1M Tris-HCl(pH8.0)(DNA级)现货供应

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")1M Tris-HCl(pH8.0)(DNA级)现货供应，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：1M Tris-HCl(pH8.0)(DNA级)现货供应
编号：BTN101206
规格：250mL
品牌：百奥莱博

1M Tris-HCl(pH8.0)(DNA级)现货供应极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·内毒素清除试剂盒
编号：BTN160692
英文名称：Endotoxin removing Kit
规格：1.5mL
本试剂盒使用的是一类高效内毒素清除树脂，它以修饰过的多粘菌素B(PMB)为配体，进行特异性的内毒素清除。经此专用亲和介质纯化，样品最终的内毒素水平可低于0.1 EU/mL。

细菌内毒素(脂多糖，LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分。人们在研究革兰氏阴性菌血症和内毒素血症的过程中，发现细菌内毒素在其中起着关键的作用，内毒素使机体免疫功能严重受损，进一步的发展可能引发脓毒性休克，弥散性血管内凝血，急性呼吸窘迫综合症，全身炎症反应综合症或致命性多器官功能衰竭。因此，内毒素的清除对于人类疾病治疗的注射型药品、生物制品等都是必须的，尤其对于基因药物、蛋白药物、单抗克隆药物、治疗性疫苗、小分子化学药物等生物制品的下游纯化处理来说就显得非常重要。

试剂盒特点：
1.高稳定性，高去除效率。
2.高结合力：> 2000,000 EU/mL。
3. pH范围为5-10时，亲和介质对内毒素的清除率在92%以上；pH值在7-8时，清除效率最高。
4. 无需恒流泵即可调节流速。
5. 重复使用 5次不会改变柱子效果。
6. 使用方便，试剂盒中提供无热原缓冲液，无热原收集管及无热原枪头等。
7.适合纯化对象为蛋白，多肽，抗体，多糖等。
8.可耐受试剂：20% DMSO，20% 乙醇，20% 甘油;1 M 尿素，300mM咪唑; 0.05% 吐温-20，10mM DTT等。

试剂盒组成：

 

成分	规格
专用亲和介质	1.5mL预装柱
再生缓冲液	125ml
平衡缓冲液	125ml
流速控制器	1个
无热原接收管	1 包(3 支/包)
无热原枪头(1mL)	2 包(6 支/包)
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.样品处理：样品的pH值和离子强度在内毒素去除的过程中起着重要作用。虽然结合内毒素的pH范围在6-9，但是7-8的pH范围是纯化的最佳范围。合适的离子浓度可以降低非特异性吸附，0.15-0.5 M NaCl的条件可以得到一个很好的去除效率和低的样品损失。所以，纯化之前可以使用处理过的*化*，0.1 M的*氧化*或0.1 M盐*(代"酸")来调节离子强度或pH值。
2.活化亲和介质：将预装柱置于铁架台，垂直固定，去除预装柱顶部的盖子，打开流速控制器，使保护液在重力作用下流干，加入5mL的(预冷)再生缓冲液，调节流速控制器，保持流速在0.25mL/min(或者10滴/min)，待再生缓冲液流干，再加入5mL 再生缓冲液，再重复操作两次，确保体系保持无热原(即内毒素)存在。即使是第一次使用也必须进行这一步操作。这步操作大约需要60分钟完成。
3. 平衡亲和介质：活化完毕后，加入6mL的(预冷)平衡缓冲液，调节流速控制器，保持流速在0.5mL/min，流干平衡缓冲液，再按此操作重复两次。这步操作大约需要40分钟完成。
4.内毒素清除：将流速控制器关闭，使用无热原枪头将样品加入，打开控制器，控制流速不高于0.25mL/min，流出液体积达到1.5mL后，使用无热原接收管接受样品，样品流干后，再加入1.5mL-3.0mL的(预冷)平衡缓冲液淋洗，收集淋洗液。检测样品浓度及内毒素水平。
5. 再次使用：如果流出样品内毒素水平未能达到预期值，需要将预装柱重新再生，按照步骤1 重新再生，然后上样纯化。
6. 储存条件：如果预装柱用完后需要保存，先用10mL 平衡缓冲液平衡柱子，待平衡液流干，加入1.5mL的再生缓冲液(含0.02%的叠氮化*)。


1M Tris-HCl(pH8.0)(DNA级)现货供应关键词：pH8.0,BTN101206,DNA级,百奥莱博,1M Tris-HCl(pH8.0)(DNA级)


·Maximov固定液
编号：BTN131288
英文名称：Maximov Fixative Solution
规格：250mL
本固定液主要成分为*化汞、重铬酸*、甲醛。与Zenker固定液相比，本产品不含铬酸，所以重铬酸*未被酸化，因此，对细胞浆固定较好。甲醛有促染胞浆的作用，增加对酸性染料的亲和力。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

