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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输
- 保质期:
一年
- 英文名:
Virus RNA column extraction kit
- 库存:
336
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京现货柱式病毒RNA提取试剂盒厂家直销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货柱式病毒RNA提取试剂盒厂家直销
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
规格:50次
本试剂盒是在一管式病毒RNA提取试剂盒的基础上开发的、专门用于从血清(血浆)等液体样品中提取微量病毒RNA的产品。
试剂盒特点:
1. 操作简单,整个过程只需要20分钟左右,不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
2. 灵敏度高,通过RT-PCR检测到的最终灵敏度可以达到50拷贝/mL。
3. 安全无毒,不需要使用*酚和*仿等有机溶液。
4. 如果加上病毒离心富集步骤,最多可以处理1.5mL液体病毒样品。
5.与RT-PCR和荧光RT-PCR兼容。
6. 价廉物美,性价比远低于国外同类产品。
7.适用于各种材料,包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 柱式病毒RNA提取溶液A | 30ml |
| 离心吸附柱(小提) | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在1.5mL离心管中加入0.1-0.2mL液体病毒样品。如果病毒需要富集,可以将1.5mL液体在4℃下24000 g冷冻离心60分钟,移弃1.3mL后继续操作。
2. 加入0.6mL溶液A,振荡30秒混匀后室温放置10分钟。注意:溶液A在 4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 将溶液全部转移到离心吸附柱中,室温放置2分钟。
4. 12000~15000g室温离心1分钟,弃收集管中穿透液。
5. 加入0.8mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心1分钟,弃收集管中穿透液。
6. 12000~15000g室温离心半分钟。
7.在离心吸附柱的滤膜的中部加入30-100μl通用洗脱液,然后将离心吸附柱套入一新的1.5mL离心管中,室温放置2分钟。
8. 12000~15000g室温离心1分钟,离心管中收集的样品即为RNA。
9. RNA样品可以直接用于RT-PCR或逆转录反应,也可放-80℃长期保存。
北京现货柱式病毒RNA提取试剂盒厂家直销极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·DNA marker(100-5000bp)
编号:BTN70503Y
英文名称:DNA ladder(100-5000bp)
规格:50次
本系列产品用作凝胶电泳中双链线状DNA的分子量大小参照。它们是由一系列大小不同的单一DNA片段混合组成。成分中已经含有上样缓冲液,所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确,明亮清晰,背景较低,稳定性很好。每次加样量为5μL,可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:直接上样电泳,每次加样量为5μL。
使用效果:
注:500bp条带为20ng/uL,其余每条带为10ng/uL
疑难解答:
a)如对带型要求较高,建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液,电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液,电压为80V),同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖,同时要经常更换电泳缓冲液。
c)本产品条带均匀,亮度相当,但在EB胶中长时间电泳有可能会出现250bp以下的条带变淡。可以通过先电泳再染色,加大EB浓度等方法解决。
·RNase A溶液(2mg/mL)
编号:BTN60309
英文名称:RNase A Solution(2mg/mL)
规格:1.5mL
本产品是浓度为2mg/mL的RNase A溶液,不含DNase和蛋白酶活性,可以用于DNA提取(包括质粒DNA提取)时和蛋白质纯化时去除RNA污染。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
北京现货柱式病毒RNA提取试剂盒厂家直销关键词:Virus RNA column extraction kit,柱式病毒RNA提取试剂盒,BTN71001
