是活检及动物实验较好的固定液，固定效果较单纯甲醛更好。固定时间一般15分钟-1小时为宜。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

·大肠杆菌DH10Bac化学感受态细胞
编号：BTN140576
英文名称：E.coli DH10Bac Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
 本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌DH10 Bac感受态细胞，适用于昆虫杆状病毒Bac-to-Bac 系统中同源重组的菌株，用于产生重组Bacmid。使用pUC19质粒检测，本产品转化效率可达107CFU/μg。
 DH10Bac细胞包含亲本Bacmid bMON14272和辅助质粒 pMON7124。亲本Bacmid 包含一个mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和lac Zα-互补因子。
 辅助质粒包含tns ABCD 区域，该区域提供了mini-Tn7从供体质粒插入亲本Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如pFastBac 系列质粒(pFastBac1，pFastBacDual等)含有Tn7R和Tn7L 同源重组臂，Tn7R和Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和SV40 病毒的PolyA 加尾信号。当含有靶基因pFastBac的重组质粒转化到DH10Bac细胞后，发生重组后就可产生重组Bacmid，提取纯化重组Bacmid转染昆虫细胞Sf9或Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外，DH10Bac细胞中的The φ80dlacZDM15基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象，用于重组bacmid的蓝白斑筛选。
 菌株基因型为：F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ-rpsL nupG/pMON14272/pMON7124。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，避免反复冻融，有效期半年。

自备试剂：重组质粒、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 制备含有如下抗生素的LB 固体平板：50 μ g/mL Kanamycin，7 μ g/mL gentamicin，10μg/mL tetracycline，100μg/mL X-gal，40μg/mL IPTG。
2. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以100μL感受态细胞为例。
3. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入1-10 ng 重组质粒，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
4. 42℃热击90秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
5. 每个离心管中加入900μl 无菌的SOC(不含抗生素)，混匀后置于37℃ 摇床，200rpm 振荡培养4小时。
6. 用 SOC培养基进行10倍梯度稀释，如分成3个稀释梯度10-1,10-2,10-3。
7. 取 100μl的各个梯度的培养物用于涂布。等平板中的液体完全吸收后，倒置平板，37℃培养24-48小时。
8. 保留剩余的菌液保存于4℃，视平板上菌落生长情况决定去留。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。


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·LB-Lennox培养基
编号：BTN100820
英文名称：LB-Lennox Medium Powder
规格：250g
LB培养基全名是Lysogeny Broth(非Luria-Bertani)，它是由美国科学家Giuseppe Bertani在1951年独立开发。Lennox将其Glucose去掉，并将NaCl浓度从0.5 g/L增加到15 g/L。本产品就是根据Lennox配方制备，可用于各种细菌培养。其盐浓度较LB Miller低一倍，主要跟盐敏感抗菌素(如Zeocine)一起使用。本产品加水灭菌后即得液体培养基，即可使用。配制一升液体培养基需要25g本产品。

储存条件：常温运输及保存，有效期半年。

·Denhardt溶液(同位素探针)
编号：BTN91104A
英文名称：Denhardt Solution
规格：250mL
本产品是最经典的、用于核酸膜杂交时降低膜对标记探针的非特异结合的试剂，早在Southern杂交出现前10年由Denhardt发明，该产品可用与Southern(含单拷贝基因)、Northern、非同位素杂交(B型规格)，与硝酸纤维素膜、尼龙膜等各种常用的核酸杂交介质兼容。A和B分别适用于同位素和非同位素探针。

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

·大肠杆菌Tuner(DE)plysS感受态细胞
编号：BTN130564
英文名称：E.coli Tuner(DE)plysS Rosetta Competent Cell
规格：0.1mL*10
 Tuner(DE3)plysS是的Tuner(DE3)衍生菌株，为高度严紧表达宿主菌，用于毒性蛋白表达，lac 透性酶突变，可以精细控制表达水平。抗性为*霉素(34μg/ml)。

基因型：F–ompT hsdSB(rB– mB–)gal dcm lacY1(DE3)plysS(CmR)

储存条件：干冰运输，-80℃保存，有效期6个月。


随机引物法DNA探针标记试剂盒打折促销关键词：随机引物法DNA探针标记试剂盒,Random Primer DNA Labeling Kit,BTN90603A

HC0081 PCR管(鼓盖)
F030230 HRP标记兔抗人IgG抗体 Rabbit Anti-Human IgG*HRP
YPD/YEPD培养基   500ml
83-44-3 脱氧胆酸 Deoxycholic Acid
ARB10743 人纤溶酶原(Plg)酶标法分析 Human plasminogen,plg ELISA KIT
A0101 胎牛血清(无菌采制) 100ml/200ml/500ml
硅*型吸附剂 Amoxicillin trihydrate 1343-88-0
Tricine-SDS-PAGE凝胶配制试剂盒   30T
BTN130534 抗凝血酶Ⅲ溶液 Antithrombin III Solution
(不需DNA酶消化)"
二**(代"胺")试剂(1%)   100ml
ARB12843 小鼠内皮型一氧化*(代"氮")合成酶(eNOS)代做ELISA实验 Mouse endothelial nitric oxide synthase,enos ELISA KIT
ARB10005 人11-去*血栓烷B2(11-DH-TXB2)免费代测 Human 11-dehydro-thromboxane b2,11-dh-txb2 ELISA KIT
9000-70-8 明胶 Gelatin
BTN131183 链激酶 Streptokinase
BTN100941 通用型全基因组扩增试剂盒 Universal WGA Kit

我公司生产供应销*(代"售")的探针标记及检测产品正全系列现货促销，满分期待您的垂询选购随机引物法DNA探针标记试剂盒打折促销。