·LB培养基
编号：BTN100602
英文名称：Lysogeny Broth Medium，Powder
规格：250g
LB培养基是由美国科学家Giuseppe Bertani在1951年独立开发。但现在常用的LB配方是由Miller修改而成，主要是去掉Glucose并把NaCl浓度从0.5 g/L增加到10 g/L。本产品就是根据Miller配方制备的干粉型培养基。

储存条件：常温运输及保存，有效期两年。

使用方法：称取本产品25.0 g于1 L蒸馏水或去离子水中，加热溶解，分装，121℃高压灭菌15分钟，备用。

·pUCm-T载体
编号：BTN160101
英文名称：pUCm-T vector
规格：1μg
本产品是一种高效克隆PCR产物(TA Cloning)的专用载体。本载体由pUC系列载体改造而成，在pUC载体的多克隆位点处插入特殊的限制性内切酶识别位点，酶切后能在载体的3´端形成悬挂的“T”末端。很多DNA聚合酶在进行PCR扩增时会在PCR产物双链DNA 每条链的3´端加上一个突出的碱基A。这样，pUCm-T载体的两端就可以和PCR产物的两端进行正确的AT 配对，在连接酶的催化下，就可以把PCR产物连接到，pUCm-T载体中，形成含有目的片断的重组载体。可以通过蓝白斑筛选有插入片断的重组克隆，大大提高了3´末端A 突出PCR产物的连接、克隆效率。本产品应用于进行TA 克隆，克隆PCR产物。对克隆后的PCR产物可以用M13通用引物进行DNA 测序。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一. 实验准备
1. PCR产物3´末端带有突出的A碱基：Taq、Tth、Ampli Taq、Klen Taq DNA聚合酶扩增的PCR产物3´末端均带有突出的A碱基。建议扩增的PCR产物通过琼脂糖凝胶电泳进行回收，再进行连接转化实验。
2. PCR产物3´末端没有突出的A碱基：Pfu、Pwo、Tli或DeepVent等DNA聚合酶具有3´5´外切酶活性，其扩增的PCR产物末端可能不带有3´A，要对这种平末端PCR产物进行克隆，应先对其进行3´末端加A，再进行连接转化实验。

二.连接反应
3.在一个标准的10mL连接反应体系中，加入下列成分：

反应组分	10μl反应体系
插入的目的片段	xμL(0.2 pmol)
本产品	1μL(50 ng)
10×连接酶缓冲液	1μL
T4 DNA连接酶	3-5 U
补水到	10 L

 注意:一般最后加入T4 DNA连接酶。
4. 用移液器吹打反应混合液使之混匀后，16-23℃连接1～12小时(或按T4 DNA连接酶供货商提供的操作手册进行连接)。

三．细菌转化和鉴定
5. 将100μl感受态细胞置于冰上解冻后，完全解冻后轻轻将细胞均匀悬浮。
6. 加入上述5μl连接液，轻轻混匀，冰上放置30分钟。
7. 42℃水浴热激90秒，再冰上放置15～20分钟。
8. 加入400μl自备的SOC培养基，37℃ 200～250rpm振荡培养1小时。
9. 4000rpm离心5分钟，用枪头吸掉400μl上清液，用剩余的培养基将细胞悬浮。
10. 将细菌悬液均匀涂布在含20μl的IPTG(100mM)和100μl的X-gal(20mg/mL)的*苄青霉素抗性的自备的LB平板上。(涂布菌液的用量可以根据连接的效率及感受态细胞的转化效率而进行适当的调整。)
11. 将平板于37℃培养1小时，然后倒置培养过夜。(先将平板正向放置1小时，以吸收过多的液体。)

四．筛选
12.转化子的蓝白筛选：
 当外源DNA片段插入到pUCm-T载体中后，由于外源DNA的核酸序列存在改变了LacZ基因的编码，从而影响了其产物β-半乳糖苷酶α-片段的活性，因此重组克隆在-gal/IPTG 平板上呈现为白色，而非重组克隆呈蓝色。选择在IPTG/X-gal 平板上生长的白色菌落，用牙签挑至含*苄青霉素的液体培养基，37℃培养过夜。
13.转化子的鉴定：
1)用上述培养的白色菌落的菌液抽提质粒，用PstI单酶切或用其它合适的酶切,琼脂糖凝胶电泳检查片段大小，确定是否含有目的片段。
2)用M13通用引物或其它合适的引物直接进行测序来确定是否含有目的克隆。