·柱式植物叶绿体DNA提取试剂盒
编号:BTN120406
英文名称:Plant Chloroplast DNA column extraction kit
规格:15次
本试剂盒是结合植物叶绿体纯化试剂盒和柱式植物DNA抽提试剂盒而推出的新兴产品,专门用于植物叶绿体DNA的快速提取。
试剂盒特点:
1. 纯度高,不含污染和抑制剂,可以直接用于酶切、PCR、real-time PCR、 mμLtiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting,microsatellite analysis等各种后续分子生物学实验,不会发生离心柱堵塞现象。
2.产率一般在1-2μg/1g叶片样品。OD260/280一般在1.8以上。DNA片段长度一般在40-50Kb左右。
3. 本产品足够15次提取,每次可处理30g叶片。
4. 已经成功用于菠菜,大豆,莴笋,白菜,烟草和甜菜等双子叶植物,也适用于单子叶等其他植物(可能需要优化条件)。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 叶绿体纯化匀浆液成分一 | 250mL×2 |
| 叶绿体纯化匀浆液成分二 | 3g |
| Percoll | 60mL |
| 带柄尼龙滤膜 | 1个 |
| 叶绿体DNA纯化溶液A | 15mL |
| 叶绿体DNA纯化溶液B | 7.5mL |
| 叶绿体DNA纯化溶液C | 30mL |
| 离心吸附柱 | 15套 |
| 通用洗柱液 | 15mL |
| DNA洗脱液2.0 | 10mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存(但匀浆液成分二长期保存时需要放4℃),保存期限一年。
使用方法:
注意:叶绿体对温度高度敏感,所以整个操作必须在冰上或者在冷室进行,所用器皿和溶液均需要在4℃预冷。离心时一定要在4℃进行,离心力以g而不是rpm计算。如果需要研究叶绿体的功能,提取还需要在昏暗的光线条件下进行。强烈建议用显微镜监控整个过程中叶绿体的回收情况。
一:叶绿体的纯化
1.实验前1-2天将植物放在暗室培养以减少叶绿体中淀粉颗粒的形成,否则离心时这些颗粒很容易使叶绿体破裂。叶片在实验前需先用自来水洗净,再用蒸馏水淋洗,去掉多余水分。如果叶片采集后不能立即处理,则保存时需要保持叶片湿润,即使如此,叶片的放置时间也不能超过一天。
2.计算实验所需叶绿体匀浆液的体积(下面简称匀浆液),本试剂盒一次实验可处理30 g叶片,对一般植物,每克叶片需要准备4mL匀浆液,则一次实验需要准备120mL匀浆液。对烟草和大豆,每克叶片需要6mL匀浆液,则一次实验需要准备180mL匀浆液。为了保险可以多配10%。
3.实验当天制备匀浆液。制备方法是:将自备的去离子水与试剂盒提供的匀浆液成分一在干净的玻璃或塑料容器中按4:1的比例混合,然后在每100mL混合液中加入匀浆液成分二干粉0.1g(终浓度为0.1%),轻柔搅拌10分钟后,所得溶液即为匀浆液。冰上预冷待用。匀浆液只能当天使用,不能放置。
4.预留1.5mL用于悬浮叶绿体,其余匀浆液转移到Waring匀浆机(即家用制备果汁的匀浆机)中,再快速将新鲜植物叶片的叶脉去除,再将叶片剪成1-3cm2大小的碎片,浸泡在匀浆机里面的匀浆液中。
5.低速匀浆10秒,避免起泡沫。用玻璃棒把液面的叶碎片按入到匀浆机底部,再低速匀浆10秒。
注意:还可用Dounce玻璃匀浆器,Polytron匀浆机和研磨(加玻璃珠)等匀浆,但它们单次处理量小,需分成很多份处理后再汇集,非常不方便。
6.用带柄尼龙滤膜过滤匀浆液,用预冷的200mL量筒收集穿透液,再等分到4个预冷的50mL的塑料离心管中(每个管中的穿透液不要超过35mL)。带柄尼龙滤膜洗涤干净后可反复使用。
7.在水平转子离心机上4℃ 200g离心3分钟(对菠菜,白菜和莴笋材料)或400g离心1分钟(对甜菜材料),白色沉淀为未破裂的细胞或细胞核。其他植物材料则需要用户自己摸索最佳离心力。
8.将上清液(含叶绿体)转移到一个新的、预冷的50mL塑料离心管中。
9.在水平转子离心机上4℃ 1000g离心7分钟,小心弃上清,沉淀含叶绿体。
10.在沉淀中加入1.5mL预冷的匀浆液,手弹离心管底部使叶绿体重悬。
注意:重悬时最好避免溶液起泡,也不要用枪头吹打,否则叶绿体容易破裂。沉淀下有白色淀粉属于正常现象,但重悬叶绿体时避免将白色淀粉重悬。
11.将4管叶绿体重悬液汇集(共约6mL),得到叶绿体粗提液。
12.如果对叶绿体DNA是否含细胞核DNA的要求不高,则叶绿体粗提液可以直接用于叶绿体DNA纯化,具体操作是在水平转子离心机上4℃ 1000g离心7分钟,小心弃上清,沉淀为叶绿体,直接用于DNA纯化(见步骤二)。
13.如果需要无细胞核DNA污染的叶绿体DNA,则按以下流程操作:在50mL塑料离心管中先加入6mL匀浆液成分一和4mL的Percoll,充分混合均匀得到40%的Percoll溶液,在其液面上小心铺上6mL的叶绿体粗提液,在水平转子离心机上4℃ 1700g离心6分钟,管底绿色沉淀为完整的叶绿体,液面的绿色部分为破碎的叶绿体。小心将上清去除后,直接将沉淀(完整叶绿体)用于叶绿体DNA纯化(见步骤二)。