操作提示：
1. PCR产物的纯度：
 连接反应前需用琼脂糖凝胶电泳检测PCR反应产物，如果电泳检测PCR产物条带弥散，或出现非特异条带，则需要切下目的条带，用胶回收试剂盒对目的片段进行回收。若PCR产物电泳检测只有预期大小的明显条带，也应使用PCR产物纯化试剂盒直接纯化PCR产物，以除去引物二聚体。不经纯化的PCR产物在某些条件下可直接用于连接，但由于引物二聚体和PCR产物中其它物质的影响，造成含有插入片段的阳性克隆数减少，因而需要筛选很多克隆方可得到含有目的PCR产物的阳性克隆。
2. 平端PCR产物
 具有校正活性的热稳定性DNA聚合酶如Pfu、Pwo、Tli在进行PCR扩增时产生平端PCR产物。这种平端PCR产物可以进行3´末端加A 尾后连接到pUCm-T载体中，采用这种方法进行连接，可大大提高克隆的效率。
3.优化插入片段和载体的摩尔比
1)pUCm-T载体优化的插入DNA片段和载体的摩尔比为3:1，采用3-10:1的连接比例也可成功进行连接。如果你的PCR产物开始连接的不理想，则有必要优化连接比例。
2)PCR产物的量可采用以下公式进行换算：
PCR片段的量(ng)= [加入载体的量(ng)×插入片段大小(kb)/载体大小(kb)]×插入片段和载体的摩尔比
4.筛选含插入片段的转化子
插入片段成功克隆到pUCm-T载体中，可阻断β-半乳糖苷酶的编码序列，因而重组克隆可在指示培养基上通过颜色进行筛选。大多数情况下含有PCR产物的克隆菌为白色，如果PCR片段和LacZ基因在同一读码框内，即PCR片段碱基数是3的整数倍(含3´-A)，并且读码框无终止密码子，则重组克隆菌可能为蓝色。

质粒图谱：



1M Tris-HCl(pH8.0)(DNA级)现货供应关键词：pH8.0,BTN101206,DNA级,百奥莱博,1M Tris-HCl(pH8.0)(DNA级)
  1M Tris-HCl(pH8.0)(DNA级)怎样保存？
一般试剂可保存在玻璃瓶内; 对玻璃有强烈腐蚀作用的试剂，如**酸、*氧化*应保存在聚乙*(代"烯")塑料瓶内; 易被空气氧化、分化、潮解的试剂应密封保存;易感光分解的试剂应用有色玻璃瓶贮存并藏于暗处; 易受热分解及低沸点溶剂，应存于冷处; 剧毒试剂应存于保险箱; 有放射性的试剂应存于铅罐中。如果化学试剂保管不当，就会失效变质，影响实验的效果，并造成物质的浪费，甚至有时还会发生事故。因此，科学地保管好试剂对于保证实验顺利进行，获得 可靠的实验数据具有非常重要的意义。



·DNA marker(300-5000bp)
编号：BTN111108
英文名称：DNA ladder(300-5000bp)
规格：50次
本品由8条单一的、浓度已知的DNA片段组成，其大小分别是300、500、800、1500、2000、3000、5000bp，除1500bp浓度为20 ng/uL外，其余片段的浓度均为为10 ng/uL，可用于琼脂糖电泳。由于含上样液，所以即开即用。由于每次上样总DNA含量已知，每条带的含量可根据其摩尔数的比值计算出来。本产品电泳得到的电泳条带长度准确，明亮清晰，背景较低，稳定性很好。每次加样量为5μL，可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。

储存条件：低温运输、-20℃保存,有效期一年。

使用方法：直接上样电泳，每次加样量为5μL。

使用效果：


疑难解答：
a)如对带型要求较高，建议使用2%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液，电压为250-400V)或2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液，电压为80V)，同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖，同时要经常更换电泳缓冲液。



  我公司是一家专业经营生化试剂、仪器、1M Tris-HCl(pH8.0)(DNA级)、实验室耗材的公司，代理许多国际先进水平的高科技产品，包括分子生物学、细胞生物学、免疫学等多个研究及应用领域。我们努力将欧美专业生产厂家的具有国际先进水平的产品推荐给各类研究人员；另一方面也非常重视自主产品研究和开发，推出了一系列具有竞争力的产品和服务。同时国家对于生物行业的发展给予了极大的重视，更多地侧重于科研的投入。


  我公司是一家生物高新技术企业，主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销*(代"售")。并代理销*(代"售")Omega、Sigma、R&D、GBD、ATCC、HYCLONE等二十多家国外知名品牌，致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务，满足生物化学、分子生物学 、1M Tris-HCl(pH8.0)(DNA级)、细胞生物学、免疫学 ELISA试剂盒等生物科技实验需求。

北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒，更多试剂产品需求，欢迎来电咨询选购1M Tris-HCl(pH8.0)(DNA级)现货供应。