二:叶绿体DNA的纯化(溶液A和溶液B容易产生沉淀,溶液B十分粘稠,均需65℃溶解并摇匀后待用)
14.将600μL预热的溶液A加入到叶绿体沉淀中后充分吹打混匀。
15.加入300μL预热的溶液B,震荡混匀10-30秒。
注意:溶液B非常粘稠,可以采取称量方法称取300mg(约等于300μL)使用或将1mL枪头剪去一截后再吸取300μL使用。
16.65℃放置3~5分钟。如果室温放置,DNA产量会降低10-20%。
17.加入200μL自备*仿,震荡混匀10-30秒。
18. 12000rpm室温离心2分钟。此时上清液将变得透明,中间层有白膜。小心转移上清液(约0.8mL)到一个新的3-5mL离心管中,避免触及中间层的白膜,可留少量上清不取。
19.加入1.5倍体积(约1.2mL)的溶液C,颠倒混匀后先转移0.7mL到离心吸附柱中,室温放置至少2分钟。12000rpm室温离心1分钟,DNA将吸附在离心吸附柱的膜上,倒弃收集管中的穿透液。
20.再将剩余的溶液按上步方法上柱。
21.将0.5mL通用洗柱液加入到吸附柱中,12000rpm室温离心1分钟,弃穿透液。重复操作一次。空甩半分钟去除残留液体。
22.将离心吸附柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中,加50-100μL DNA洗脱液2.0,室温放置3~5分钟。
23.12000rpm室温离心1分钟即得植物叶绿体DNA溶液,直接取5-10μL电泳检测,其余放冰箱备用。
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·改良型天狼猩红染色试剂盒
编号:BTN121104
英文名称:Enhanced Sirius Red Straining Kit
规格:100mL
天狼猩红是一种很强的酸性染料,易与胶原纤维中的碱性基团反应,使胶原纤维产生明显的双折光现象,在偏振光显微镜下显示特异性地呈现红色。本产品就是在此原理的基础上改良后开发的产品。
产品特点:
➤ 即开即用,用户不需要单独配制各种溶液。
➤染色过程只需几分钟,比传统的苦味*(代"酸")-天狼猩红染色方法更加快捷。
➤ 增强型,染色结果更加清晰,能根据颜色不同区分Ⅰ型和Ⅲ型胶原。而MASSON染色法却不能显示胶原类型。
➤可用于在普通显微镜下可以观察胶原纤维的分布,也可用于在偏振光显微镜下区分I型和III型胶原。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 100ml |
| 溶液B | 100ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期两年。
使用方法:
一:按常规方法脱蜡至水(本试剂盒不提供所需试剂)。
1.取1×1×0.2cm经过10%福尔马林固定或4%多聚甲醛固定的组织材料。
2.用Leica ASP200S或类似的脱水机按病理常规的流程对组织块进行脱水、透明、浸蜡处理。
3.用Leica EG1150H+C或类似的包埋机将上步处理过的组织块包埋成蜡块。
4.用Leica RM2245或类似的轮转式切片机将包埋组织切成4-6μm 厚的石蜡切片。
5.二甲*脱蜡至水洗。
二:天狼星红染色
6.将切片放入溶液A中一分钟。
7.将切片转移到溶液B中后放置一分钟。
三:染色后处理(本试剂盒不提供所需试剂)
8.用蒸馏水洗涤切片两次。
9.用自备的95%乙醇和无水乙醇脱水各1分钟。
10.二甲*透明处理。
11.中性树胶封片。
12.在普通显微镜下观察,胶原纤维呈现红色,细胞呈现黄色。在偏振光显微镜下,I型纤维呈现强的双折光,颜色为明亮的橙红色或明黄色;III纤维呈现弱的双折光,颜色为绿色。
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文献和实验简单,时间短,纯度高而受到大家的喜爱,RNApure不需要DNA酶消化DNA,节省了时间,避免RNA的降解,从而提高了产量;相对非柱式分离(如TRIzol),去除蛋白及其他杂质干净,提高了纯度,对于细胞、组织、一般植物均非常适合。植物RNA的提取比较难抉择,植物RNA提取受酚、多糖、蛋白杂质、次生代谢物含量的影响,一般用TRIzol提取纯度不高,而且很多植物用TRIzol提取不出来。这时候可以选择多糖多酚植物总RNA提取试剂盒(水仙、辣椒、胡萝卜、玉米、百合、小麦、西红柿、花菜、油菜等)和通用植物
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相关专题 北京百泰克—国内自主研发核酸提取与PCR相关试剂盒商家 1.迅速灭活内源的RNA酶,以防止RNA降解。 以下3个方法均可有效使内源RNA酶失活: 1)用含离液(如胍盐)的细胞裂解液收获样品,并立即匀浆。 2)用液氮瞬间冻结样品。值得特别注意的是:组织块必须保证足够小,在浸入液氮的瞬间就能冻结,以确保瞬间令RNA酶失活。 3)立即将样品置于RNAfixer无液氮RNA样品储存液中
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